目的:比较电穿孔法和化学法在多药耐药(MDR)胃癌细胞中转染效果。方法:将表达抑癌基因WTX的质粒分别用电穿孔法和两种化学法(Lipofectamine2000、Attractene)转染MDR胃癌SGC7901/VCR细胞,观察转染后细胞中增强型绿色荧光蛋白(e GFP)和目的基因WTX m RNA的表达情况。结果:e GFP分析结果显示,与无耐药的亲代SGC7901细胞比较,两种化学转染法对SGC7901/VCR细胞的转染效率明显降低(均P<0.05),而电穿孔转染法未见明显降低(P>0.05),且明显高于两种化学转染法对SGC7901/VCR细胞的转染效率(均P<0.05)。RT-PCR结果显示,电穿孔转染的SGC7901/VCR细胞中WTX m RNA表达量明显高于两种化学法转染的SGC7901/VCR细胞中的WTX m RNA表达量(均P<0.05)。结论:对于MDR胃癌细胞,电穿孔转染法不易受其细胞膜成分的影响,可以保持较好的转染效率。
目的探讨回肠造口在预防直肠术后吻合口瘘方面的临床价值。方法通过计算机检索Medline、EM-Base、CENTRAL(cochrane central register of controlledtrials)、中国生物医学文献数据库系统(CBM)、中国期刊全文数据库(CNKI)、万方数据库等,收集国内外公开发表的关于回肠造口在预防直肠术后吻合口瘘方面的临床对照研究。研究对象为行直肠切除吻合术患者,干预措施为预防性回肠造口;对照组未进行回肠造口;结局指标为吻合口瘘发生的相对危险度(RR)。以RR及相应的95%可信区间(95%CI)作为效应指标对结局进行比较;各研究间的异质性采用I2检验,双侧P<0.05认为各研究间存在明显的异质性;采用Eegger法对发表偏倚进行量化检测。结果最终纳入分析的文献12篇,共1 146例患者,其中试验组523例,对照组623例。合并分析结果显示,接受预防性回肠造口者术后发生吻合口瘘的RR值为0.37[95%CI(0.23,0.58),Z=4.33,P=0.000]。结论回肠造口可以显著降低直肠术后吻合口瘘的发生风险。