蒲仕明 作品数:21 被引量:41 H指数:4 供职机构: 广西师范大学生命科学学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广西壮族自治区自然科学基金 广西教育厅科研项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 文化科学 更多>>
G-MDSC在肿瘤发生中细胞丰度、周期及DNA合成的变化 被引量:1 2015年 目的:通过对C57BL/6J小鼠皮下接种Lewis lung carcinoma line细胞,探究荷瘤条件下粒细胞样髓源性抑制细胞(G-MDSC)的增殖变化。方法:用流式细胞术对骨髓细胞参数进行测定。结果:G-MDSC在荷瘤鼠骨髓中占总细胞数的百分比为(51.007±0.016)%,显著高于正常鼠骨髓中的百分比(12.696±0.004)%(P<0.01)。G-MDSC在荷瘤鼠中G0/G1期为(52.43±0.72)%,在正常鼠中为(56.73±1.50)%,差异无统计学意义(P=0.061);在荷瘤鼠中S期为(34.62±0.28)%,在正常鼠中为(31.82±0.88)%,差异有统计学意义(P<0.05);在荷瘤鼠中G2/M期为(14.92±0.71)%,在正常鼠中为(12.11±0.38)%,差异亦有统计学意义(P<0.05)。G-MDSC在荷瘤鼠中EdU阳性率为(57.35±0.35)%,显著高于正常鼠EdU阳性率(52.43±0.96)%(P<0.01)。结论:G-MDSC在荷瘤鼠中的增殖显著高于正常鼠。 覃宝雄 詹金熹 李云 伍学恒 蒲仕明 周祖平关键词:细胞周期 EDU 炎症与肿瘤发生对造血祖细胞发育失衡的影响 被引量:4 2019年 主要研究炎症和肿瘤对小鼠造血免疫系统中造血祖细胞(Hematopoietic progenitor cells,HPCs)影响,探索炎症和肿瘤状态下造血-免疫系统间的相关性。利用偶氮甲烷(Azoxymethane,AOM)和右旋糖酐硫酸钠(Dextran sulfate sodium salt,DSS)共同诱导构建小鼠炎症性结肠癌模型,并采用流式细胞术分析正常、炎症和肿瘤小鼠造血祖细胞丰度以及细胞周期。炎症和肿瘤进程中,小鼠骨髓中较上游的多能祖细胞(Multi-potent progenitors,MPPs)占骨髓细胞的百分比显著升高,共髓系同祖细胞(Common myeloid progenitors,CMPs)、巨核细胞/红系祖细胞(Megakaryocyte/erythrocyte progenitors,MEPs)和粒细胞/巨噬细胞祖细胞(Granulocyte/macrophage progenitors,GMPs)也有类似变化,相反共同淋巴祖细胞(Common lymphoid progenitors,CLPs)则显著下降;并且,炎症和肿瘤状态下,髓系祖细胞分裂能力显著强于正常生理状态;肿瘤状态下,小鼠外周血 CD4^+/CD8^+T 细胞比值显著下降。炎症和肿瘤进程中,HSPCs 偏向髓系分化;肿瘤状态下小鼠细胞免疫功能失衡且长期的炎症损害可能会引起免疫系统的失衡并最终导致肿瘤的形成。 李晓玉 刘霖 邢兵 汤婧 刘亚平 周祖平 周祖平关键词:炎症 肿瘤 免疫系统 免疫功能 燕子掌的组织培养与植株再生 被引量:4 2012年 以燕子掌叶片为外植体,在培养基中添加不同浓度的6-BA和IBA,研究燕子掌组培苗形成过程中6-BA和IBA浓度对各阶段的影响。结果表明:MS+IBA 5mg/L+6-BA 5mg/L为愈伤组织诱导的最佳培养基,分化不明显,且诱导率为95.56%;MS+IBA 2mg/L+6-BA1mg/L为外植体直接诱导不定芽的最佳培养基,平均可达12芽以上;MS+IBA 5mg/L+6-BA5mg/L为愈伤组织增殖最佳培养基,增殖倍数为10.9;愈伤组织分化的最佳培养基为MS+IBA1mg/L+6-BA 5mg/L,单位面积芽数为32个以上,且芽明显;壮苗的最佳培养基为MS+IBA2mg/L,45d后平均苗长为4.74cm;诱根的最佳培养基为MS+IBA 0.5mg/L,诱根率为100%。 蒲仕明 李荣峰 方利娟 兰翠玲 周祖平关键词:燕子掌 愈伤组织 增殖 不定芽 不同浓度激素对蕨菜愈伤组织诱导与增殖的影响 被引量:4 2012年 以蕨菜[Pteridium aquilinum(L.)kuhn]幼嫩根状茎为外植体,在愈伤组织诱导和增殖培养基中设置不同的6-BA和IBA浓度,研究6-BA和IBA对蕨菜愈伤组织诱导及增殖的影响。结果表明,1/2MS+0.2mg/L 6-BA+0.4 mg/L IBA为愈伤组织的最佳诱导培养基,诱导率为82%;1/2MS+0.2 mg/L IBA+0.2mg/L 6-BA为愈伤组织的最佳增殖培养基,增殖倍数为8.07。该研究结果为6-BA和IBA在蕨菜愈伤组织培养中的合理使用提供了参考。 方利娟 苏仕林 蒲仕明关键词:激素 愈伤组织 增殖 青年和老年小鼠棕色脂肪来源间充质干细胞生物学特性比较 被引量:1 2019年 旨在探讨青年和老年小鼠肩胛骨间棕色脂肪来源间充质干细胞(Brown adipose-derived mesenchymal stem cells,BADSCs)生物学特性的比较。用细胞流式检测第3代BADSCs表面抗原表达,MTT法检测细胞增殖情况,7-ADD-AnnexinV双染色观察细胞凋亡情况和β-半乳糖苷酶染色法检测细胞衰老情况,比较两组细胞的成骨和成脂分化差异。结果显示,第3代BADSCs表面抗原CD29、CD105和CD44的表达均为阳性、CD73为低表达。MTT法显示老年小鼠的BADSCs增殖能力与青年小鼠相比没有显著性差异(P>0.05)。7-ADD-AnnexinV双染色显示青年小鼠的BADSCs早凋比例4.63±0.87%,老年的BADSCs早凋比例9.88±0.81%,且有显著性差异(P<0.05)。β-半乳糖苷酶染色法显示青年组染成蓝色细胞数为2.33±0.3,老年组染成蓝色细胞数为6.66±1.2,有显著性差异(P<0.05)。青年组成骨分化OD值为1.26±0.046,老年组成骨分化OD值为0.88±0.047,有显著性差异(P<0.05)。青年组成脂分化OD值为0.9808±0.066,老年组成脂分化OD值为0.769±0.035,有显著性差异(P<0.05)。青年组的BADSCs更倾向于成骨分化,老年组的BADSCs更倾向于成脂分化。老年组小鼠凋亡和衰老细胞比例增加;成骨和成脂分化能力下降。 张达秀 贺双丽 王倩 蒲仕明 吴琼关键词:棕色脂肪 间充质干细胞 衰老 小鼠 肿瘤发生对小鼠胸腺发育及T细胞生成的影响 被引量:2 2020年 胸腺(thymus)是机体的中枢免疫器官,在机体免疫系统发挥重要的作用。为了探索肺癌发生对小鼠胸腺发育的影响,阐明肿瘤状态下小鼠免疫功能的变化,本研究利用小鼠Lewis肺癌(Lewis lung carcinoma,LLC)细胞构建小鼠肺癌模型,采用HE染色分析小鼠胸腺形态学变化,利用流式细胞术分析小鼠胸腺、外周血中T细胞亚群的丰度,以及外周血中髓源性抑制细胞(myeloid-derived suppressor cells,MDSCs)的含量,并在分选MDSCs之后检测其对T细胞增殖的影响。结果显示:肿瘤状态下,小鼠胸腺指数下降,胸腺发生明显的萎缩,胸腺皮/髓质比下降;胸腺中各T细胞亚群(包括CD4^+CD8^-细胞、CD4^+CD8^-细胞、CD4^-CD8^+细胞和CD4^+CD8^-细胞)的绝对细胞数量均下降显著,未成熟的CD4^+CD8^-细胞含量下降明显;虽然CD4^-CD8^+细胞和CD4^+CD8^-细胞的含量在胸腺中显著增加,但是在外周血中呈现了相反的趋势。此外,肿瘤状态下外周血中MDSCs的丰度显著增加,且肿瘤来源的MDSCs表现出较正常来源的MDSCs更强的免疫抑制作用。以上信息提示,肿瘤发生中小鼠胸腺萎缩、T细胞数量显著减少的原因可能是大量MDSCs积累,且具有更强免疫抑制作用的肿瘤来源的MDSCs抑制了T细胞的增殖与活化。 刘霖 汤婧 邢兵 李鑫 陈莹 周祖平 蒲仕明关键词:胸腺萎缩 T细胞发育 肿瘤发生 免疫抑制 Nr4a3对乳腺癌细胞增殖、凋亡及侵袭的影响 2024年 Nr4a3(nuclear receptor subfamily 4 group a member 3)属于核受体亚家族成员,参与细胞增殖、细胞迁移和细胞凋亡的调控。据报道,Nr4a3在多种肿瘤组织中表达下调。为探索Nr4a3在乳腺癌发生、发展中的作用,本文利用公共数据库分析NR4A3在乳腺癌组织中的表达以及与乳腺癌患者总生存率的关系。在4T1细胞系上敲除Nr4a3基因,通过流式细胞术等检测细胞凋亡、细胞周期;CCK-8与集落形成实验检测细胞活力;细胞划痕与侵袭检测细胞迁移与侵袭能力;通过q-PCR检测细胞周期和凋亡基因的表达水平。结果表明:Nr4a3在乳腺癌组织中表达水平显著下调;与乳腺癌患者的总生存率呈正相关关系;Nr4a3敲除后,细胞增殖增强,细胞凋亡减少及细胞迁移能力和侵袭能力增强。本研究揭示了Nr4a3在乳腺癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的潜在作用,可能成为乳腺癌潜在的治疗靶点。 郑婉华 莫斯萍 周祖平 蒲仕明关键词:乳腺癌 细胞凋亡 免疫治疗 具核梭杆菌在结直肠癌发展及诊疗中的作用 被引量:1 2023年 结直肠癌(colorectal cancer,CRC)发病率高且难以治愈。越来越多的证据表明肠道微生物群生态失调与CRC发生发展密切相关,具核梭杆菌(Fusobacterium nucleatum,Fn)已经被确定为肠道微生物群中的病原体,有助于结直肠发生癌变。本文综述了Fn诱导CRC发生发展的重要机制,包括毒力因子、慢性炎症、miRNA、免疫调节和肠道代谢物,并描述了Fn在诊断治疗中的临床价值,以期为新型肿瘤生物标志物的筛查与新兴免疫治疗靶点的开发提供参考。 黄婷 李培华 陈治秀 蒲仕明 周祖平关键词:结直肠癌 具核梭杆菌 致癌机制 基于CRISPR/Cas9系统构建Slfn2基因敲除的小鼠肺癌细胞系 被引量:1 2022年 为构建Slfn2^(-/-)小鼠肺癌细胞系(Lewis lung carcinoma,LLC),本文利用CRISPR/Cas9技术,在CHOPCHOP网站筛选Slfn2基因的sgRNA序列,将合成的oligo序列退火后连接至pLenti CRISPR v2质粒中,并与pMD2.G、psPAX2共转染至293T细胞中包装慢病毒;利用包装的慢病毒感染LLC细胞,经筛选和单克隆培养,获取Slfn2^(-/-)敲除的LLC细胞。结果显示:SgRNA成功插入载体重组质粒;利用3质粒包装的慢病毒成功将LLC中的Slfn2基因突变,获得丢失8个碱基移码突变和丢失180个碱基缺失突变的Slfn2^(-/-)小鼠肺癌细胞。可见,利用CRISPR/Cas9技术成功构建了Slfn2基因敲除的小鼠肺癌细胞。 陈莹 陈莹 周祖平 蒲仕明关键词:肺癌 慢病毒 肺癌小鼠肿瘤组织IL-10的来源及其功能验证 被引量:2 2023年 为了解肺癌肿瘤组织白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)的表达和来源,并探究IL-10对肿瘤的作用,采用MSD超敏电化学发光技术检测Lewis肺癌小鼠模型血清中IL-10的水平,使用流式细胞术分析肿瘤组织IL-10的主要来源,再通过CCK-8实验、膜联蛋白V-碘化丙啶(annexin V-PI)凋亡实验、划痕实验,检测IL-10重组蛋白对肺癌细胞增殖、凋亡、迁移的影响。结果表明:Lewis肺癌小鼠血清中IL-10水平较正常小鼠显著升高,肿瘤组织中的IL-10主要由免疫细胞产生。其中,B细胞和髓源性抑制细胞(myeloid-derived suppressor cells, MDSCs)是IL-10的主要来源,IL-10重组蛋白可以显著抑制LLC(小鼠Lewis肺癌细胞:Lewis lung carcinoma line)的增殖和迁移并促进其凋亡。综上可见,IL-10水平与肺癌密切相关,B细胞和MDSCs是产生IL-10的主要来源,IL-10可能通过激活CD8 T细胞或者直接作用于肿瘤细胞而发挥抗肿瘤作用。 何柳 蔺超 李培华 陈治秀 朱宇 朱宇 蒲仕明关键词:肺癌 IL-10 细胞来源