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慢病毒导入的PLCγ1 siRNA对人大肠癌细胞增殖和黏附的影响被引量：1: 2006年; 目的:制备在人大肠癌细胞系LoVo中稳定抑制PLCγ1(phospholiase C-gamma 1)的重组病毒,建立PLCγ1表达降低的细胞系,以便客观研究该基因的作用。方法:制备产生PLγ1 siRNA分子的重组慢病毒,在慢病毒感染LoVo细胞后以杀稻瘟菌素筛选稳定表达细胞系。应用Western-blot和RT-PCR对细胞中PLCγ1的蛋白和mRNA表达水平进行分析,XTT法和黏附能力测定分别检测其对细胞增殖和黏附的影响。结果:PLCγ1 siRNA显著下调了LoVo细胞中PLCγ1的表达,所构建的重组慢病毒导入的siRNA有较高的沉默效率,LoVo细胞的黏附能力显著降低,细胞增殖无明显改变。结论:研究证实了 PLCγ1基因可显著地影响大肠癌LoVo细胞的黏附能力,为利用PLCγ1介导的信号通路进行肿瘤基因治疗提供了实验依据。; 谭丽罗深秋林骏凌朝辉; 关键词：慢病毒小干扰RNA 增殖

稳定表达PLCγ1 siRNA慢病毒的构建及对人大肠癌细胞凋亡的影响被引量：1: 2007年; 目的制备在人大肠癌系LoVo中稳定抑制磷脂酶C(PLC)γ1的重组慢病毒,建立PLCγ1表达降低的细胞系,以便客观研究该基因的作用。方法制备产生PLCγ1siRNA分子的重组慢病毒,在慢病毒感染LoVo细胞后以杀稻瘟菌素筛选稳定表达细胞系。应用Western-blot和RT-PCR对细胞中PLCγ1的蛋白和mRNA表达水平进行分析。应用流式细胞仪分析PLCγ1siRNA对细胞凋亡的影响。结果和结论PLCγ1siRNA显著下调了LoVo细胞中PLCγ1的表达,所构建的重组慢病毒导入的siRNA有较高的沉默效率,显著增加了5-FU诱导的凋亡。; 谭丽罗深秋林骏; 关键词：慢病毒 LOVO细胞小干扰RNA 凋亡

细胞增殖分化若干关键信号通路调控机制及其意义的研究: 白晓春罗深秋陆地苏永春李秀梅谭丽; 细胞增殖与分化信号转导机制的研究不仅有利于课题组认识机体的正常生理过程，而且对于揭示人类重大疾病的分子机制及开发相关靶向药物有重要意义。该项研究在该领域取得以下创新结果：1.首次证明mTOR内源性抑制蛋白质：FKBP38...; 关键词：; 关键词：大肠癌化疗药物

阻断PLC-γ1通路对TNF-α抑制胶质瘤细胞增殖并诱导其凋亡的影响被引量：3: 2006年; 目的探讨磷脂酶C-γ1(PLC-γ1)在肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导胶质瘤细胞凋亡中的作用。方法应用PLC-γ1的特异性抑制剂U73122抑制SWO胶质瘤细胞PLC-γ1活性,用MTT法观察在阻断PLC-γ1通路前后,TNF-α对SWO胶质瘤细胞的增殖抑制作用;流式细胞仪检测TNF-α诱导SWO胶质瘤细胞凋亡的情况;Western免疫印记法检测TNF-α是否激活caspase-3以及抑凋亡蛋白bcl-2表达的情况。结果抑制PLC-γ1活性后,SWO胶质瘤细胞对低浓度TNF-α的敏感性显著增加。结论阻断PLC-γ1通路本身虽不能直接启动凋亡,但却能增加SWO胶质瘤细胞对某些调亡因素(如TNF-α)的敏感性,其分子机制之一可能是下调抑凋亡基因bcl-2的表达。; 林骏杨进城谭丽罗深秋; 关键词：肿瘤坏死因子

腺病毒介导AMP激活的蛋白激酶的过表达诱导肝星状细胞株LX2凋亡被引量：3: 2007年; 目的探讨在肝星状细胞株LX2中,用腺病毒介导AMP激活的蛋白激酶(AMPK)过表达对细胞凋亡的影响。方法病毒感染细胞后,用免疫印记的方法检测外源基因的表达;流式细胞仪分析细胞的凋亡;琼脂糖凝胶电泳检测DNA梯状条带,免疫印迹检测caspase-3以及Bcl-2、Bax表达的变化。结果免疫印迹结果显示表达组成性激活的AMPK的腺病毒感染LX2细胞72h,AMPK过表达。过表达AMPK的LX2细胞用流式细胞仪检测到有凋亡的亚二倍体峰出现;DNA断裂出现梯状条带,casepase-3被激活,Bcl-2在LX2中是低表达的,而Bax表达水平升高。结论腺病毒介导AMPK的过表达可以诱导LX2细胞发生凋亡,其可能的机制之一是上调促凋亡基因bax的表达。; 张婧谭丽林骏徐爱民罗深秋; 关键词：肝纤维化肝星状细胞腺病毒凋亡

慢病毒导入的PLC-gamma1 SiRNA对人大肠癌细胞生物学行为的影响: 大肠癌是世界上比较常见的癌症之一，其发病率在全球恶性肿瘤中排第四位，每年约有四十万男性和三十八万女性患此病，每年死于本病的患者约三十九万人，相对生存率不到百分之四十。在发展中国家其发病率也逐年上升，在我国大肠癌在胃肠道肿...; 谭丽; 关键词：大肠癌磷脂酶细胞生物学; 文献传递

慢病毒导入的PLC-γ1 siRNA对人大肠癌细胞运动的影响: 2007年; 目的:通过RNA干扰技术客观地研究PLC-γ1与大肠癌细胞多种生物学行为的关系。制备在人大肠癌系Lo-Vo中稳定抑制PLC-γ1的重组病毒,以建立PLC-γ1表达降低的细胞系,以便客观研究该基因的作用。方法:制备产生PLC-γ1si RNA分子的重组慢病毒,在慢病毒感染LoVo细胞后以杀稻瘟菌素筛选稳定表达细胞。应用Western-blot和RT-PCR对细胞中PLC-γ1的蛋白和mR-NA表达水平进行分析。黏附能力实验和迁移能力实验分别检测细胞运动状态的影响。结果:成功构建了含PLC-γ1shRNA基因的重组慢病毒,PLC-γ1si RNA可显著下调LoVo细胞中PLC-γ1的表达。重组慢病毒导入的si RNA有较高的沉默效率,显著降低了细胞的黏附能力和迁移能力。结论:PLC-γ1可能与大肠癌的转移性能密切相关。; 谭丽邹志鹏林骏罗深秋; 关键词：细胞粘附

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谭丽