谢建平
- 作品数：9 被引量：30H指数：4
- 供职机构：汕头大学医学院分子生物学实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 宫颈癌细胞中辅酶Ⅱ依赖性视黄醇脱氢/还原酶及其选择性剪接亚型真核表达载体的构建和表达被引量：2
- 2008年
- 目的:构建宫颈癌细胞中辅酶Ⅱ依赖性视黄醇脱氢/还原酶(NRDR)及选择性剪接亚型NRDRB1真核表达载体,并转染HeLa细胞表达融合蛋白和native蛋白。方法:分别以pDONR-NRDR、pDONR-NRDRB1载体为模板,用PCR方法扩增两端带有酶切位点的NRDR及NRDRB1编码区序列,酶切后连接到pCDNA3、pCMV-Myc真核表达载体上,经酶切、测序鉴定后,转染HeLa细胞16 h,Western blot检测蛋白表达情况,蛋白质谱分析鉴定表达蛋白。结果:成功构建NRDR、NRDRB1真核表达载体,转染HeLa细胞后,可表达带有Myc标签的蛋白和不带标签的native蛋白;质谱分析结果进一步证实所表达的蛋白为NRDR和NRDRB1。结论:获得了在真核细胞中表达的NRDR、NRDRB1蛋白,为进一步研究其功能提供了实验材料。
- 宋旭红李蕊刘戈飞梁斌谢建平黄东阳
- 关键词：选择性剪接宫颈癌真核表达
- 成人医学教育网络课程实施浅析被引量：4
- 2009年
- 针对成人医学教育的特点，提出并分析了在其培养过程中实施网络课程教学的优点、存在问题及解决途径。
- 蔡绍先陈玮莹张大鹏罗旋辉秦达念谢建平
- 关键词：成人医学教育网络课程
- 全反式维甲酸对高血压大鼠心脏氧化应激水平的影响被引量：4
- 2007年
- 目的:探讨全反式维甲酸(atRA)对高血压心脏还原型辅酶I氧化酶P22亚单位(p22phox)表达以及氧化应激水平的影响。方法:采用12周龄雄性自发性高血压大鼠(SHR)及其同源对照WKY大鼠,经腹腔注射at-RA,为期1月。分别采用免疫印迹、硫代巴比妥酸比色以及透射电镜技术测定atRA治疗后SHR心脏p22phox的表达、丙二醛(MDA)含量以及心肌超微结构情况。结果:与WKY对照组相比,SHR心脏组织中p22phox蛋白表达与MDA含量明显升高(P均<0.01)。而atRA治疗后SHR(低、高剂量atRA组)大鼠心脏组织中p22phox蛋白表达与MDA水平出现下调(P均<0.05),同时伴有心肌损伤减轻。结论:长期atRA治疗可降低SHR大鼠心脏组织中p22phox表达与MDA水平,提示atRA在高血压病中具有一定的抗氧化效应。
- 钟久昌黄东阳金海燕余细勇李晓红谢建平林秋雄符永恒
- 关键词：氧化性应激维甲酸高血压
- 宫颈鳞癌组织中NRDR选择性剪接新亚型的鉴定及意义被引量：10
- 2006年
- 目的:探讨NRDR选择性剪接新亚型NRDRB1 mRNA和蛋白在宫颈鳞癌组织中的表达及其临床意义。方法:采用RT-PCR、免疫荧光、免疫沉淀、免疫印迹、MALDI-TOF质谱分析等技术,检测正常宫颈上皮及宫颈鳞癌组织中NRDRB1mRNA及蛋白表达。结果:NRDRB1亚型全长1 171 bp,其蛋白保留了SDR家族的N末端辅酶结合模序、C末端底物结合模序以及过氧化物酶体定位信号。因第3外显子的缺失,导致SDR家族典型的“LVSNAA”折叠的丢失,使NRDRB1蛋白空间构象发生改变,从而影响该蛋白的细胞内定位和功能,NRDRB1蛋白的亚细胞定位明显不同于NRDR,酶活性亦明显低于NRDR。NRDRB1 mRNA及蛋白在宫颈鳞癌组织中表达(15/27,55.6%),明显高于正常宫颈上皮组织(P<0.05),正常宫颈上皮除NRDR外,未检测到NRDRB1 mRNA及其蛋白。结论:NRDR选择性剪接的异常,以及新的剪接亚型NRDRB1细胞内定位及蛋白酶活性的改变可能与宫颈鳞癌的发生发展密切相关。
- 宋旭红梁斌刘戈飞李蕊谢建平黄东阳
- 关键词：HELA细胞
- 加强临床教学基地建设 提高临床教学质量被引量：3
- 2008年
- 随着医学教学改革的深入和新课程体系的实施，对临床教学基地提出了更高的要求。实践结果表明，完善临床教学基地管理规章制度，有利于临床教学基地的规范化管理；专家深入基层指导教学查房，举办教学方法学习班和开展教学研究，名师示范讲课，有利于强化教师的教学能力与临床能力；构建综合的评价体系，有利于临床教学质量的客观评价。切实做好各个方面的工作，对于提高医学教育质量，培养高素质医学人才具有积极的促进作用。
- 蔡绍先杨棉华陈玮莹邱秀华罗添荣谢建平
- 关键词：临床教学基地教学质量
- SYBR荧光实时定量PCR检测子宫颈鳞癌组织NRDR及其选择性剪接亚型mRNA表达被引量：1
- 2011年
- 目的检测子宫颈鳞癌组织中辅酶Ⅱ依赖性视黄醇脱氢/还原酶[NADP(H)-dependent retinol dehydrogenase/reductase,NRDR]及其选择性剪接亚型NRDRB1 mRNA的表达,建立SYBR实时定量聚合酶链反应(RQ-PCR)检测NRDR及其选择性剪接亚型mRNA的方法,为准确、快速分析NRDR、NRDRB1基因表达奠定基础。方法根据子宫颈鳞癌组织中NRDR、NRDRB1基因序列,设计并合成引物,将逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增的基因片段克隆至pGEM-T easy载体,重组质粒经蓝白筛选、酶切、测序鉴定后,作为阳性克隆标准品,用于标准曲线的制备,由此可定量检测出每一样品模板中NRDR、NRDRB1起始拷贝数。结果阳性克隆标准品制作的标准曲线可显示循环阈值与模板浓度具有良好的线性关系(NRDR:r=0.994,NRDRB1:r=0.997),可用于NRDR及其选择性剪接亚型基因表达的起始拷贝数定量测定。结论 RQ-PCR方法较常规PCR技术更为准确、特异、灵敏,对定量检测及研究NRDR及其选择性剪接亚型表达有积极意义。
- 梁斌刘戈飞谢建平李蕊宋旭红
- 关键词：宫颈肿瘤实时定量聚合酶链反应选择性剪接基因表达
- 神经母细胞瘤辅酶Ⅱ依赖性视黄醇脱氢/还原酶的功能性表达与生物信息学分析被引量：7
- 2006年
- 目的探讨辅酶Ⅱ依赖性视黄醇脱氢/还原酶(NADP-dependent retinol dehydrogenase/reductase,NRDR)与神经母细胞瘤发生的关系。方法采用RACE方法从神经母细胞瘤细胞SK-N-SH和SY-5-Y中克隆NRDR全长cDNA,对获得的序列进行生物信息学分析,Northern杂交确定NRDR组织分布,免疫荧光染色鉴定NRDR细胞内定位,杆状病毒蛋白表达系统表达克隆的NRDR,反相高压液相色谱测定NRDR催化活性。结果从神经母细胞瘤细胞中克隆了一种新的NRDR全长cDNA片段(NCB I登录号为DQ344810),序列分析表明NRDR属短链醇脱氢酶家族。结论NRDR定位于细胞过氧化物酶体,具有辅酶Ⅱ依赖性视黄醇脱氢/还原酶活性。神经母细胞瘤细胞中NRDR表达调控的改变,可能与神经母细胞瘤的发生有关。
- 刘戈飞李一凡宋旭红杜昆李蕊谢建平黄东阳
- 关键词：神经母细胞瘤生物信息学
- 宫颈癌细胞中NRDR选择性剪接新亚型表达质粒的构建及原核表达被引量：1
- 2008年
- 背景与目的：构建宫颈癌细胞中视黄醇脱氢／还原酶．辅酶Ⅱ依赖性视黄醇脱氢／还原酶（NRDR）及其选择性剪接亚型NRDRB1原核表达载体，并在BL21-AI大肠杆菌中表达融合蛋白。材料与方法：用RT-PCR检测宫颈癌组织中NRDR、NRDRB1表达，RACE方法克隆NRDRB1全长eDNA，运用Gateway表达系统将NRDR、NRDRB1编码区序列构建到表达载体，转化到大肠杆菌中表达，表达的融合蛋白通过金属离子亲和层析纯化。结果：在宫颈鳞癌组织中发现NRDR新的选择性剪接亚型NRDRBl，构建了NRDR、NRDRBl原核表达载体，在BL21-AI中表达出氨基端含6×His标签的重组蛋白，诱导表达4h后目的蛋白可占总蛋白量的30％．50％，经一步亲和层析得到了高纯度的NRDR及NRDRB1重组蛋白。结论：在大肠杆菌中获得高效表达的NRDR、NRDRB1蛋白，为进一步研究其功能提供了实验材料。
- 宋旭红刘戈飞梁斌李蕊谢建平黄东阳
- 关键词：选择性剪接宫颈癌
- 全反式维甲酸对高血压大鼠体内apelin-APJ信号系统的影响被引量：6
- 2007年
- 目的:探讨全反式维甲酸(atRA)对高血压大鼠体内心血管活性多肽apelin及其受体APJ信号的影响。方法:采用12周龄雄性自发性高血压大鼠(SHR)及其同源对照WKY大鼠,经腹腔注射atRA,为期1月。分别用实时荧光定量多聚酶链式反应(PCR)与免疫印迹技术测定atRA治疗后SHR体内apelin和APJ受体的表达情况。结果:与WKY对照组相比,SHR心脏组织中apelin及其受体APJ的 mRNA和蛋白表达明显下调(P均<0.01)。而atRA治疗后SHR(低、高剂量atRA组)大鼠心脏组织中apelin、APJ表达出现上调(P均<0.05)。结论:长期atRA治疗促进SHR大鼠心脏组织中apelin及其受体APJ的表达增加,提示转录调节剂atRA很可能对人类高血压病防治具有积极作用。
- 钟久昌黄东阳于汇民谢建平余细勇黄晓忠林秋雄
- 关键词：APELIN维甲酸高血压
