邓宇亮 作品数:19 被引量:16 H指数:2 供职机构: 上海交通大学 更多>> 发文基金: 上海市自然科学基金 国家教育部博士点基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
一种血液中稀有细胞蛋白组的检测装置 本实用新型属于血液检测装置,具体涉及一种血液中稀有细胞蛋白组的检测装置。所述装置包括微槽芯片和抗体负载芯片,所述微槽芯片上设有100-10000个微槽,所述微槽用于容纳细胞,所述抗体负载芯片是用于负载抗体微阵列的微流控芯... 施奇惠 邓宇亮 王智华文献传递 用于循环肿瘤细胞捕获的鱼骨型微流控芯片的模拟仿真与优化 被引量:2 2016年 目的通过对鱼骨型微流控芯片进行模拟仿真与优化,实现癌症患者外周血中循环肿瘤细胞的高效捕获。方法用Fluent 15.0软件对细胞在微流控芯片中的流动进行建模仿真,通过MATLAB编程统计芯片在不同结构参数(鱼骨宽度、鱼骨间隙、鱼骨高度、通道高度)、液体流动方向与流速等条件(共计250个条件)下所有细胞可被捕获的位置数目,预测细胞捕获效率,并进行实验验证。结果在鱼骨宽度75μm、间隙125μm、深度70μm、通道深度30μm、流体正向且流速1 m L/h的条件下,鱼骨芯片可以达到最高的细胞捕获效率。结论通过计算流体动力学方法对在不同芯片中的细胞捕获进行模拟,利用MATLAB建立捕获效率的统计模型并进行优化,快速筛选出可获得细胞高效捕获的参数组合,并通过实验,对优化的芯片参数进行验证,实现了循环肿瘤细胞的高效捕获。 汪民娇 王智华 邓宇亮 施奇惠关键词:微流控芯片 循环肿瘤细胞 流体模拟 肺癌患者外周血中循环肿瘤细胞的快速分离与体外培养 被引量:6 2017年 循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)是从肿瘤病灶脱落并进入外周血液循环的处于游离状态的肿瘤细胞,代表了肿瘤病灶的分子特征,可用于对肿瘤的"液体活检"。但外周血中CTCs数目极为稀少,使得后续针对CTCs的分子与功能分析面临巨大挑战。鉴于此,本文建立了一种基于微流控芯片和免疫磁珠的能够快速从肺癌患者的外周血中分离CTCs的方法。该方法直接针对全血进行一步分离,可避免血液样本预处理及富集等过程对细胞造成的损伤,从而有效地保护CTCs的活性(>90%)。分离得到的CTCs可富集在小体积中(80μL),实现高密度的细胞培养,完成体外扩增,扩增后的CTCs可以被进一步冻存、复苏及再次增殖培养,表明已经对患者血液中的CTCs成功建系。本文进一步对CTCs进行了基因突变(EGFR、KRAS、PIK3CA、TP53和BRAF)检测及荧光标记葡萄糖类似物(2-NBDG)摄取的功能分析,证明CTCs存在较大异质性。本研究成功实现了对外周血中稀少的CTCs进行体外培养,并对CTCs进行了基因、蛋白、功能等各个层面的分析,这对于肿瘤精准医疗具有重要的临床意义。 吴文君 王智华 王卓 邓宇亮 施奇惠关键词:循环肿瘤细胞 微流控芯片 体外培养 从血液中分离高纯度循环肿瘤细胞的方法 本发明公开了一种从血液中分离高纯度循环肿瘤细胞的方法,该方法包括如下步骤:A、在微流控芯片的微通道的表面负载单链多核苷酸,通过该多核苷酸与抗体-标记单链多核苷酸复合物中的标记单链多核苷酸特异性结合使微通道表面负载抗体;B... 施奇惠 邓宇亮 孙帅 张瑜文献传递 肺癌循环肿瘤细胞的单细胞EGFR基因突变检测 被引量:8 2015年 循环肿瘤细胞(Circulating tumor cells,CTCs)是从肿瘤原发病灶脱落并侵入外周血循环的肿瘤细胞。由于CTCs存在较大的异质性,其与癌症发展转移密切相关,但目前尚缺乏有效的CTCs单细胞异质性检测方法。鉴于此,本文发展了在单细胞层面对CTCs进行基因突变的检测方法并用于单个肺癌CTC的EGFR(Epidermal growth factor receptor)基因突变检测。首先用集成式微流控系统完成血液中稀有CTCs的捕获,接着将CTCs释放入含有多个微孔的微阵列芯片中,得到含有单个CTC的微孔,通过显微操作将单个CTC转入PCR管内完成单细胞基因组的放大,并进行单细胞的EGFR基因突变检测。以非小细胞肺癌细胞系A549、NCI-H1650和NCI-H1975为样本,通过芯片与毛细管修饰、引物扩增条件(复性温度、循环次数)的优化,结果显示在复性温度59℃、30个循环次数的条件下,引物扩增效果最优。利用该方法成功地对非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer,NSCLC)患者的血液样本进行了测试。从患者2 m L血液中获取5个CTCs,分别对其EGFR基因的第18、19、20、21外显子进行测序,发现该患者CTCs均为EGFR野生型。研究结果证明此检测方法可以灵敏地用于单个CTC基因突变的检测,在临床研究上具有重要的指导意义。 孙帅 邓宇亮关键词:循环肿瘤细胞 微流控芯片 EGFR 从血液中分离高纯度循环肿瘤细胞的方法 本发明公开了一种从血液中分离高纯度循环肿瘤细胞的方法,该方法包括如下步骤:A、在微流控芯片的微通道的表面负载单链多核苷酸,通过该多核苷酸与抗体‑标记单链多核苷酸复合物中的标记单链多核苷酸特异性结合使微通道表面负载抗体;B... 施奇惠 邓宇亮 孙帅 张瑜文献传递 体液样本中稀有肿瘤细胞的检测分型方法及其试剂盒 本发明提供一种对体液样本中高代谢活性稀有肿瘤细胞的检测分型方法,包括如下步骤:将体液样本中的有核细胞与能够产生荧光信号的第一代谢标志物和第二代谢标志物共同孵育;通过高通量成像检测所有细胞所摄取代谢标志物的荧光信号,从而确... 施奇惠 邓宇亮 汤寅 王卓循环肿瘤细胞代谢活动检测方法和装置 本发明提供了循环肿瘤细胞代谢活动检测方法和装置。具体地,本发明提供了一种检测循环肿瘤细胞代谢活动的方法,包括步骤:(a)从外周血样品中富集分离循环肿瘤细胞CTC;(b)将循环肿瘤细胞置于微孔阵列芯片中;(c)对循环肿瘤细... 施奇惠 邓宇亮 汤寅文献传递 一种循环肿瘤细胞检测试剂盒 本实用新型属于稀有细胞检测领域,具体涉及一种循环肿瘤细胞检测试剂盒。其包括盒体、设置在盒体内的试剂瓶组和微流控芯片,所述微流控芯片由PDMS(聚二甲基硅氧烷)基片和载玻片贴合构成,所述PDMS基片表面分布微通道,所述微通... 施奇惠 邓宇亮 汪民娇 王智华文献传递 从血液中分离循环肿瘤细胞的方法 本发明公开了一种从血液中分离循环肿瘤细胞的方法,该方法包括如下步骤:A、将血液样品与能够特异性结合循环肿瘤细胞表面独特抗原的抗体-标记单链多核苷酸复合物混合并孵育;B、将孵育后的血液样品流经微流控芯片,芯片的微通道内至少... 施奇惠 邓宇亮 张瑜 孙帅文献传递