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重组蛋白可溶性表达促进标签的研究进展被引量：4: 2013年; 重组蛋白表达在现代生物学技术发展中起着重要的推动作用。通过利用宿主实现外源性蛋白表达,为一些重要蛋白尤其是人源蛋白的结构和功能研究的提供了强有力的工具。促溶标签的应用可以有效地解决重组蛋白表达时常遇到的溶解性问题,并且这些标签还能够对重组蛋白产量、结构和纯化等有一定影响。该综述介绍了几种常见的促溶标签的特性,对其各自的应用特点进行总结,归纳促溶标签最新研究进展。根据文献报导就应用时存在的一些问题和进行探讨,最后展望了促溶标签研究可能产生突破的方面,以便研究者在实验中选择合适的标签。; 李祥魁范翠英崔亚君刘璇; 关键词：重组蛋白

响应面法优化超声波辅助提取甘草多糖工艺被引量：31: 2010年; 研究乌拉尔甘草多糖的超声波辅助提取工艺。在单因素试验的基础上,选定超声波功率、提取时间和提取温度3因素的3个水平进行中心组合试验,建立甘草多糖提取率和纯度的二次回归方程,其决定系数分别为98.98%和91.67%。通过响应面分析及岭嵴分析得到优化提取工艺条件为超声功率580W、提取时间64.5min、提取温度64.6℃,该条件下多糖提取率预测值为9.62%,验证值为9.56%,是传统水浴浸提法提取率的3倍多;多糖纯度预测值为71.36%,验证值为65.65%。红外光谱检测结果显示,超声波提取法与传统浸提法所得甘草粗多糖基本构成相同。; 张琳樊金玲朱文学马海乐范翠英; 关键词：乌拉尔甘草多糖超声波辅助提取

PSMB1和EGFR的重组表达及药物体外筛选: 蛋白酶体是分布于真核细胞中的一类多亚基蛋白酶复合物，它在胞内蛋白质降解的泛素-蛋白酶体通路中起着关键性的作用。重组表达蛋白酶体的活性亚基可以用于体外筛选、寻找具有蛋白酶体抑制剂作用的化合物。本研究利用原核表达体系（pET...; 范翠英; 关键词：蛋白酶体表皮生长因子原核表达 BIACORE 体外筛选; 文献传递

蟾毒灵诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡的蛋白组学研究被引量：8: 2012年; 目的:该文通过考察蟾毒灵(bufalin)处理人宫颈癌HeLa细胞株后对细胞蛋白质表达谱的影响,寻找蟾毒灵在HeLa细胞中的可能作用靶点。方法:通过MTT检测细胞活性确定蟾毒灵的IC50,并通过流式细胞术和Hoechst 33342染色检测蟾毒灵诱导细胞凋亡。应用蛋白质组学技术寻找差异表达蛋白点并进行鉴定,用Western blotting试验进行确认。结果:蟾毒灵具有较强的细胞毒作用,IC50(154±21.5)nmol.L-1,可以诱导HeLa细胞发生凋亡。蛋白组学的结果显示蟾毒灵处理组与对照组相比有11个差异表达蛋白,其中9个蛋白点发生了下调;2个蛋白发生了上调。这些蛋白可能是蟾毒灵在HeLa细胞中的作用靶点。Western blotting分析显示heat shock protein 27,vimentin,HNRPK在蟾毒灵处理后的表达调节结果与双向电泳的结果吻合。结论:蟾毒灵可以诱导人宫颈癌HeLa细胞发生凋亡,其凋亡诱导作用可能是多个靶点蛋白共同参与的结果。; 潘素娜王育红冯利兴范翠英果德安刘璇樊金玲; 关键词：蟾毒灵 HELA细胞细胞凋亡双向电泳

重组蛋白表达系统的研究进展被引量：54: 2012年; 利用基因重组表达外源蛋白在现代生物学技术的发展与应用中起着重要的作用。根据外源基因表达宿主不同,可以将表达系统大致分为两类:原核和真核表达系统。该文比较了常见的几种表达系统的优缺点,并探讨了在选择适合的表达系统时所需要考虑的因素如目标蛋白的产量、生物学活性、用途及其物理化学性质以及表达系统本身的成本、便利性及其安全性等,以便于选择适合的表达系统,优化提高重组蛋白产量等,进而更好地服务于科学研究。; 范翠英范翠英樊金玲樊金玲刘璇; 关键词：基因重组外源基因原核表达系统真核表达系统

人蛋白酶体亚基PSMB1的重组表达、纯化及在蛋白酶体抑制剂体外筛选中的应用被引量：1: 2012年; 蛋白酶体是真核细胞中的一类多亚基蛋白酶复合物,它在胞内蛋白质降解的泛素-蛋白酶体通路中起关键作用。重组表达蛋白酶体的活性亚基可以用于在体外筛选、寻找具有蛋白酶体抑制剂作用的化合物。将人蛋白酶体催化亚基(PSMB1)cDNA的编码区(全长726 bp)克隆至原核表达载体pET28a(+),构建重组质粒pET28a-PSMB1,转化大肠杆菌BL21(DE3),通过1 mmol/L IPTG,20℃过夜诱导,获得相对分子量约为27 kDa的重组蛋白,采用IMAC亲和层析柱纯化重组蛋白,纯化后的重组蛋白纯度超过95%。重组蛋白酶解后经NanoLC-MS/MS鉴定表明所表达的融合蛋白氨基酸序列完全正确。在体外BIAcore分析中,重组蛋白表现出对不同化合物的选择性结合能力,其中与蛋白酶体抑制剂雷公藤红素的结合较强,10μmol/L的雷公藤红素与重组蛋白的结合达到27 RU,并且具有良好的浓度依赖型。本研究建立了表达、纯化人蛋白酶体催化亚基PSMB1的方法,并应用于具有蛋白酶体抑制活性化合物的体外筛选。; 范翠英冯利兴张冬梅潘素娜刘璇果德安樊金玲; 关键词：原核表达 BIACORE 体外筛选

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范翠英