王甲慧
- 作品数：7 被引量：5H指数：2
- 供职机构：吉林农业大学动物科学技术学院更多>>
- 发文基金：吉林省教育厅“十二五”科学技术研究项目国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 抑制性消减杂交技术在细菌活的非可培养状态研究中的应用
- 2014年
- 在基因分离与克隆中,构建各种cDNA文库是近些年发现新基因及研究基因功能常用的基础工具之一。其中,抑制性消减杂交技术(SSH)是一种高效分离差异表达基因的方法,在分离筛选细菌活的非可培养状态(VBNC)与正常菌株差异基因中,应用这种研究方法是研究细菌VBNC状态菌株毒力、致病性和耐药性及菌株遗传分化关系的重要途径。文章旨在介绍SSH构建消减cDNA文库在原核生物中的应用及对其在细菌VBNC状态新基因筛选中的应用前景,并提出了展望。
- 李文博谭平平李影袁翔王甲慧
- 关键词：CDNA文库基因筛选
- p58^(IPK)基因RNA干扰载体的构建及鉴定被引量：2
- 2014年
- 针对p58IPK基因设计2个靶位点,并根据靶位点合成2对寡聚核苷酸序列,退火后连接到经BglⅡ和HindⅢ双酶切的pSUPER载体上,分别构建抑制p58IPK蛋白基因表达的p58IPK-siRNA1和p58IPK-siRNA2载体并鉴定其功能。重组构建的pSUPER-p58IPK载体经酶切鉴定及基因序列分析,结果表明60个碱基成功插入到预计位点,并且序列完全一致。将构建的2个RNAi载体分别转染到293T细胞中,通过Real-time PCR和Western blotting的方法检测其对p58IPK的抑制效果,结果证明p58IPK-siRNA2可显著抑制细胞中p58IPK基因的表达,可为进一步研究p58IPK在禽流感病毒感染中的作用机制奠定基础。
- 王甲慧李影张欢欢关振宏
- 关键词：RNA干扰
- VBNC沙门氏菌突变体差异基因序列分析
- 为获得VBNC沙门氏菌突变体并通过抑制性消减杂交的方法鉴定VBNC相关基因，本研究以鼠伤寒沙门氏菌为出发菌株，经过化学诱变、VBNC条件下筛选出VBNC沙门氏菌突变体。通过抑制性消减杂交的方法，获得了VBNC沙门氏菌突变...
- 李莹王立新李文博袁翔王甲慧李影
- 关键词：沙门氏菌基因表达病理机制
- 文献传递
- 食品中VBNC细菌检测的研究
- 细菌活的非可培养状态的发现,拓展了微生物学的研究领域。作为微生物学的一个全新概念,它的提出对传统的食品安全、水质监测、检验检疫、微生态制剂以及人畜共患病研究提出了新的挑战。本文结合VBNC细菌生物学特性和检测方法两个方面...
- 王立新李莹袁翔王甲慧李文博李影
- 关键词：食品安全生物学特性
- 文献传递
- 抑制性消减杂交技术在细菌活的非可培养状态研究中的应用被引量：2
- 2013年
- 在基因分离与克隆中,构建各种cDNA文库是近些年在发现新基因及研究基因功能常用的基础工具之一。其中,抑制性消减杂交技术是一种高效分离差异表达基因的方法,在分离筛选细菌活的非可培养状态与正常菌株差异基因中,应用这种研究方法是研究细菌VBNC状态株毒力、致病性和耐药性及菌株遗传分化关系的重要途径。本文旨在介绍SSH构建消减cDNA文库在原核生物中的应用及对其在细菌VBNC状态新基因筛选中的应用前景进行综合论述,并对其进一步研究提出了展望。
- 李文博谭平平李影袁翔王甲慧
- 关键词：CDNA文库抑制性消减杂交技术
- 水中活的非可培养状态病原菌检测方法的研究进展
- 2013年
- 水中存在大量的致病性微生物,严重威胁人类和动物的健康。目前检测病原菌通常采用培养基培养法。但在不良环境下,一些病原菌能够进入"活的非可培养状态"(VBNC),采用培养基培养方法可能无法检测出。文章介绍几种能够进入VBNC状态的水生病原菌和VBNC病原菌检测方法,为建立敏感特异的检测方法奠定基础。
- 袁翔李影李文博王甲慧丛鑫
- 关键词：致病菌VBNC
- 酵母双杂交系统筛选与狂犬病病毒M蛋白相互作用的宿主蛋白被引量：1
- 2014年
- 为筛选人脑cDNA文库中与狂犬病病毒基质蛋白(M蛋白)具有相互作用的蛋白基因,并对阳性克隆进行初步的分析和鉴定。首先构建了含有M基因的诱饵质粒pGBKT7-CVS11-M,并对其进行自激活和毒性检测,然后采用酵母双杂交技术初步筛选出与M蛋白具有相互作用的12个阳性克隆,对阳性克隆进行PCR鉴定及测序分析,并通过酵母回复性试验最终获得3个无重复性克隆,编码的蛋白质分别为TAB2、P4HA2和RCN1。为研究狂犬病病毒M蛋白在致病机制中的作用提供了参考。
- 张欢欢王甲慧段铭张茂林关振宏
- 关键词：狂犬病病毒M蛋白酵母双杂交
