赖燕来
- 作品数：27 被引量：69H指数：5
- 供职机构：清华大学医学院生物医学工程系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划军队医药卫生科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 神经前体细胞的增殖和分化及其对Parkinson病的治疗作用
- 2003年
- 本实验分离 1 1～ 1 5 d胎鼠的大脑皮层 ( CP)和中脑的神经前体细胞 ( MP) ,观察它们在体外的增殖和分化及其对帕金森病 ( PD)的治疗作用。结果发现 ,CP较 MP生长迅速 ,容易形成神经球 ,加入 N2 / B2 7有助于神经球的形成 ;有 /无血清分化后 ,CP和 MP都能发育成微管相关蛋白 -2 ( MAP-2 )阳性细胞 ,其中 MP倾向于发育成酪氨酸羟化酶 ( TH)阳性细胞。将 MP或 CP植入6 -OHDA损伤的大鼠纹状体后 ,MP发育成的 TH+神经元数量明显地较 CP移植组和对照组者多 ( P<0 .0 5 )且 MP移植后 4～ 8周旋转行为发生明显改善 ,与 CP移植组和对照组相比有显著性差异 ( P<0 .0 5 )。上述结果提示 ,虽然 CP在体外的增殖能力较MP强 ,但 MP更易于分化成 TH阳性神经元并改善 PD大鼠的旋转行为 ,此点对于神经前体细胞治疗 PD的应用极其重要。
- 孙朝晖赖燕来李鹏张丽丽左焕琮谢佐平
- 关键词：神经前体细胞增殖分化PARKINSON病帕金森病
- 抗人粘膜地址素-1单克隆抗体的制备与初步鉴定被引量：1
- 2002年
- 目的制备抗人ＭＡｄＣＡＭ－１单克隆抗体（ｍＡｂ）。 方法以重组人ＭＡｄＣＡＭ－１胞外区蛋白免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠，采用杂交瘤技术制备ｍＡｂ。结果获得１０株可分泌特异性ｍＡｂ的杂交瘤细胞，其腹水ｍＡｂ的效价为３．２×１０５～１．９×１０６，ｍＡｂ的Ｉｇ亚类均为ＩｇＧ１，其中，８株ｍＡｂ的轻链属κ型，２株为λ型。应用于免疫组化染色法，检测表明，正常成人小肠、附睾及前列腺组织中存在ＭＡｄＣＡＭ－１阳性表达的血管内皮细胞。结论 成功地研制出抗人ＭＡｄＣＡＭ－１的ｍＡｂ，为进一步研究ＭＡｄＣＡＭ－１在肠道黏膜免疫中的作用提供了有用的试剂。
- 赖燕来高杰英孔祥英陈志华
- 关键词：单克隆抗体免疫组织化学
- 大鼠Shh-N融合蛋白的表达、纯化及功能研究被引量：1
- 2003年
- 为了获得重组SonichedgehogN端蛋白 (Shh N)并研究其功能 ,应用PCR技术扩增Shh NcDNA ,然后克隆至原核表达质粒中 ,转化E .coli后获得表达菌株 ,经 1mmol/LIPTG诱导高效表达出带有His tag的融合蛋白 ,其中大部分为可溶性蛋白 ,少量为包涵体 .用His tag特异性结合树脂纯化可溶性融合蛋白 ,经SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定为单一区带 ,凝胶自动扫描分析表明 ,Shh N的纯度达 85%以上 .纯化后的Shh N在成纤维生长因子 8(FGF8)的协同作用下 ,能诱导神经前体细胞 (NPC)向酪氨酸羟化酶阳性神经元 (TH+ )发育 .在此基础上可以诱导不同类型的人类干细胞定向分化为多巴胺 (DA)神经元 ,从而为临床治疗帕金森病 (PD)
- 孙朝晖赖燕来曾文文郭雅南左焕琮谢佐平
- 关键词：重组融合蛋白蛋白质纯化神经前体细胞
- 中国洛阳地区汉族人MHC补体单倍型的分析被引量：1
- 1998年
- 应用国际补体参考实验室的方法，对洛阳地区正常汉族家系１８４条染色体做了补体单倍型的检测与分析，并与南方汉族做了比较。共发现频率大于０．０１的补体单倍型１９个，频率居前３位者为ＳＣ３１（０．２１７４），ＳＣ４２（０．１６８５）和ＳＣ３２（０．１０８７），有１１个型别呈连锁不平衡。Ｂｆ，Ｃ２，Ｃ４Ａ和Ｃ４Ｂ等位基因的频率分别以ＢｆＳ，Ｃ２Ｃ，Ｃ４Ａ３，Ｃ４Ａ４，Ｃ４Ｂ１和Ｃ４Ｂ２频率居高。而且洛阳汉族ＢｆＳ，Ｃ２Ｃ和Ｃ４Ｂ３等位基因的频率明显高于广东汉族（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１），显示了南北汉族间的显著差异。此外，就主要补体单倍型频率与日本人、白种人和黑种人做了比较与讨论。结论阐明了北方汉族补体单倍型的种类、频率，以及与南方汉族型别分布的差异。
- 陈仁馨陈立茵赖燕来彭良平张明军
- 关键词：MHC组织相容性复合体汉族
- Wistar大鼠SONIC HEDGEHOG基因的克隆和表达被引量：3
- 2005年
- 为了获得SHH蛋白以研究它在治疗神经变性疾病中的作用 ,本室提取不同胚龄Wistar胎鼠中的总RNA ,应用RT PCR技术获得SHH N的cDNA ,重组于pGEM T载体 ,经测序鉴定后 ,构建原核表达质粒并获得表达菌株Q15 SHH N ,然后诱导SHH蛋白的表达。结果发现 ,在E11.5 E2 0 .5胎鼠的脊索中能克隆到 6 30bp的cDNA片段 ,并且随胚龄增加 ,此片段的表达量逐渐减少 ;测序结果显示 ,此片段及其所编码的氨基酸序列同数据库中人、小鼠和SD大鼠的SHH N的序列有较高同源性 ;表达菌株经诱导后产生约 2 1kD的融合蛋白。提示SHH N是一种发育相关基因 ,在不同种属中的同源性较高 。
- 孙朝晖赖燕来曾文文左焕琮谢佐平
- 关键词：WISTAR大鼠胎鼠脊索原核表达质粒T载体
- 免疫小鼠GALT部位T淋巴细胞回忆反应观测被引量：1
- 1995年
- 以鼠伤寒杆菌减毒株Ｇ３０经口免疫小鼠两次，间隔３或５个月后再刺激，应用间接免疫荧光法检测了小鼠派伊尔氏（ＰＰ）淋巴结、肠系膜淋巴结（ＭＬＮ）及脾脏（ＳＰＬ）中Ｌ３Ｔ４、ＬＹＴ２Ｔ细胞亚群变化并以ＭＴＴ法测定了ＣｏｎＡ诱导的淋巴细胞增殖反应。实验表明：Ｇ３０菌能在ＰＰ与ＭＬＮ中激发Ｌ３Ｔ４亚群及淋转的回忆反应，此外，ＳＰＬ也产生了Ｌ３Ｔ４亚群的记忆应答。提示：Ｇ３０菌确实能诱导细胞免疫应答并形成较强的免疫记忆。
- 赖燕来高杰英
- 关键词：回忆反应T淋巴细胞亚群鼠伤寒沙门氏菌
- 痢疾杆菌免疫小鼠不同部位淋巴组织回忆反应观测
- 1995年
- 为探索痢疾杆菌感染是否产生免疫记忆，本文以福氏痢疾杆菌２ａ经口及腹腔免疫小鼠两次（相隔１４ｄ），间隔三个月后再刺激，应用ＢＡ-ＥＬＩＳＰＯＴ法检测了小鼠Ｐｅｙｅｒ（ＰＰ）淋巴结、肠系膜淋巴结（ＭＬＮ）及脾脏（ＳＰＬ）中特异性ＩｇＡ、ＩｇＧ、ＩｇＭ抗体分泌细胞（ＡＳＣ）的变化；并以ＭＴＴ比色法测定了ＣｏｎＡ诱导的淋巴细胞增殖反应；还观察了小肠粘膜组织切片。实验表明：口服途径能诱导ＰＰ中ＡＳＣ及淋转的回忆反应，小肠粘膜可见淋巴滤泡显著增生；而腹腔途径只在ＳＰＬ中诱导出ＡＳＣ及淋转回忆反应。结果提示：痢疾杆菌感染存在免疫记忆反应。
- 赖燕来高杰英
- 关键词：回忆反应抗体分泌细胞淋巴细胞痢疾杆菌
- 用BA－ELISA斑点法检测痢疾杆菌免疫小鼠GALT中的特异性抗体分泌细胞（ASC）被引量：12
- 1995年
- 改进的ＢＡ－ＥＬＩＳＰＯＴ法使免疫酶斑更为清晰，保存时间延长。用此法检测了痢疾杆菌福氏２ａ经口及腹腔免疫后，小鼠派伊尔氏（ＰＰ）淋巴结、肠系膜淋巴结（ＭＬＮ）及脾脏（ＳＰＬ）中特异性ＩｇＡ、ＩｇＧ、ＩｇＭ抗体分泌细胞（ＡｎｔｉｂｏｄｙＳｅｃｒｅｔｉｎｇｃｅｌｌ，ＡＳＣ）的动态变化，得到有规律的结果：两种免疫途径均能在ＰＰ及ＭＬＮ中诱导出３类特异ＡＳＣ的显著升高，但口服导致的升高其持续时间较腹腔途径为短。此外，腹腔途径还能诱导ＳＰＬ中３种ＡＳＣ升高。
- 赖燕来高杰英
- 关键词：分泌细胞
- 洛阳地区汉族HLA—DRB1^＊04等位基因的PCR—SSO分型
- 1997年
- 对河南洛阳地区汉族进行了ＨＬＡ－ＤＲＢ１＊０４等位基因的ＰＣＲ－ＳＳＯ分型，采用第１２届国际组织相容性专题讨论会（１２ｔｈＩＨＷＣ）推荐的引物和序列特异性寡核苷酸探针，可检测１７个ＤＲＢ１＊０４组特异性等位基因（ＤＲＢ１＊０４０１－０４１７）。在１１６份无血缘关系健康人ＤＮＡ标本中有１６份为ＤＲＢ１＊０４，其中１份为纯合，ＤＲＢ１＊０４的基因频率为０．０７１５。ＤＲＢ１＊０４等位基因分布于５个不同的型别，分别是ＤＲＢ１＊０４０１、０４０３、０４０４、０４０５和０４０６。基因频率以ＤＲＢ１＊０４０５最高（０．０２６２），ＤＲＢ１＊０４０６其次（０．０１７４），二者分别构成ＤＲＢ１＊０４基因组的３５．８％和２３．８％。其它３种等位基因的基因频率均较低（０．００８７）。此外对ＤＲＢ１＊０４等位基因在中国南北方汉族、民族（日本，中国）及人种（白种，黄种）中的分布进行了比较与讨论。将为ＨＬＡ与疾病相关性、移植免疫及人类学研究提供有价值的参考数据。
- 张明军陈仁馨赖燕来陈立茵赵红
- 关键词：DRB1等位基因PCR人白细胞抗原
- 洛阳地区汉族补体B因子主要同种异型遗传多态性分析
- 1998年
- 应用琼脂糖高压电泳和免疫固定技术，检测了洛阳地区健康汉族成人补体Ｂ因子的多态性。在１１９例无血缘关系个体中，Ｂｆ表型为ＳＳ７７人，ＦＳ３２人，ＦＦ１０人。计算出基因频率分别为ＢＦ＊Ｓ：０．７８１５，ＢＦ＊Ｆ：０．２１８５。与广东等南方汉族人的资料相比，其Ｂｆ遗传多态性分布有显著差异，对此进行了讨论。结果提供了具有地域特点的Ｂｆ多态性资料。
- 赖燕来赵红陈仁馨陈立茵陈立茵郭明秋张明军
- 关键词：补体B因子遗传多态性免疫遗传学
