王玉卓
- 作品数：9 被引量：40H指数：4
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- 灰树花多糖对四氯化碳致急性肝损伤的保护作用被引量：7
- 2010年
- 目的探讨灰树花多糖(Polysaccharide of Grifola Frondosa,PGF)对四氯化碳(Carbon tetrachloride,CCl4)急性肝损伤的保护作用。方法 72只昆明种小鼠随机分为8组:正常对照组、CCl4损伤组、PGF保护组(4.5、9、18、36、72、144mg/kg),每组9只。CCl4腹腔注射建立小鼠急性肝损伤模型。观察肝组织病理学改变;测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)的活性,肝组织匀浆测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量及凋亡相关蛋白bcl-2、bax的表达。结果与CCl4损伤组比较,PGF保护组肝组织病理改变明显减轻;血清ALT、AST活性明显降低(P<0.05);肝组织匀浆SOD含量明显升高(P<0.05);MDA含量明显降低(P<0.05);凋亡相关蛋白bcl-2的表达量明显增加、bax的表达量明显降低。综合各指标以72mg/kg保护组效果最佳。结论PGF对CCl4急性肝损伤有明显保护作用,其机制可能与抑制脂质过氧化,清除自由基,调节凋亡相关蛋白bcl-2、bax的表达有关。
- 李树卿王玉卓
- 关键词：灰树花多糖CCL4肝损伤BCL-2/BAX小鼠
- 灰树花多糖对四氯化碳肝损伤的保护作用及其机制的研究
- 化学性肝损伤已成为继病毒性肝损伤之后的第二大肝病诱因，目前临床应用的500～1000余种中西药物以及多种化学药品，均可引起不同程度的肝病。据国内外资料报道，有20％的暴发性肝衰竭由化学药物引起。近年来，化学性肝损伤呈增加...
- 王玉卓
- 关键词：灰树花多糖肝损伤L-02BCL-2/BAX
- 文献传递
- PI3K/Akt信号转导通路在绞股蓝皂苷拮抗谷氨酸诱导胎鼠大脑皮层神经元氧化性损伤中的作用被引量：2
- 2011年
- 目的应用磷脂酰肌醇3位羟基激酶(PI3K)的特异性阻断剂LY294002,研究PI3K/Akt信号转导通路在绞股蓝皂苷(GPs)拮抗谷氨酸(Glu)诱导胎鼠大脑皮层神经元氧化性损伤中的作用。方法以体外原代培养的14～15d胎鼠大脑皮层神经元为研究对象,用相差显微镜进行形态学观察,MTT法检测神经元存活率,流式细胞仪检测神经元凋亡率,Western blot法检测磷酸化Akt和总Akt的表达,分析PI3K/Akt信号转导通路在GPs拮抗Glu诱导神经元氧化性损伤中的作用。结果 GPs可抑制Glu诱导的胎鼠大脑皮层神经元氧化性损伤,使神经元存活率上升,凋亡率降低,磷酸化Akt表达增加,PI3K的特异性抑制剂LY294002明显抑制了GPs对神经元的保护作用。结论绞股蓝皂苷激活了PI3K/Akt信号转导通路,拮抗谷氨酸诱导的胎鼠大脑皮层神经元氧化性损伤。
- 张道来孙涛谢珊珊王玉卓冯玉新辛华
- 关键词：绞股蓝皂苷谷氨酸大脑皮层神经元1-磷脂酰肌醇3-激酶
- 酒精对原代培养的神经前体细胞间隙连接蛋白43表达的影响被引量：3
- 2009年
- 目的研究贴壁培养的神经前体细胞(NPCs)间隙连接蛋白43(Cx43)的表达及酒精对其表达的影响。方法采用贴壁培养的方法,取孕14 d的胎鼠端脑进行NPCs体外培养,经形态学观察和纯度鉴定后,再采用免疫荧光化学方法,观察NPCs中Cx43的表达,利用体外NPCs酒精损伤实验模型,蛋白质免疫印迹技术和刻痕标记/荧光扩散实验,分析酒精对NPCs中Cx43表达及间隙连接功能的影响。结果原代贴壁培养7 d的细胞NPCs阳性率达86.74%,免疫荧光化学法证实NPCs能表达Cx43,蛋白质免疫印迹实验证实酒精可以减少Cx43的表达,刻痕标记/荧光扩散实验显示酒精对NPCs的间隙连接功能具有抑制作用。结论原代贴壁培养的NPCs可大量表达Cx43,酒精可以通过降低Cx43表达量抑制间隙连接功能,并且该抑制作用随酒精作用浓度的增加而提高。
- 孙涛张道来谢珊珊王玉卓冯玉新辛华
- 关键词：连接蛋白43酒精中毒细胞神经前体细胞WISTAR
- 体外原代培养胎鼠大脑皮层神经元NMDAR1亚基表达的发育性变化被引量：1
- 2009年
- 目的探讨体外原代培养胎鼠大脑皮层神经元NMDAR1（NR1）亚基表达的发育性变化。方法利用体外原代培养Wistar孕14～15d胎鼠大脑皮层神经元，采用免疫荧光法鉴定神经元的纯度和NR1亚基在神经元上的定位，采用流式细胞术和免疫印迹法（Western blot）检测不同培养时间神经元NR1亚基的表达情况。蛄杲体外原代培养的胎鼠大脑皮层神经元纯度均达到90％以上，免疫荧光标记显示NR1亚基主要分布在神经元胞膜及树突干膜上，流式细胞仪检测培养1、2、3、4、6、9、12d神经元NR1亚基平均荧光强度分别为4．57±0．99、8．18±1．22、13．67±1．99、20．33±1．03、26．30±2.88、31．71±2．47、28．63±1．40，westem blot显示细胞膜蛋白中NR1亚基在1～2d表达微弱，3～6d表达逐渐增高，6d以后保持稳定。结论体外原代培养的胎鼠大脑皮层神经元NR1亚基有发育性变化，这种变化与神经元的成熟度有关。
- 张道来孙涛谢珊珊王玉卓赵玲冯玉新辛华
- 关键词：神经元WISTAR
- 绞股蓝多糖含药血清对四氯化碳肝细胞损伤的保护作用被引量：7
- 2011年
- 目的研究绞股蓝多糖(gynostemma pentaphyllum makino polysaccharide,PGP)含药血清对四氯化碳(car-bon tetrachloride,CCl4)诱导的肝细胞损伤保护作用。方法采用中药血清学方法收集PGP含药血清,用CCl4诱导肝HepG2细胞损伤,设正常对照组、CCl4损伤组和不同浓度PGP含药血清保护组;细胞形态学观察细胞凋亡,MTT法检测细胞活力,生化法检测细胞培养上清液中丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT/GPT)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST/GOT)活性及western blot凝胶电泳检测细胞色素P450 2E1的表达。结果 各PGP含药血清保护组肝细胞损伤程度明显减轻;细胞存活率显著升高(P<0.05);上清液中ALT、AST活性显著降低(P<0.05);CYP 2E1表达量显著增加。以4～8 mg·kg-1·d-1保护组效果最佳。结论 PGP含药血清对CCl4诱导的HepG2细胞损伤有明显保护作用,以4～8 mg·kg-1·d-1含药血清作用最显著。
- 龚秀吴海建王玉卓谢珊珊杨倚天李江冰李霞宋淑亮冯玉新辛华
- 关键词：含药血清四氯化碳细胞凋亡
- 灰树花多糖对四氯化碳肝L-02细胞损伤的保护作用被引量：6
- 2010年
- 目的探讨灰树花多糖(PGF)对四氯化碳诱导的肝L-02细胞损伤的保护作用。方法培养人肝L-02细胞,建立CCl4肝细胞损伤模型,分组实验:正常对照组、CCl4损伤组和不同浓度的PGF(50、100、200和400μg/mL)保护组。采用形态学观察,MTT检测,生化分析培养液中ALT、AST活性及细胞内SOD活性、MDA含量,流式细胞仪检测线粒体膜电位、荧光探针观测胞内Ca2+浓度;Western blot检测细胞bcl-2、bax蛋白表达。结果与CCl4损伤组相比,各PGF保护组细胞活力明显增强,上清液中ALT、AST活性明显降低;细胞内SOD明显升高、Ca2+浓度MDA含量降低,细胞bcl-2的表达上调、bax的表达下调。以100μg/mL浓度保护效果最佳。结论 PGF对CCl4诱导的肝L-02细胞损伤有明显的保护作用,其机制可能与清除自由基、抑制肝细胞内Ca2+浓度的升高、改变凋亡相关蛋白bcl-2、bax的表达水平,有效地防止线粒体膜电位的下降、减少细胞凋亡有关。
- 王玉卓谢珊珊孙涛张道来孙庆济孙云帆冯玉新辛华
- 关键词：灰树花多糖肝损伤凋亡
- 四氯化碳药物性肝损伤体外模型的改进被引量：11
- 2012年
- 目的:建立一个较理想的CCl4药物性肝损伤体外模型。方法:分别采用传统方法和改进方法配制CCl4损伤液并诱导人肝HepG2细胞损伤,倒置相差显微镜观察细胞形态学变化,生化法检测上清液中ALT水平并采用MTT法测定细胞活性。结果:改进方法的CCl4诱导损伤效果明显优于传统方法,随着CCl4损伤液浓度的提高,上清液中ALT水平明显升高,而细胞活性显著降低,70%浓度CCl4损伤液诱导损伤4 h可获得最佳损伤效果。结论:利用改进方法可在体外实验中建立较理想的CCl4药物性肝损伤模型,此模型可为进一步的体外实验研究奠定基础。
- 吴海建龚秀杨倚天王玉卓李霞辛华胡立宽
- 关键词：四氯化碳HEPG2细胞药物性肝损伤
- 绞股蓝皂苷对体外培养神经前体细胞增殖的影响
- 2010年
- 目的探讨不同浓度绞股蓝皂苷(GPs)对体外培养的神经前体细胞(NPCs)增殖能力的影响。方法从孕14 d大鼠胚胎端脑分离NPCs,体外贴壁培养7 d传代。传代第1代细胞培养3 d,免疫荧光法鉴定NPCs纯度后进行分组实验。加不同浓度GPs(0、25、50、100、200、400μg/mL)作用48h后再次鉴定NPCs纯度,采用MTT法检测细胞活力、细胞计数绘制生长曲线、5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)掺入法检测细胞增殖能力、Western blot法检测细胞内增殖细胞核抗原(PCNA)表达情况。结果传代第1代培养3 d的NPCs纯度达97%,GPs作用后不影响NPCs纯度,可使细胞活性增强,生长速度加快,BrdU阳性率增高,PCNA表达水平上调。结论GPs可通过提高PCNA的表达量,促进体外培养的NPCs增殖,100μg/mL为GPs最佳作用浓度。
- 谢珊珊王玉卓孙涛张道来冯玉新辛华
- 关键词：绞股蓝属增殖WISTAR神经前体细胞
