王金良
- 作品数：6 被引量：28H指数：4
- 供职机构：南京军区南京总医院更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 在琼脂糖表面无支架条件下构建组织工程软骨被引量：2
- 2008年
- 背景:实验表明,软骨细胞在体外培养时,经常发生表型的丢失。但形成软骨细胞团块时可以维持软骨细胞表型,由此人们探讨无支架结构培养组织工程软骨的技术。目的:拟建立软骨细胞聚集培养体系,观察在琼脂糖表面培养软骨细胞,无支架条件下构建组织工程软骨的特点。设计、时间及地点:单一样本观察,于2006-10/2007-04在解放军南京军区总医院骨科研究所完成。材料:SPF级新西兰白兔4只,2周龄,雌雄不限。方法:分离、提取兔关节软骨原代软骨细胞,将低熔点琼脂糖铺于24孔培养板表面,按每孔2.5×105接种提取的兔原代软骨细胞,在培养箱内培养,定期换液。主要观察指标:取10d标本行组织学、Ⅱ型胶原免疫组织化学检测。结果:10d时,软骨细胞自聚集形成有一定形状、大小的类软骨组织,苏木精-伊红染色可见软骨陷窝结构,甲苯胺蓝染色见紫红色异染,说明有蛋白聚糖的分泌。钙染色未见钙化,Ⅱ型胶原免疫组织化学染色有棕黄色颗粒,说明有Ⅱ型胶原分泌。结论:在琼脂糖表面构建组织工程软骨的培养体系,琼脂糖膜阻止软骨细胞的黏附和伸展,从而保持软骨细胞的圆形形态;软骨细胞在琼脂糖表面直接接触,加强了细胞之间的信息交流,有利于维持细胞的表型,维持软骨细胞分泌细胞外基质的特征。
- 王金良赵建宁郭亭岳鹏举何劼何志伟
- 关键词：无支架组织工程软骨琼脂糖免疫组织化学
- 可注射型及柱型藻酸钙载体联合运用修复兔膝关节软骨缺损的效果观察被引量：5
- 2008年
- 目的:使用软骨细胞、可注射藻酸钙及柱型藻酸钙载体,修复兔股骨髁间非负重区骨软骨缺损,观察同种材料不同形态联合修复的效果。方法:将24只新西兰大白兔随机分成4组,第1组给予注射藻酸钙凝胶修复,第2组放置单纯柱型藻酸钙载体修复,第3组放置柱型藻酸钙载体后于周缘注射凝胶,第4组为空白不用任何支架材料修复。每只动物修复效果以Xij表示,以定量的方法统计出所有动物修复效果,以评分的形式表示,作统计学分析。结果:实验组与对照组一共4组数据,统计每组(i)中每只兔(j)膝关节软骨缺损修复效果评分Xij,然后进行组间比较。根据单向方差分析的思想,用SPSS12.0软件计算F=69.0,P<0.05,联合修复组效果好于其他各组。结论:柱型藻酸钙载体具有良好的成型效果且有一定的机械强度,可注射藻酸钙凝胶具有良好的黏附性,用于人工材料与正常结构的整合具有明显优势,两者联合修复软骨缺损,优势互补,符合软骨组织工程的修复与整合的要求。
- 何志伟赵建宁岳鹏举何颉王金良郭亭
- 关键词：软骨膝关节
- 聚羟基丁酸酯-羟基戊酸酯支架复合同种异体软骨细胞修复关节软骨缺损的实验研究被引量：4
- 2009年
- 目的:探讨聚羟基丁酸酯-羟基戊酸酯(PHBV)三维多孔材料作为软骨组织工程支架的可行性及有效性。方法:采用"压片-热处理-粒子析出技术"制备PHBV多孔支架。体外分离培养软骨细胞后接种到PHBV支架体外培养4周,期间扫描电镜观察细胞在支架上的生长情况,然后与单纯PHBV支架同时植入兔膝关节软骨缺损区继续培养4、8、12周后取材,分别行大体、组织学、Ⅱ型胶原免疫组化观察。进行Wakitani评分,观察其体内修复关节缺损效果。结果:电镜观察示软骨细胞在支架上黏附、增殖良好并能分泌细胞外基质,组织学观察示PHBV支架浅层有新生软骨组织形成,于4周后开始形成透明软骨样结构且表面基本平整与宿主整合良好,组织学切片上可见类软骨形成并分泌甲苯胺蓝异染的软骨基质和软骨特异性Ⅱ型胶原。结论:PHBV可以作为软骨组织工程支架材料,能够用于再生修复软骨的缺损。
- 岳鹏举赵建宁何志伟何颉王金良郭亭
- 关键词：软骨细胞关节软骨
- 复合支架材料在软骨组织工程中的研究进展被引量：8
- 2009年
- 用于软骨组织工程的支架材料种类众多,但尚未发现一种理想的材料可满足组织工程的需要,但将各种材料进行复合可为组织工程的需要带来新的希望。现就复合支架材料在软骨组织工程中的研究作一综述。
- 王金良赵建宁
- 关键词：软骨
- 结合转化生长因子β1的肝素化胶原/壳聚糖支架复合脂肪干细胞修复兔关节软骨缺损被引量：8
- 2009年
- 背景:通过制备肝素化胶原/壳聚糖支架来提高与转化生长因子β1的结合率,将脂肪干细胞种植于该支架材料上后直接种植于体内,可避免体外诱导过程,缩短组织工程构建的时间。目的:探索结合有转化生长因子β1的肝素化胶原/壳聚糖支架与脂肪干细胞复合修复兔软骨缺损的可行性。设计、时间及地点:软骨组织工程体外和体内实验相结合的研究,于2007-09/2008-07在南京大学生命科学院和解放军南京军区南京总医院动物试验中心完成。材料:分离培养兔脂肪间充质干细胞,行体外扩增培养至第3代,达到一定数量后接种于结合有转化生长因子β1的肝素化胶原/壳聚糖支架上得到细胞支架复合物。方法:取30只新西兰大白兔制备兔膝全层软骨缺损模型。随机选取一侧植入细胞支架复合物(实验组),其中15只另一侧植入结合有转化生长因子β1的肝素化胶原/壳聚糖支架(单纯支架组),余15只另一侧不做任何处理,作为空白对照。主要观察指标:于12周取材,从大体和组织学方面观察软骨修复情况。结果:实验组缺损区大部分被修复,缺损区被软骨组织充填,组织学检查提示形成典型的透明样软骨结构。而单纯支架组多不完全充填,其本为纤维组织状物覆盖,组织学检查未见明显软骨修复。空白对照组无明显修复。结论:结合有转化生长因子β1的肝素化胶原/壳聚糖支架与脂肪干细胞复合能较好修复软骨缺损。
- 韩宁波赵建宁张勇何劼卢翔王金良郭亭
- 关键词：脂肪干细胞肝素化软骨组织工程
- 支架及无支架条件下构建组织工程软骨的研究进展被引量：1
- 2007年
- 支架材料的研究是组织工程的研究热点之一,软骨细胞复合培养给组织工程软骨的构建带来希望,单一的材料诸如胶原、透明质酸、壳聚糖、纤维蛋白凝胶等已经证明可以与软骨细胞复合培养,两种或者多种材料复合可以提高材料的性能,更好地用于组织工程软骨的构建,并满足软骨缺损修复的需要;同样,在无支架情况下应用软骨细胞聚集培养、沉淀培养的方法,可以构建组织工程软骨,并给软骨缺损的修复带来新希望,但目前的研究较少。两者是组织工程软骨构建的两个主要方向。
- 王金良赵建宁
- 关键词：软骨细胞培养
