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一种数字化高灵敏度荧光显微镜及其在竹红菌甲素研究中的应用被引量：5: 1996年; 研制了一种可探测细胞微弱荧光图像的数字化高灵敏度荧光显微镜，采用视频数字化增强型ＣＣＤ系统作为高灵敏度的接收系统，像增强器亮度增益为４１，０００，因而这种荧光显微镜可探测到普通荧光显微镜不能观察的微弱荧光图像，并可减少荧光物质的浓度和激发光的强度，减少对细胞自然生理环境的影响。数字化高灵敏度荧光显微镜在给出细胞微弱荧光图像的同时，并可给出图像上每一像元的发光强度和细胞平均发光强度。使用此仪器已首次直接得到了：１）光敏竹红菌甲素（ＨＡ）在ＨｅＬａ细胞（人体宫颈癌细胞）中的分布，证实ＨＡ主要分布在ＨｅＬａ的细胞膜中；２）ＨｅＬａ细胞在有ＨＡ存在时受强光照射后的光损伤现象；３）加入三种细胞抗氧化剂维生素Ｅ、丁羧基甲苯（ＳＦ）和阿魏酸钠（ＢＨＴ）后获得不同程度保护的细胞状态；４）一定浓度的ＨＡ在ＨｅＬａ细胞随时间的摄取曲线；５．不同ＨＡ浓度一定时间内在ＨｅＬａ细胞中被吸收量的曲线。; 陈天明王苏生俞信曹恩华许娜飞许娜飞; 关键词：荧光显微镜像增强器光敏损伤

HeLa细胞对竹红菌甲素摄取的直接观察与动态过程分析被引量：15: 1995年; 利用荧光光谱测定方法和高灵敏度荧光显微镜成像技术研究了竹红菌甲素（ＨｙｐｏｃｒｅｌｌｉｎＡ，ＨＡ）在ＨｅＬａ细胞中的分布，动态过程及其影响因素和光敏损伤效应。结果显示：ＨＡ主要分布于细胞膜及胞浆中，只有很少量的ＨＡ进入细胞核中。细胞对ＨＡ的吸收，随着培养液中ＨＡ浓度的增大和保温时间的延长而增加，当保温时间超过１６小时，或当ＨＡ浓度达８７μｇ／ｍｌ以上时，细胞对ＨＡ的吸收呈现饱和趋势。保温时间在２４小时以内，对ＨＡ排出较快，２４小时的排出量为５０％。实验还表明ＨＡ加上光照后对细胞具有明显的杀伤作用，使细胞存活率显著降低，提示ＨＡ光敏作用靶部位是细胞膜，而引发的脂自由基等产物可能是诱导ＤＮＡ等损伤，最终导致细胞死亡的重要因素。; 许娜飞李景福曹恩华王家珍陈天明俞信王苏生孙江政; 关键词：HELA细胞竹红菌甲素光敏损伤

高灵敏度荧光显微镜量化技术及其在光生物学研究中的应用被引量：5: 1995年; 介绍一种用像增器接收荧光图像的高灵敏度荧光显微镜，相对于普通荧光显微镜的灵敏度提高了４×１０４倍，并用宽量程微光光亮度计对仪器的微弱成像性能进行了实验标定，得到了图像采集数据和图像发光强度的线性数量关系。高灵敏度荧光显微镜在给出细胞荧光图像的同时，可以给出图像上每一像元的发光强度和细胞平均发光强度，仪器对图像细微变化的判断能力远大于人眼直接观察图像。高灵敏度荧光显微镜可应用于研究细胞中荧光物质在细胞生理过程中的分布变化和发光强度变化。使用此仪器已得到了光敏竹红菌甲素（ＨＡ）在Ｈｅｌａ细胞（人体子宫癌细胞）中的分布图像和更为直观的三维显示图形，以及加入ＨＡ后Ｈｅｌａ细胞受到强先照射后的细胞损伤图像。; 陈天明王苏生俞信孙江政曹恩华许娜飞李景福; 关键词：光生物学荧光显微镜

高灵敏度荧光显微镜及其在细胞光敏效应研究中的应用被引量：1: 1994年; 研制了一种可探测极微弱细胞荧光图象的高灵敏度荧光显微镜，在仪器中使用了一个高质量的亮度增益为５０，０００的象增强器对细胞的荧光图象进行光能量放大，因而这种荧光显微镜可探测到普通荧光显微镜不能观察的微弱荧光图象。由于仪器中光源的输出强度很小，避免了长时间观察对活细胞的光损伤，并可观察到荧光效率低的荧光物质的分布图象。探测系统中用计算机采集图象数据，同时对数据进行必要处理，以提高图象的质量。这种高灵敏度的荧光显微镜可用于分析细胞中荧光物质的分布，以及细胞动态生理过程的研究。使用此仪器已直接观察到光敏竹红菌甲素在Ｈｅｌａ细胞（人体宫颈癌细胞）中的分布，细胞受光照射后的光损伤现象及加入三种细胞保护剂后获得不同程度保护的细胞状态。; 陈天明王苏生俞信孙江政曹恩华许娜飞李景福; 关键词：荧光显微镜光敏性

天然抗氧化剂丹参酮Ⅱ—A对肝细胞脂质过氧化产物与DNA相互作用的影响被引量：63: 1996年; ［３Ｈ］花生四烯酸标记的肝细胞，经ＦｅＣｌ２－ＤＴＰＡ启动脂质过氧化后，细胞ＤＮＡ出现放射性，并随保温时间增加而逐渐增高，表明在细胞内脂质过氧化产物与ＤＮＡ发生相互作用，生成了一种ＤＮＡ加成物，经测定它具有特征荧光光谱，显示较低的增色效应和Ｔｍ值。用高度敏度荧光图象显微镜直接观察发现丹参酮Ⅱ－Ａ经细胞摄取后主要滞留在细胞膜与胞浆中。它能有效地抑制细胞脂质过氧化，减少脂质－ＤＮＡ加成物的产生，并阻止了细胞存活率和Ｏ６甲基鸟嘌呤转移酶活性的降低，其抑制率与ＶｉｔＥ，ＢＨＴ相近，但显著高于ＮａＮ３，甘露醇和ＳＯＤ。上述结果提示丹参酮Ⅱ－Ａ是一种新的有效的细胞内脂质过氧化产物与ＤＮＡ相互作用的抑制剂。它对ＤＮＡ的保护作用可能是通过清除脂类自由基而阻断脂质过氧化的链式反应，抑制ＤＮＡ加成物的生成，从而减少了细胞毒性。; 曹恩华刘晓麒李景福许娜飞秦静芬陈天明王苏生俞信; 关键词：肝细胞过氧化脂质丹参酮II-A

增强型荧光显微镜的量化处理及测试: 1995年; 根据目前生物学及医学发展的需要，研制了一种在普通倒置生物显微镜下探测极微弱细胞荧光图象的高增益荧光显微镜。系统采用计算机采集荧光图象，由量化标定曲线对荧光图象中的每点根据其灰度值给出定量数据，解决了以往荧光显微镜只能定性观察不能定量分析的困难。; 孙江政王苏生俞信陈天明曹恩华许娜飞李景福; 关键词：荧光显微镜 CCD摄象机

竹红菌甲素（HA）光敏致实作用的研究被引量：5: 1995年; 以中国苍鼠卵巢成纤维细胞（ＣＨＯ）为材料，通过ＨＡ光敏诱变，乌本甙（ｏｕａｂａｉｎ）筛选研究了竹红菌甲素光敏反应对细胞Ｎａ＋／Ｋ＋ＡＴＰ酶基因的诱变致灾作用。结果表明ＨＡ光敏反应可造成细胞Ｎａ＋／Ｋ＋ＡＴＰ酶基因点突变，并具有遗传稳定性。另外通过测定光敏反应细胞脂质过氧化程度及其产物与细胞ＤＮＡ形成的荧光产物表明脂质过氧化在细胞ＤＮＡ的损伤突变过程中，起着重要的作用。; 许娜飞曹恩华李景福; 关键词：光敏剂竹红菌甲素光敏反应致突变

抗氧化剂对HeLa细胞在竹红菌甲素（HA）光敏损伤下的保护作用的研究被引量：5: 1995年; 通过细胞台盼兰拒染检测、电镜观察以及３Ｈ—Ｔｄｒ同位素掺入等方法，分别从细胞水平及分子水平上，定性定量测定了维生素Ｅ（ＶｉｔＥ）、丁羟基甲苯（ＢＨＴ）、阿魏酸钠（ＳＦ）三种抗氧化剂对于竹红菌甲素（ＨＡ）光敏所致ＨｅＬａ细胞损伤的抑制作用。结果表明：三种抗氧化剂对于细胞的损伤均有不同程度的抑制作用，其中ＶｉｔＥ的抑制作用最明显，ＢＨＴ及ＳＦ的抑制作用则较弱，提示脂质过氧化在细胞膜和细胞核损伤中起着重要的作用。; 许娜飞曹恩华李景福党连凯; 关键词：光敏损伤 HELA细胞抗氧化剂

膜脂过氧化产物在光敏诱发细胞突变中的作用被引量：7: 1998年; 本文选用ＣＨＯ细胞，通过竹红菌甲素（ＨＡ）光敏诱变及ｏｕａ选择性培养液的筛选，证实甲素光敏反应对细胞Ｎａ＋／Ｋ＋ＡＴＰ酶基因具有诱变致突作用。对其突变效应与脂质过氧化反应及ＤＮＡ加成物形成关系的分析表明，ＴＢＡ反应产物随着光照时间的增加而增加，同时ＤＮＡ加成物生成迅速增加，突变频率也随之增高。维生素Ｅ可抑制脂质过氧化反应，并减少ＤＮＡ加成物生成，阻止细胞突变率的增加。提示光敏诱发细胞脂质过氧化所产生的活性产物可能是造成细胞基因突变的重要原因之一。; 曹恩华许娜飞张健李景福王菊君; 关键词：竹红菌甲素光敏反应脂质过氧化基因突变

生物超微弱发光的两维探测被引量：4: 1996年; 本文介绍了自行研制的二套系统及其应用。1．高灵敏荧光显微镜系统，该系统探测灵敏度达到10－6lx量级，比普通CCD系统提高了104倍，系统用宽量程照度计对微弱光成象性能进行了标定，在给出细胞荧光图象的同时，可以给出每一象元的发光强度，并可给出视觉更易分辨的光强的三维显示和伪彩色图象。在该系统上得到了分红菌甲素在Hela细胞中的分布图象，Hela细胞加入竹红菌甲素后的光照损伤及抗氧化剂维生素E等对细胞的保护图象。2．光子计数成象系统，该系统灵敏度达10-8lx量级，可探测到单个光子及其分布，在其上得到了绿豆芽，树叶，昆明鼠，人手及手指的超微弱发光的光子图象，并用统计理论进行了信号检验。; 王苏生陈天明俞信曹恩华许娜飞李景福; 关键词：生物光学生物超微弱发光

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许娜飞

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