连小云
- 作品数:14 被引量:43H指数:3
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- Cyclin D1-siRNA真核质粒的构建及对HepG2肝癌细胞增殖的影响被引量:1
- 2011年
- 目的 利用PGE-1建立针对抑制cyclinD1功能的siRNA 真核表达载体以及对肝癌HepG2细胞增殖和周期的影响.方法 针对cyclinD1 mRNA序列设计合成4对寡核苷酸,退火后连接到PGE-1质粒中,PCR及测序鉴定.用脂质体将重组质粒转染到HepG2中,RT-PCR cyclinD1 mRNA的表达,G418筛选后用RT-PCR和Westernblot技术分别检测cyclinD1 mRNA和蛋白质水平;流式细胞仪测定细胞周期的变化;MTT法测定细胞的生长.结果 在设计的4条靶序列中有一序列重组成质粒后,可明显抑制cyclinD1的表达;目的 序列表达载体转染HepG2细胞后,可以明显减少G2-M期细胞的比例,当HepG2细胞稳定转染针对cyclinD1的干扰质粒后,mRNA和蛋白质的表达也明显降低;HepG2细胞cyclinD1表达降低后,其生长也受到明显抑制.结论 成功构建针对siRNA-cyclinD1真核质粒,在体外可成功抑制人肝癌HepG2细胞的增殖.
- 王一连小云张玎王晖王岐山
- 关键词:细胞周期素D1人肝癌HEPG2细胞细胞周期增殖
- DC-CIK细胞的生物学活性及抗淋巴瘤细胞的作用被引量:13
- 2007年
- 目的研究细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)与树突状细胞(DC)共培养后DC-CIK细胞的体外增殖能力、免疫表型变化、分泌细胞因子水平以及抗淋巴瘤细胞活性。方法正常人外周血单个核细胞诱导DC和CIK细胞,将DC与CIK共培养,以CIK细胞单独培养为对照。用台盼蓝活细胞计数计算细胞扩增倍数,MTT法测定杀伤活性,流式细胞术分析免疫表型,ELISA双抗体夹心法检测分泌干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-12(IL-12)的水平。结果DC-CIK细胞增殖能力明显高于CIK细胞(P<0.05);DC、CIK细胞共培养后,CD3+CD8+、CD3+CD56+双阳性细胞比率较同条件下CIK细胞组显著增多(P<0.05);共培养3 d,DC-CIK细胞上清液中IL-12、INF-γ的分泌量均比CIK细胞单独培养的分泌量高(P<0.01,P<0.05);在5∶1-40∶1的效靶比范围内,DC-CIK细胞对淋巴瘤细胞的杀伤率显著高于CIK细胞(P<0.05),且杀伤率与效靶比呈正相关。结论DC-CIK细胞的增殖能力、分泌细胞因子水平、抗淋巴瘤细胞活性均高于CIK细胞,为DC-CIK细胞免疫治疗提供了实验和理论依据。
- 魏绪仓连小云赵文理杨娣娣韩秀蕊邢佩霓李梅生
- 关键词:CIK细胞DC-CIK细胞生物学活性抗淋巴瘤
- 多发性骨髓瘤伴结晶体储存组织细胞增多症1例
- 2020年
- 患者男性,47岁,因肋骨骨折入院。尿蛋白(+++)、尿潜血(+)、肌酐240μmol/L,提示肾功能异常,行肾穿刺活检。病理诊断:IgA肾病(Ⅲ级);给予激素联合环磷酰胺治疗。2个月后,患者因腹泻再次入院,PCT 0.89 ng/mL、Hb 38 g/L、血清Igκ5240 mg/L(正常值:6.7~22.4 mg/L),提示重度贫血伴急性胃肠炎。随后肌酐347.03μmol/L及真菌检测G实验273.9 pg/mL持续升高,肾衰及肺部感染加重。
- 王九菊王九菊李真真魏绪仓连小云
- 关键词:多发性骨髓瘤病例报道
- 丝裂素活化蛋白激酶通路在甲异靛诱导U937细胞凋亡中的作用被引量:1
- 2010年
- 以往实验研究表明,细胞信号转导过程中丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)家族的活化除与细胞的生长增殖有关外,也参与细胞凋亡的调节.我们观察了甲异靛在诱导U937细胞凋亡过程中MAPK的三种信号分子ERK1/2、JNK及p38活性的变化,并分析其与细胞凋亡的关系,旨在进一步阐明甲异靛诱导白血病细胞凋亡的分子机制.
- 王一张玎连小云苗玉迪王岐山姜文奇
- 关键词:U937细胞凋亡丝裂素活化蛋白激酶甲异靛细胞信号转导生长增殖
- 重组人血管内皮生长因子165对K562白血病细胞生物学活性的影响
- 2012年
- 目的:探讨人重组血管内皮生长的因子165对人K562白血病细胞生物学活性的影响。方法:利用pcDNA3.1(+)质粒构建人重组含VEGF165的真核表达载体,脂质体转染至K562白血病细胞,并用G418筛选阳性克隆;以RT-PCR测定重组质粒载体VEGF165基因的表达;MTT法测定K562白血病细胞的生长;建立裸鼠皮下移植人K562肿瘤模型,测定肿瘤体积的大小;免疫组化检测肿瘤的微血管密度(MVD)。结果:成功构建pcDNA3.1(+)-VEGF165表达质粒。K562白血病细胞转染重组质粒后,明显增加K562细胞中VEGF165 mRNA的表达,转染重组质粒的K562细胞增殖明显快于对照组;移植重组pcDNA3.1(+)-VEGF165质粒转染的K562细胞之后,荷瘤鼠移植瘤生长明显快于对照组;并且移植瘤组织微血管密度明显高于对照组(P<0.05)。结论:利用pc DNA3.1(+)真核表达质粒可成功构建含人VEGF165的重组质粒,重组质粒转染K562细胞后,体内外均明显促进K562细胞增殖。
- 王一张玎连小云王晖王歧山
- 关键词:血管内皮生长因子165K562白血病细胞真核载体细胞增殖
- 血管内皮生长因子在小鼠前胃癌及癌前病变中的表达及干预试验研究
- 2003年
- 目的 研究蟾皮、全虫、蜂房 (CQF液 )对小鼠前胃癌及癌前病变的阻断作用及其相应机理。方法 应用肌氨酸乙酯盐酸盐和亚硝酸钠灌胃建立小鼠前胃癌及癌前病变模型。免疫组化ELPS法测定单纯诱癌组 (32只 )、单纯中药组 (2 0只 )及中药阻断组 (48只 )血管内皮生长因子 (VEGF)的表达。结果 单纯诱癌组的癌及癌前病变发生率显著高于中药阻断组 (P <0 .0 5 )。VEGF表达阳性率及其强度在癌及癌前病变间存在显著差异 ;诱癌组VEGF达阳性率及其强度显著高于阻断组。结论 CQF液对小鼠前胃癌及癌前病变具有阻断作用 ,其机理可能与对VEGF表达的调控相关。
- 陈谦连小云郑伟周斌吴向陇
- 关键词:前胃癌癌前病变血管内皮生长因子蟾皮全虫
- 抑制Cyclin D1基因对K562细胞生长和Vp16敏感性的影响被引量:1
- 2012年
- 目的应用RNA干扰技术(RNA interference,RNAi),构建针对细胞周期素D1(Cyclin D1)的RNAi,并检测其对K562细胞增殖和对化疗药物敏感性的影响。方法采用针对Cyclin D1的RNAi质粒载体转染K562细胞,用反转录-聚合酶链反应和Western blot法检测Cyclin D1RNAi后mRNA和蛋白水平的表达;用MTT实验测定细胞的增殖;流式细胞术测定细胞周期和凋亡。结果针对Cyclin D1 RNAi转染白血病K562细胞后,可以明显降低白血病K562细胞中Cyclin D1的mRNA和蛋白的表达,明显抑制K562细胞的增殖,提高化疗药物Vp16诱导的细胞凋亡。结论利用RNAi抑制Cyclin D1可抑制白血病K562细胞增殖,提高对化疗药物Vp16的敏感性。
- 王一连小云张玎王歧山
- 关键词:白血病RNA干扰
- 反复口服羟基脲致皮肤癌一例被引量:1
- 2009年
- 患者,女,57岁。2000年6月因乏力伴左上腹不适半年来我院就诊。查体:轻度贫血,浅表淋巴结无肿大,胸骨无压痛,脾脏肿大,Ⅰ线6em,Ⅱ线8cm,Ⅲ线~4cm。血常规:WBC78.1×10^9/L,BPC456×10^9/L,Hb93g/L.RBC2.89×10^12/L,外周血分类:原始粒细胞0.01,早幼粒细胞0.05,中性中幼粒细胞0.08;中性晚幼粒细胞0.10,中性杆状核细胞0.34,中性分叶核细胞0.28;
- 王一连小云张玎苗玉迪王晖王歧山
- 关键词:皮肤癌羟基脲口服脾脏肿大浅表淋巴结
- 血清LDH和β2-MG水平与原发骨非霍奇金淋巴瘤预后关系
- 2010年
- 目的:探讨血清中乳酸脱氢酶(LDH)与β2微球蛋白(β2-MG)水平与原发骨非霍奇金淋巴瘤(PLB)预后的关系。方法:分别采用速率法和免疫比浊法测定67例PLB患者血清LDH和β2-MG值。结果:Ⅳ期或高度恶性PLB患者与Ⅰ期或中、低度恶性PLB患者血清LDH和β2-MG测定值有显著性差异(P<0.05);PLB患者血清LDH和β2-MG测定值正常组的3年、5年、10年生存率、缓解率明显高于测定值升高组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:血清LDH和β2-MG水平可作为PLB患者分期、预后的辅助指标。
- 苗玉迪王磊王晖连小云王一王岐山
- 关键词:乳酸脱氢酶Β2微球蛋白预后
- 全虫抗肿瘤作用研究进展被引量:12
- 2002年
- 连小云暴蕾路明
- 关键词:全蝎化学成分药理抗肿瘤