许啸
- 作品数：5 被引量：28H指数：4
- 供职机构：第四军医大学唐都医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- mirRNA-17-5p抑制物对骨肉瘤细胞系SOSP_9607增殖和凋亡的影响被引量：2
- 2010年
- 目的:探讨miR-17-5p抑制物对于骨肉瘤细胞系SOSP_9607细胞增殖和凋亡的影响。方法:四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞增殖,进一步计算抑制率,流式细胞仪测定细胞凋亡。将SOSP_9607细胞分为对照组和实验组,对照组分为阴性对照和正常细胞对照组。实验组采用miR-17-5p抑制物(hsa-miR-17-5pinhibitors)抑制SOSP_9607细胞内miR-17-5p的活性。结果:与对照组相比,实验组显著抑制SOSP_9607细胞的增殖,有明显的剂量依赖性(P<0.01)。随着浓度从50nmol/L逐渐增加至200nmol/L,抑制率逐渐增高(P<0.01)。实验组凋亡率(9.6±1.8)%与阴性对照组凋亡率(3.5±0.4)%相比明显增高(P<0.01)。结论:miR-17-5p抑制物通过抑制SOSP_9607细胞中miR-17-5p的活性对SOSP_9607细胞的增殖和凋亡发挥重要作用。
- 赵广义赵健高杰许啸闫康吴家昌杨彤涛马保安
- 关键词：骨肉瘤细胞增殖细胞凋亡
- 人骨髓间充质干细胞体外向软骨细胞分化的实验研究被引量：11
- 2010年
- 目的创伤等因素造成的关节软骨的损伤和退变是骨科常见和难以解决的问题之一。干细胞尤其是骨髓来源干细胞的研究促进了组织工程在骨关节领域的发展。文中研究体外单层培养条件下,成人骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMSC)经诱导定向分化软骨细胞可行性。方法用全血贴壁法分离培养BMSC,并传代扩增后,用单层培养法在软骨诱导剂下进行诱导培养21 d,以常规培养液培养的BMSC作为阴性对照。光镜下观察诱导细胞形态学的改变,苏木素-伊红(HE)染色、甲苯胺蓝染色、Ⅱ型胶原蛋白免疫组化等方法检测诱导细胞的分泌功能。结果BMSC经21 d的单层诱导培养后,细胞形态由长梭形向多角形类圆形转变,细胞爬片甲苯胺蓝染色呈明显异染,Ⅱ型胶原蛋白免疫细胞化学检测阳性,对照组阴性。结论成人BMSC在单层培养条件下可成功诱导分化为软骨细胞。
- 吴家昌杨彤涛许啸文艳华韩建伟范清宇马保安
- 关键词：人骨髓间充质干细胞体外诱导分化软骨细胞
- 肝细胞生长因子受体c-met在骨肉瘤中的表达及其临床意义被引量：6
- 2010年
- 目的:探讨骨肉瘤组织中肝细胞生长因子受体c-met蛋白的表达情况,分析其临床意义及与预后的关系。方法:应用免疫组织化学方法检测行手术的35例骨肉瘤及13例骨样骨瘤患者标本肝细胞生长因子受体c-met的表达,并分析其与临床因素和预后的关系。结果:骨肉瘤组织中肝细胞生长因子受体c-met的阳性表达率为80%(28/35),而在骨样骨瘤中的表达率为7.7%(1/12),两者比较显著差异(P<0.01);结合临床资料分析,其表达与患者性别、年龄、发病次数、肿瘤体积、病理分型无关(P>0.05),而与临床分期、有无转移有关(P<0.05)。结论:C-met可能在骨肉瘤细胞侵袭、转移的过程中起重要作用;肝细胞生长因子受体c-met可以作为骨肉瘤诊断和预测转移的指标。
- 刘云燕纪振钢杨连甲文艳华裘秀春张殿忠马琼许啸范清宇
- 关键词：骨肉瘤
- 人miR-34a真核表达载体的构建及其表达被引量：5
- 2009年
- 目的:构建人miR-34a的真核表达载体,并使其在骨肉瘤SOSP-9607细胞中表达。方法:从人骨肉瘤SOSP-9607细胞基因组DNA中用PCR法扩增出miR-34a的前体序列,并引入酶切位点和保护碱基,双酶切后定向插入真核表达载体pcD-NA3.1(+)中,构建miR-34a真核表达载体pcD-NA-miR34a,然后进行菌落PCR、酶切和测序鉴定。同时用构建好的载体pcDNA-miR34a转染骨肉瘤细胞SOSP-9607细胞,筛选miR-34a稳定表达细胞系,用Northern blot及realtimeRT-RCR法鉴定pcD-NA-miR34a可于真核细胞中过表达miR-34a的生物学特性。结果:成功构建了人miR-34a真核表达载体pcDNA-miR34a。pcDNA-miR34a可于骨肉瘤SOSP-9607细胞中上调miR-34a的表达,获得了miR-34a高表达骨肉瘤细胞系。结论:miR-34a的真核表达载体可在骨肉瘤细胞SOSP-9607细胞中有效表达,为进一步研究miR-34a在骨肉瘤中的功能及基因调控机制奠定了实验基础。
- 闫康赵健高杰许啸杨彤涛裘秀春范清宇马保安
- 关键词：微RNASMIR-34A基因表达骨肉瘤
- 人骨髓间充质干细胞不同亚群增殖分化的研究被引量：4
- 2009年
- 为比较不同亚群的人骨髓间充质干细胞(human bone mesenchymal stem cell,hBMSC)自我更新和分化能力,通过获赠的人髂骨骨髓标本,联合运用密度梯度离心和差异贴壁法分离MSCs,用10μm滤膜将不同群体细胞分离,倒置相差显微镜观察不同亚群细胞的形态;流式细胞仪检测BMSC不同亚群细胞的表型;在地塞米松、Vit C、β-磷酸甘油钠作用下将不同亚型细胞向成骨细胞诱导分化,分别观察其分化能力。结果成熟的MSC,即mMSCs细胞(mature cells)呈纤维样梭形,RS细胞(rapidly MSC self-renewing cells)呈圆形。RS细胞增殖能力明显强于mMSCs。经定向诱导分化后,RS细胞向成骨细胞分化能力较mMSCs细胞强。说明RS细胞较之mMSC细胞可能是一种更原始的中胚层前体细胞,具有更强的自我更新和分化潜能。
- 许啸高杰吴家昌马琼刘云燕文艳华闫康杨彤涛马保安
- 关键词：间充质干细胞细胞分化
