谈荣慧
- 作品数：6 被引量：12H指数：2
- 供职机构：上海中医药大学中药研究所更多>>
- 发文基金：上海市教育委员会预算内科研项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 丹参4-香豆酸：辅酶A连接酶与羟基苯丙酮酸还原酶基因功能的研究
- 丹参(Salviae miltiorrhiza Bunge)是唇形科鼠尾草属植物，其干燥根是中医临床常用中药，主要用于治疗冠心病、脑血栓、肝炎及肝硬化等。植物体内酚酸类化合物由苯丙烷类化合物代谢途径产生，4-香豆酸:辅酶...
- 谈荣慧
- 关键词：丹参迷迭香酸基因功能
- 丹参毛状根的诱导及培养条件的优化被引量：7
- 2014年
- 为了建立丹参毛状根的诱导方法及液体培养体系,以发根农杆菌A4,LBA9402,15834为试验菌株分别侵染丹参无菌苗叶片,诱导丹参毛状根,PCR扩增筛选阳性株系,HPLC测定丹酚酸含量并在此基础上进一步优化毛状根的液体培养条件。结果显示:3种发根农杆菌A4,LBA9402,15834均诱导出丹参毛状根,经PCR鉴定证明其Ri质粒T-DNA均已整合到丹参基因组中,其中发根农杆菌LBA9402和A4诱导的丹参毛状根丹酚酸含量较高,质量分数分别为(3.27±0.37)%,(3.17±0.20)%;由发根农杆菌LBA9402诱导MSOH液体培养基培养的丹参毛状根丹酚酸含量较高,质量分数为(4.56±0.36)%;由发根农杆菌LBA9402诱导,pH为4.81的MSOH液体培养基培养的丹参毛状根丹酚酸含量最高可达4.85%。因此,以发根农杆菌LBA9402和A4诱导的丹参毛状根在pH为4.81的MSOH液体培养基中培养的丹酚酸含量较高。为进一步利用基因工程技术改良中药丹参的品质奠定了基础。
- 谈荣慧张金家赵淑娟
- 关键词：发根农杆菌丹酚酸HPLC
- 丹参4-羟基苯丙酮酸还原酶基因RNAi表达载体的构建
- 为研究丹参4-羟基苯丙酮酸还原酶基因(SmHPPR)在丹酚酸类化合物生物合成中的作用,构建SmHPPR的RNAi植物表达载体.根据SmHPPR的序列,设计四对含有酶切位点的特异性引物,以丹参无菌苗叶片cDNA为模板,分别...
- 谈荣慧张金家赵淑娟胡之璧
- 关键词：中药化学生物合成
- 文献传递
- 丹参SmERF081转录因子基因克隆与靶基因鉴定
- 2024年
- 目的:克隆丹参(Salvia miltiorrhiza Bge.)转录因子SmERF081,分析SmERF081的靶基因。方法:以丹参转录组数据Unigene(c48961-g1)序列为参考,利用PCR扩增获得SmERF081基因序列;通过生物信息学预测SmERF081编码蛋白的理化性质、蛋白质结构等分子特征;使用MEGA 7软件构建系统进化树;对SmERF081进行异源表达和蛋白纯化;通过酵母单杂、双荧光素酶报告系统和化学发光法凝胶迁移实验(EMSA)鉴定SmERF081与SmCPS5启动子是否结合。结果:克隆得到SmERF081基因,cDNA全长453 bp(Genbank登陆号:OQ466089),编码151个氨基酸,相对分子质量16.46 kDa,等电点9.75。该蛋白不含信号肽,无跨膜区,其高级结构主要由无规则卷曲构成。进化树分析表明SmERF081与拟南芥At1G28360.1、丹参SmERF8同源关系最近。原核表达结果显示,经IPTG诱导后SmERF081在大肠杆菌中成功异源表达,并通过纯化获得目的蛋白。酵母单杂、双荧光素酶报告基因检测和EMSA确认SmERF081可与丹参SmCPS5启动子结合。结论:鉴定到丹参中一个新转录因子SmERF081,生物信息学分析及分子互作初步证实其靶基因为丹参SmCPS5二萜环化酶。
- 肖亦菽陈敏谈荣慧郑小宇赵淑娟
- 关键词：丹参生物信息学靶基因
- 诱导子对丹参毛状根丹酚酸类化合物积累的影响被引量：5
- 2017年
- 目的:探讨不同诱导子干预培育对丹参毛状根中丹酚酸类化合物生物合成的影响。方法:在继代培养的丹参毛状根中分别添加酵母提取物(YE)、茉莉酸甲酯(MJ)、水杨酸(SA)和银离子(Ag+)不同诱导子及其组合,用高效液相色谱法(HPLC)测定各类丹参毛状根中丹酚酸含量。结果:在实验浓度条件下,4种诱导子对丹参毛状根的生长均无显著影响;MJ和SA能提高丹酚酸的含量,YE会降低丹酚酸含量,Ag+无显著影响,YE+MJ+Ag+对毛状根中丹酚酸类成分积累有明显的抑制作用。结论:在丹参毛状根中可以添加适当浓度的MJ和SA诱导子会提高丹酚酸类化合物含量,且不会影响毛状根生长。
- 张金家谈荣慧
- 关键词：丹参毛状根诱导子丹酚酸高效液相色谱法
- 丹参4-羟基苯丙酮酸还原酶基因RNAi表达载体的构建
- 2012年
- 为研究丹参4-羟基苯丙酮酸还原酶基因(SmHPPR)在丹酚酸类化合物生物合成中的作用,构建SmHPPR的RNAi植物表达载体。根据SmHPPR的序列,设计4对含有酶切位点的特异性引物,以丹参无菌苗叶片cDNA为模板,分别扩增两段目的基因的正反向片段(约402 bp和346 bp),经T-载体克隆并测序后,将正反义片段分别插入表达载体pART27的相应位置(正向目的片段插人中间载体pKANNIBAL内含子左侧,反向目的片段插入该载体内含子右侧),构建了含有发夹结构的RNAi植物表达载体pART27-HPPR1sa、pART27-HPPR2sa和阴性对照载体pART27-Intron。利用三亲杂交法,将这3个载体导入到发根农杆菌LBA9402中。酶切鉴定和PCR扩增结果表明RNAi表达载体构建成功并成功导入到发根农杆菌LBA9402中,为下一步研究SmHPPR基因的功能奠定基础。
- 谈荣慧张金家赵淑娟胡之璧
- 关键词：丹参RNA抑制
