胡美玉
- 作品数:28 被引量:145H指数:7
- 供职机构:复旦大学附属中山医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金上海市科学技术委员会资助项目默沙东科研基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 自体干细胞移植治疗兔后肢缺血中超顺磁氧化铁纳米颗粒标记磁共振体内示踪的研究被引量:7
- 2007年
- 目的探讨自体骨髓间充质干细胞(BMSC)移植治疗兔后肢缺血中超顺磁氧化铁纳米颗粒(SPION)标记磁共振成像(MRI)体内示踪的可行性和有效性。方法新西兰大白兔14只,分成A、B两组,各7只。制作后肢缺血模型。A组移植SPION与5-溴脱氧尿嘧啶(BrdU)共标记的自体BMSC;B组作为对照。术后MRI示踪,组织学检查,免疫组织化学染色。结果鉴定显示BMSC CD34和CD45阴性,CD44阳性。B组中1只死亡。A组毛细血管密度198.9±2.3,B组80.5±5.1,A组毛细血管/肌纤维比值0.84±0.03,B组0.35±0.04,两组差异均有统计学意义(P<0.01)。A组:电镜发现血管内皮细胞胞质内含SPION;对应部位组织切片血管壁细胞普鲁士兰铁染色、BrdU和CD34染色均阳性;MRI显示术后即时A组注射部位圆形低信号影,术后1~3周向周围扩散,部位与组织学检查结果一致。B组仅能见到普鲁士兰阳性颗粒游离于组织间隙,并非位于血管内皮细胞;MRI低信号影局限于注射局部,无扩散。结论自体BMSC移植治疗兔后肢缺血中SPION标记MRI体内示踪可行、有效。
- 董智慧符伟国胡美玉王玉琦
- 关键词:后肢缺血
- 腺病毒介导的P21^(WAF1/CIP1)基因诱导血管平滑肌细胞凋亡被引量:1
- 2002年
- 目的 应用重组腺病毒载体介导的P2 1WAF1/CIP1基因转染血管平滑肌细胞 (VSMC) ,探讨P2 1WAF1/CIP1基因对平滑肌细胞凋亡的诱导作用。材料与方法 P2 1WAF1/CIP1的重组腺病毒载体转染体外培养的猪主动脉平滑肌细胞 ,应用RT PCR检测外源性P2 1WAF1/CIP1基因的表达 ,并通过细胞形态、原位细胞凋亡分析、流式细胞仪和细胞生长曲线等方法观察P2 1诱导VSMC凋亡 ,抑制VSMC增殖的情况。结果 P2 1WAF1/CIP1基因的重组腺病毒载体可以有效地转入平滑肌细胞中 ,诱导平滑肌细胞凋亡 ,并能显著地抑制平滑肌细胞增殖。结论 外源性P2 1WAF1/CIP1基因转移可以诱导平滑肌细胞凋亡 ,显著地抑制平滑肌细胞增殖。
- 尚鸣异王建华周康荣卢大儒胡美玉李文涛谢倩
- 关键词:基因诱导细胞凋亡血管平滑肌细胞术后再狭窄血管增生性疾病
- 肝癌MHCC97H细胞肝细胞生长因子(HGF)/c-Met通路激活对血管内皮生长因子表达的影响被引量:2
- 2008年
- 目的:研究肝癌MHCC97H细胞中肝细胞生长因子(HGF)诱导血管内皮生长因子(VEGF)表达过程中的转录因子Sp1的活性。方法:将MHCC97H细胞分为对照组、HGF组、光辉霉素组,分别用RT-PCR及Western blot分析与VEGF mRNA、蛋白质表达及Sp1水平、磷酸化Sp1水平变化以及应用Sp1阻断剂光辉霉素后上述目标蛋白的变化情况。结果:外源性HGF60ng·mL-1孵育15min、16h后分别可以使MHCC97H细胞的VEGF mRNA及其蛋白质的表达明显提高(P<0.01)。这一过程中Sp1水平无明显变化(P>0.05)。进一步分析发现磷酸化Sp1水平明显升高(P<0.01)。用Sp1抑制剂光辉霉素预先处理MHCC97H细胞1h后,再加入HGF 60ng·mL-1 VEGFmRNA及其随后蛋白质表达均受到抑制(P<0.01)。结论:HGF诱导MHCC97H肝癌细胞VEGF表达是通过增强Sp1磷酸化实现的。
- 潘志刚刘康达胡美玉吴伟忠
- 关键词:肝癌肝细胞生长因子血管内皮生长因子转录因子
- 甘草次酸靶向星状细胞治疗鼠肝纤维化的实验研究
- 张其胜田庚元张健胡美玉王慧蒋晓渠史立华袁如华JohnM,Luk
- 我们以廉价的甘露糖为原料,经过七步合成法,以6.4 %的总收率得到拟糖蛋白载体M6Px-HSA,通过改变化合物M6P与人血清蛋白 (HSA)的投料比,得到取代度 (X)从11到37不同的化合物。然后用体外实验观察不同取代...
- 关键词:
- 关键词:肝纤维化甘草次酸星状细胞
- 靶向CD151-整合素α6β1结合域的多克隆抗体的制备及初步应用被引量:2
- 2014年
- 目的:制备CD151-整合素α6β1结合域的多克隆抗体,探讨其免疫学特性。方法:化学合成CD151-整合素α6β1结合域的多肽CGQRDHASNIYKVEG-KLH,以此多肽免疫BALB/c小鼠,制备多克隆抗体。采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定该抗体的效价,采用Western blotting、细胞免疫荧光染色、免疫组织化学染色的方法鉴定抗体+++。结果:成功获得抗CD151-整合素α6β1结合域的多克隆抗体,ELISA试验显示该抗体效价为1:64000,Western blotting结果显示该抗体有较好的特异性,细胞免疫荧光染色和免疫组织化学染色显示阳性染色定位于肝癌细胞膜和细胞浆。结论:制备的抗CD151-整合素α6β1结合域的多克隆抗体具有较高的效价和特异性,可用于Western blotting、细胞免疫荧光染色和免疫组织化学染色等试验,该多克隆抗体对肝癌抗复发的治疗具有重要意义,值得进一步研究。
- 施国明柯爱武俞静娴胡美玉张鹏飞蔡加彬董兆如张弛邱双健孙惠川周俭樊嘉
- 关键词:肝细胞肝癌多克隆抗体CD151结合域
- 膜-细胞骨架联接分子ezrin对肝癌细胞系生长和侵袭能力的影响被引量:5
- 2006年
- 目的探讨膜-细胞骨架联接蛋白ezrin在肝细胞肝癌生长和转移过程中的作用。方法分别应用免疫荧光、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测ezrin和骨架蛋白在不同转移潜能肝癌细胞系中的表达。选取高转移潜能SF7721(SMMC-7721经转基因后稳定表达肝细胞生长因子.从而获得高转移潜能的细胞系)和 MHCC97-H细胞系为研究对象,通过RNA干扰技术下调SF7721和MHCC97-H细胞系中ezrin蛋白的表达,观察其运动和侵袭能力的变化:通过四甲基偶氮唑盐检测细胞增殖能力变化;电子显微镜观察细胞伪足,Transwell检测细胞的运动侵袭能力。结果免疫荧光显示ezrin和骨架蛋白表达于细胞质,且双色荧光证实两者存在共表达;高转移潜能细胞系SF7721,MHCC-I、MHCC97-H ezrin和骨架蛋白的表达明显高于低转移潜能细胞系SMMC-7721、 Hep3B、HepG2细胞(x2=13.277,P=0.010; x2=21.815,P<0.01)。β-肌动蛋白在高低转移潜能细胞系的表达差异无统计学意义。通过RNA干扰技术抑制ezrin蛋白表达后,SF7721和MHHC97-H的细胞的增殖和侵袭能力均显著下降。结论 ezrin和骨架蛋白的过表达与肝癌的转移潜能相关,通过下调ezrin的表达可明显抑制肝癌细胞系SMMC-7721和MHCC97-H细胞的增殖和运动侵袭能力。
- 张岩胡美玉陈碧华王志军吴伟忠周康刘康达
- 关键词:细胞支架蛋白质类
- 肝炎、肝硬化、肝癌及胃癌患者血清MMP-1、TIMP-1以及MMP-1/TIMP-1复合物的检测
- 2001年
- 目的 检测血清基质金属蛋白酶 -1(MMP 1)、组织金属蛋白酶抑制剂 1(TIMP 1)及两者复合物 (MMP 1/TIMP 1com plex)含量并评价其变化意义。方法 采用双抗体夹心式酶联免疫吸附法 (ELISA)对 10例健康对照、15例急性肝炎患者、15例慢性活动性肝炎患者、15例晚期肝硬化患者、15例肝癌手术患者、15例晚期肝癌患者以及 10例胃癌入院手术患者进行检测。结果 与健康对照组相比 ,慢性活动性肝炎、晚期肝硬化以及晚期肝癌患者血清TIMP 1水平显著增高 ;慢性活动性肝炎及肝癌手术患者组血清MMP 1及MMP 1/TIMP 1复合物水平显著下降 ;急性肝炎及胃癌手术患者血清MMP 1、TIMP 1及MMP 1/TIMP 1复合物含量无显著变化。结论 在慢性活动性肝炎、晚期肝硬化以及肝癌患者存在严重的MMP 1和TIMP 1的失平衡 ,这种失平衡是这些患者肝脏细胞外基质净沉积的重要原因。MMP 1和TIMP 1在急性肝炎和胃癌患者血清含量总体变化不显著。
- 郭津生王吉耀方国汀胡美玉贺伯明
- 关键词:基质金属蛋白酶-1组织金属蛋白酶抑制剂-1肝炎
- 格尔德霉素对胆囊癌的体外治疗作用
- 2010年
- 目的 观察格尔德霉素(GA)对胆囊癌细胞生长、运动和侵袭的影响及其化疗增敏作用.方法 噻唑蓝(MTT)比色法检测(0、0.0064、0.032、0.16、0.8、4、20、100)×10-6 mol/L浓度梯度的GA对胆囊癌细胞GBC-SD生长影响;观察1 μmoL/L的GA对0.1倍最大血药浓度(Maximal plasma concentration,Cmax)的5-氟尿嘧啶(5-Fu,Cmax 10 mg/L)、丝裂霉素(MMC,Cmax 3 mg/L)、阿霉素(ADM,Cmax 0.4 mg/L)的化疗增敏作用.应用迁移运动及侵袭实验观察1μmol/L的GA体外对胆囊癌细胞运动、侵袭能力的影响.结果 GA体外对胆囊癌细胞有较强的抑制作用,半数抑制浓度(Inhibitory concentration 50%,IC50)在20μmol/L水平.1μmol/L低生长抑制浓度的GA能够增加传统化疗药物对GBC-SD生长的抑制作用,有明显的增效作用;同时低浓度的GA可以抑制肝细胞生长因子(HGF)对GBC-SD运动迁移和侵袭能力的诱导作用.结论 GA有可能成为胆囊癌化疗和抗转移的有效药物.
- 锁涛张涛童赛雄艾志龙刘厚宝秦新裕胡美玉王志军
- 关键词:胆囊癌格尔德霉素
- 三氧化二砷诱导犬髂动脉平滑肌细胞凋亡的实验研究被引量:1
- 2006年
- 目的:研究三氧化二砷诱导犬髂动脉血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)凋亡的作用。方法:采用 MTT、细胞生长曲线、倒置相差显微镜、细胞爬片HE染色、透射电镜等观察三氧化二砷作用后VSMC的变化。结果: VSMC细胞与三氧化二砷共孵育后出现细胞数目减少,脂肪颗粒增多;电镜等观察到核膜皱缩、核染色质凝结、边集等细胞凋亡现象,并且在一定的范围内此现象随药物浓度的增加而明显。结论:一定浓度的三氧化二砷能抑制VSMC细胞的生长.导致细胞变性.并诱导细胞凋亡。提示三氧化二砷作为涂层支架的药物可以抑制的平滑肌细胞生长,促进平滑肌细胞凋亡。
- 陈鹏王建华胡美玉
- 关键词:三氧化二砷凋亡
- 活性钙离子液对离体牙超微形态的影响与细胞毒性评价被引量:1
- 2012年
- 目的:研究活性钙离子液对离体牙牙釉质和牙骨质超微形态的影响以及对小鼠胚胎成纤维细胞NIH3T3的细胞毒性,从而为其临床应用提供依据。方法:应用Quanta200FEG场发射扫描电镜检测钙离子液成分及含量;观察钙离子液作用于离体牙前后,牙釉质和牙骨质的超微形态;MTT比色法观察不同浓度钙离子液对小鼠胚胎成纤维细胞NIH3T3细胞生长的影响,计算细胞相对增殖率并进行细胞毒性分级。结果:钙离子液主要成分为钙、碳、氧、氯。通过扫描电镜观察,钙离子液浸泡离体牙后,牙釉质和牙骨质无变化。细胞毒性分级合格的钙离子液的最大浓度为0.344 mg/mL。结论:活性钙离子液能应用于口腔,但需选择适合的浓度。
- 毕玮余优成龚逸明周康赵青华胡美玉
- 关键词:细胞毒性MTT比色法