贺明洁
- 作品数：5 被引量：13H指数：2
- 供职机构：江苏大学附属医院更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- miR-200c对结肠癌SW620细胞5-FU化学敏感性的影响被引量：1
- 2014年
- 目的探讨结肠癌SW620细胞株中微小核糖核酸-200c(miR-200c)的表达对5-氟尿嘧啶(5-FU)化学敏感性的影响。方法实验分为miR-200c类似物转染SW620细胞株组(A组)、miR-200c类似物阴性对照转染组(B组)、miR-200c抑制物转染SW620细胞株组(C组)、miR-200c抑制物阴性对照转染组(D组)和空白对照组(E组)。采用RT-PCR、MTS及流式细胞术分别检测转染后细胞中miR-200c的表达、5-FU半数抑制浓度(IC50)及细胞凋亡;Western blot检测转染后细胞中磷酸化丝氨酸/苏氨酸激酶(p-Akt)的表达。结果与B组相比,A组转染24h后miR-200c的表达水平提高了(35.94±0.39)倍(P<0.05),5-FU的IC50提高[(1512.67±0.48)μg/ml vs.(926±0.70)μg/ml](P<0.05),5-FU促细胞凋亡的作用降低[(5.01±0.25)%vs.(8.07±0.16)%](P<0.05)。与D组相比,C组miR-200c的表达水平降低了(19.61±0.86)倍(P<0.05),5-FU的IC50降低[(740±0.60)μg/ml vs.(941±0.59)μg/ml](P<0.05),5-FU促细胞凋亡作用提高[(12.23±0.60)%vs.(8.22±0.18)%](P<0.05)。转染48h后,A组p-Akt的表达较B组升高(P<0.05),C组p-Akt表达较D组降低(P<0.05)。结论在结肠癌SW620细胞中,降低miR-200c的表达可提高结肠癌细胞对5-FU的化学敏感性,可能与miR-200c调控Akt的磷酸化有关。
- 孟凡鲁吴莺袁英雪贺明洁武健周红王文兵
- 关键词：结肠癌SW620细胞5-氟尿嘧啶化学敏感性
- miR-200c通过wnt/β-catenin信号途径抑制SW480结肠癌细胞的侵袭和转移被引量：5
- 2014年
- 目的研究miR-200c通过wnt/β-catenin信号通路对结肠癌SW480细胞侵袭、迁移的影响。方法将SW480细胞分为类似物转染(A)组、抑制物转染(B)组、类似物阴性对照(C)组、抑制物阴性对照组(D)和空白(E)组。荧光定量PCR检测12h和24h转染效率,划痕实验和Transwell侵袭实验检测细胞迁移和侵袭,Western blot检测转染后β-catenin和E-cadherin的表达。结果细胞划痕实验显示,A组12h和24h后伤痕宽度分别为(589.61±17.28)μm和(523.83±57.13)μm,C组分别为(465.33±16.60)μm和(393.99±7.53)μm,A组高于C组(P<0.05)。B组12h和24h后分别为(430.93±20.76)μm和(221.38±44.37)μm,D组分别为(485.64±16.65)μm和(441.22±22.40)μm,B组低于D组(P<0.05)。Transwell实验显示,与C组和D组相比,A组24h和48h通过8μm孔径的细胞数明显减少,B组明显增多(P<0.05)。A组β-catenin和E-cadherin的表达均升高,B组各蛋白表达下降(P<0.05)。结论 miR-200c可能通过wnt/β-catenin信号通路抑制SW480结肠癌细胞的侵袭和迁移。
- 武健吴莺孟凡鲁贺明洁袁英雪周红王文兵
- 关键词：MIR-200CWNTΒ-CATENIN信号通路结肠癌SW480细胞
- 幽门螺杆菌对人胃上皮细胞β-catenin蛋白信号途径影响意义的研究被引量：6
- 2014年
- 目的:探讨幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)裂解液对人胃上皮GES-1细胞β-catenin蛋白信号途径及其下游靶基因Cyclin D1和c-myc表达,以及对细胞增殖的影响。方法:用H.pylori超声裂解液处理GES-1,免疫荧光法和蛋白质印迹法检测β-catenin蛋白亚细胞定位以及核内蛋白表达量的变化;荧光定量聚合酶链反应(quantitative polymerase chain reaction,QRT-PCR)检测Wnt/β-catenin蛋白信号下游靶基因Cyclin D1和c-myc基因mRNA表达水平的变化;MTT法检测细胞的增殖。结果:H.pylori裂解液处理人胃上皮GES-1细胞后,H.pylori处理组引起了β-catenin蛋白从细胞膜至细胞质以及细胞核内的移位,呈时间依赖性。蛋白质印迹法检测结果证实,与对照组相比,H.pylori处理组在12、24h分别引起了细胞核内β-catenin蛋白表达量的增加,分别为0.31±0.05和0.55±0.04,P值均<0.01。QRT-PCR检测发现,与对照组相比,H.pylori处理组12hc-myc基因表达量没有变化,F=0.338,P>0.05;而24h的表达量明显增高,F=39.290,P<0.01;H.pylori处理组12hCyclin D1基因表达量明显增高,F=72.567,P<0.01;而24h的表达量虽然增高,但是差异无统计学意义,F=2.368,P=0.175;且明显低于12h的表达量,F=37.468,P<0.01。MTT法检测显示,5μL的H.pylori裂解液处理细胞12、24和36h的增殖抑制率分别为-13.3%、-28.5%和-62.5%;10μL的分别为-24.1%、-58.0%和-87.9%;20μL的分别为-39.8%、-131.3%和-165.2%。结论:H.pylori裂解液异常激活了β-catenin蛋白信号途径,促进β-catenin蛋白向细胞核内移位,通过上调其下游靶基因cyclin D1和c-myc的mRNA表达,促进细胞增殖,其效应呈时间以及浓度依赖。
- 吴莺艾宽宽沈琰李翔贺明洁穆原周红
- 关键词：幽门螺杆菌CYCLINC-MYC基因
- 镇江地区胃肠病患者幽门螺杆菌vacA基因i、d区分型特点及临床关联被引量：1
- 2013年
- 目的:研究镇江地区胃肠病患者感染的幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)的主要毒力因子vacA基因i、d型的分布特点、cagA基因状态,以及与临床结果的相关性。方法:选取快速尿素酶试验和(或)组织学染色H.pylori阳性患者的胃窦活检黏膜,PCR法检测H.pylori cagA基因状态、vacA基因的s、m、i、d区分型。结果:179例H.pylori患者,2例为混合感染(1.1%,2/179),剔除后,i1、i2亚型分别为96.6%(171/177)、1.1%(2/177);d1、d2亚型分别为98.9%(175/177)、1.1%(2/177);cagA阳性率为97.7%(173/177);s1/m2/i1/d1型为优势基因型(56.5%,100/177),s1/m1/i1/d1型次之(38.4%,68/177)。s2/m2型与i2、d2型相关(P<0.05),s1、i1、s1/i1型及cagA阳性均与d1型相关(P均<0.05)。比较vacA基因的s、m、i、d分型及cagA基因状态在慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌中的分布,差异无统计学意义(P均>0.05)。结论:镇江胃肠病患者感染的H.pylori菌株,96.6%表现为i1亚型、98.9%为d1亚型,vacA s1/m2/i1/d1/cagA(+)为优势基因型;幽门螺杆菌基因型之间存在关联;vacA基因型、cagA基因状态与胃肠疾病的分布无相关性。
- 蒋双红吴莺贺明洁余小燕王静蒋晓猛周红
- 关键词：幽门螺杆菌CAGA基因
- 东西方型幽门螺杆菌对Wnt/β-连环蛋白信号通路的影响被引量：2
- 2014年
- 目的探讨Wnt/β-连环蛋白(β-Catenin)信号通路在幽门螺杆菌(Hp)相关性胃癌发病机制中的可能作用。方法分别用东亚型和西方型Hp与人胃上皮细胞株(GES-1)共培养,Western blot检测细胞核内β-Catenin蛋白表达,荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测Wnt/β-Catenin信号通路下游c-myc和细胞周期蛋白D1mRNA表达,细胞一步法增殖检测试剂盒(MTS)检测细胞的增殖。结果东西方型Hp均引起了β-Catenin蛋白核内表达增加(P<0.01),但是东西方型菌株之间β-Catenin核内表达的增加没有统计学差异(P>0.05)。东西方型Hp处理细胞48h后,均引起了c-myc和细胞周期蛋白D1基因mRNA表达上调(P<0.05和P<0.01);但是东亚型组与西方型组间无统计学差异(P>0.05)。MTS检测显示,东西方型Hp处理细胞36h后,均引起了细胞增殖呈时间依赖的增加(P<0.01);并且在48h时,东亚型组促细胞增殖作用高于西方型组(P<0.05)。结论东亚型和西方型Hp均可激活Wnt/β-Catenin信号通路,促进胃癌的形成;但其作用在两种菌株之间无统计学差异。
- 贺明洁吴莺孟凡鲁武健艾宽宽周红
- 关键词：幽门螺杆菌胃上皮细胞Β连环蛋白
