王爱国 作品数:51 被引量:135 H指数:7 供职机构: 大连医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 教育部留学回国人员科研启动基金 辽宁省教育厅基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 更多>>
利用肝癌小鼠动物模型改进临床生物化学与检验实验的研究 被引量:1 2011年 目的增加学生对《赖氏法测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)》实验的学习兴趣。方法利用赖氏法测定Ras转基因肝癌小鼠与对照组小鼠的血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)的活性,以提高学生的认识和教学效果。结果 Ras转基因肝癌小鼠的血清ALT活性显著高于对照组小鼠。结论利用肝癌小鼠动物模型改进临床生物化学与检验实验,实验结果较为理想,增加了学生学习的主动性,提高了教学效果,可予推广应用。 王银 李坤 张雪莲 王爱国关键词:肝癌小鼠 丙氨酸氨基转移酶 赖氏法 拉布拉多犬神经类型相关基因SNP的分析 2015年 目的检测拉布拉多犬基因组DNA中与神经类型密切相关的4个基因中的6个SNP位点,以期为拉布拉多犬神经类型的早期鉴定提供分子遗传学鉴定指标。方法依据中国导盲犬大连培训基地成熟的导盲犬神经类型行为学评估标准,选取典型的安静、活泼、胆小型(弱型)三种神经类型的犬各4只为研究对象,采取静脉血,提取血细胞的基因组DNA样本,采用PCR/测序方法和PCR-RFLP分析法对12个样本4个基因的6个SNP位点:COMT(G482A)、MOAB(T199C)、ABCB1(A985T、T3442C、377-378 ins C)、GNB1L(961-962 ins G)进行变异型检测,并统计分析SNP位点的变异型与神经类型的关联度。结果 COMT基因G482A SNP位点的G/A型在胆小型犬中所占比例显著高于其在活泼型和安静型中所占比例(P=0.014;P=0.014),A/A型在活泼型犬中所占比例显著高于安静型和胆小型中所占比例(P=0.025;P=0.025);MAOB基因T199C SNP位点的T/C型在安静型犬中所占比例显著高于其在活泼和胆小型犬中所占比例(P=0.025;P=0.025);ABCB1基因A985T SNP位点的T/A型在活泼型犬中所占比例显著低于其在安静和胆小犬中所占比例(P=0.014;P=0.014);ABCB1基因T3442C SNP位点的T/C型在胆小型犬中所占比例显著高于其在活泼和安静型犬中所占比例(P=0.025;P=0.025);ABCB1基因的377-378 ins C和GNB1L基因的961-962 ins G均没有发现显著性差异(P>0.05)。结论 COMT基因G482A SNP位点的G/A型和A/A型,MAOB基因T199C SNP位点的T/C型,ABCB1基因A985T SNP位点的T/A和ABCB1基因T3442C SNP位点的T/C型与拉布拉多犬神经类型具有显著相关性,可做为拉布拉多犬神经类型早期鉴定的分子遗传诊断指标,但尚需大样本确认。 赵明媛 俞剑熊 韩芳 李雅婵 张雅丽 周子娟 王福金 王爱国 王靖宇关键词:拉布拉多犬 神经类型 分子遗传学诊断 甲状腺激素对Ras癌基因诱导的肝肿瘤抑制作用研究 被引量:7 2015年 目的甲状腺激素(thyroid hormones,THs)对肿瘤发生发展的作用机制尚存争议。本研究探讨THs对Ras癌基因诱导小鼠肝肿瘤发生发展的影响作用。方法采集3、5、7、9个月龄的非转基因和H-ras12V转基因雄鼠(48只)的肝组织和血清样本,统计肝/体质量比,并用酶联免疫法检测血清中总T3、T4水平和游离T3、T4水平;RT-qPCR法和蛋白质印迹法检测9个月龄的非转基因和转基因雄鼠肝组织中THs结合蛋白(thyroid binding globulin,TBG)的mRNA水平和Cyclin D1的蛋白水平。将36只SPF级3个月龄转基因雄鼠按随机数表法分为对照组、甲亢组(饲喂甲状腺片)、甲减组(饲喂丙硫氧嘧啶片),每组12只,处理4个月,7个月龄时采样,检测小鼠血清中总T3和T4水平,统计肝/体质量比、肝肿瘤大小及数量。结果 3、5、7、9个月龄的转基因雄鼠肝/体质量比随月龄的增大逐渐增高,并显著高于同月龄非转基因雄鼠,P<0.01。与9个月龄的非转基因雄鼠相比,同月龄转基因雄鼠血清中总T3和T4水平显著升高(P<0.01),但游离T3和T4水平没有显著变化。与9个月龄的非转基因雄鼠肝组织及转基因雄鼠的肝癌旁组织相比,肝癌组织中TBG的mRNA表达水平和Cyclin D1蛋白水平都显著升高,P<0.01。与对照组相比,甲亢组的T3和T4水平显著升高(P<0.05),甲减组的显著降低,P<0.05。与甲减组相比,甲亢组的肝/体质量比和肝肿瘤总数都显著下降,P<0.05。与甲减组相比,甲亢组直径≥2mm的肝肿瘤数量显著下降(P<0.05),但<2mm的肝肿瘤数量差异无统计学意义。结论 THs对Ras癌基因诱导的肝肿瘤发展具有显著抑制作用,但对肝肿瘤发生没有显著影响。 张敏 聂鑫 董建一 李慧玲 王福金 王爱国 王靖宇关键词:RAS癌基因 甲状腺激素 肝肿瘤 转基因小鼠 玻璃-硅胶缓释管动物体内释药性研究 2011年 目的:探索一种简易、有效、稳定的小鼠体内药物缓释新方法。方法:用孕酮作为缓释试验药物,对新研制的玻璃-硅胶缓释管在体外和体内的缓释性能进行检测。结果:玻璃-硅胶缓释管在体外具有匀速稳定缓释药物的性能,在体内可在长时间内有效维持药物在体内的稳定释放。结论:玻璃-硅胶缓释管为释放速率较快的药物在体内长期和稳定的缓释提供了简易有效的解决方法。 汤莉 刘琴 丁宁 杨超 王爱国关键词:药物缓释 孕酮 奶牛乳腺炎的免疫控制 被引量:34 1999年 奶牛乳腺炎不但影响动物自身健康、生产性能和使用价值,而且给生产者经济造成巨大损失。20年来,尽管通过加强挤奶卫生、改善环境和对干奶期母牛进行抗菌素防治等措施,使本病发生率有所降低,但由于多种因素的影响,无明显效果[1]。所以,在控制此病方面我们仍面临... 葛利江 王爱国关键词:奶牛 乳腺炎 免疫控制 标准品制备方法对FQ-PCR定量基因表达水平的影响 被引量:2 2012年 实时荧光定量PCR(FQ-PCR)标准曲线法准确定量基因表达的关键在于标准品与待检样本的扩增效率是否一致.为检测DNA标准品与样本cDNA扩增效率的一致性,探讨定量用标准品的最佳制备方法,本研究以脂肪酸结合蛋白5(Fabp5)、过氧化物酶体增殖活化受体α(Ppar-α)及β肌动蛋白(β-Actin)的3个基因为对象,分别采用质粒纯化法、PCR产物直接纯化法、PCR产物凝胶回收法制备DNA标准品,10倍梯度稀释后用FQ-PCR制作标准曲线.并以10倍梯度稀释的样本cDNA标准曲线的参数为对照,进行比较分析.结果表明,不同方法制备的DNA标准品的扩增效率差异较大,并且与cDNA的扩增效率不一致,不能对cDNA样本进行准确定量.另外,虽然目的基因在cDNA样本中的拷贝未知,不能对基因表达水平进行绝对定量,但因不同cDNA样本的同一基因的扩增效率一致,可对基因的表达进行准确的相对定量. 陈军 李慧玲 董建一 王福金 王爱国 王靖宇关键词:实时荧光定量PCR CDNA 犬毛色、毛色基因型及性别与导盲犬培训成功率的相关性研究 被引量:5 2014年 目的探究拉布拉多犬与金毛猎犬的毛色、毛色基因型及性别对导盲犬培训成功率的影响。方法采用PCR/测序方法对45只拉布拉多犬和16只金毛猎犬的毛色基因MC1R(c.C916T)、TYRP1(c.C991T)位点进行多态性检测,并对基因型加以分型,探讨犬毛色及毛色基因型与导盲犬培训成功率的相关性。另外对中国导盲犬大连培训基地犬只的性别进行统计分析,探讨犬性别与导盲犬培训成功率的关系。结果金毛猎犬共检测16只(14雄2雌),毛色表型均为金黄色,毛色基因型均为ee BB基因型;拉布拉多犬共检测45只(23雌22雄),毛色表型为黄色(23只)与黑色(22只),毛色基因型分别为ee BB、ee Bb、EEBb、Ee BB、Ee Bb。通过χ2检验的关联度分析,拉布拉多犬与金毛猎犬的毛色及毛色基因型与导盲犬培训成功率无显著相关性(P>0.05),另外,拉布拉多犬与金毛猎犬的性别与导盲犬成功率也无显著相关性(P>0.05)。结论拉布拉多犬和金毛猎犬的毛色、毛色基因型及性别与导盲犬成功率没有显著相关性,不能作为预测导盲犬培训成功率的有效指标。 俞剑熊 张雅丽 周子娟 赵明媛 韩芳 王福金 王爱国 王靖宇关键词:拉布拉多犬 p-STAT3/5在肝癌中低表达机制的研究 2018年 目前,肝癌的发病机制尚不清楚,其发生发展伴随着多种信号转导机制参与。STAT3/5(signal transducer and activator of transcription,STAT)作为信号传导与转录活化因子,在癌症的发生过程中发挥关键作用。有研究表明,STAT3/5信号通路的持续活化被视为癌症发生的标志;但Schneller等的研究发现,Ca-STAT3磷酸化可抑制癌症的发生. 崔海鹏 张乘云 刘凯 王爱国 赵娟关键词:肝癌 STAT3 STAT5 小鼠肝肿瘤细胞原位灌注分离培养方法的建立 被引量:1 2015年 目的建立一种有效分离小鼠肝肿瘤细胞的原代培养方法,为肝癌发生发展的机制研究提供有效的实验手段。方法以9月龄H-ras12V转基因肝癌小鼠为实验材料,采用传统的小鼠肝细胞原代培养的灌注分离法,并对其进行改进,即在灌注的同时,用剪刀剪去肿瘤表面阻塞的血管和组织,疏通灌注液流,达到有效消化肿瘤组织的目的。对用此改良灌注法分离的肝肿瘤细胞和肿瘤周围组织细胞进行成活率计数,并进行后续的原代细胞培养,观察第3、5、7天的细胞生长状态和形态特征。结果通过对传统的灌注分离肝细胞法进行改良,分离的肝肿瘤细胞成活率由未改良前的10%提升到40%。原代培养的结果表明,分离的肝肿瘤细胞与肝肿瘤周围的正常肝细胞的形态和随时间延长的凋亡变化状态没有显著差异。结论改良的灌注法能够有效的分离小鼠肝肿瘤细胞,并显著提高其存活率和细胞质量,可用于后续的原代细胞培养并开展相关的实验。另外,本文对改良灌注法的详细叙述也为相关的科研工作者提供了切实可行的操作规程。 李学凤 陈军 庄云芳 董建一 李慧玲 王福金 王爱国 王靖宇关键词:肝肿瘤 原代细胞培养 拉布拉多犬髋关节发育不良相关基因的SNP位点的检测 被引量:2 2015年 目的检测拉布拉多犬基因组DNA中与髋关节发育不良密切相关的5个基因中的6个SNP位点,以期为拉布拉多犬的选育提供有效的遗传学诊断方法。方法经影像学诊断,筛选出典型的6只髋关节发育不良和11只正常拉布拉多犬作为实验对象,采取静脉血,提取血细胞的基因组DNA样本,采用PCR/测序方法对17个样本的5个基因中的6个SNP位点:LAMA2(CFA1:70997779),LRR1(CFA8:29247021),SCR(CFA24:28944481),COL6A3(CFA25:51031100,51040259)和FN1(CFA37:25095511)进行变异型检测,并统计分析SNP位点的变异型与髋关节发育不良犬关联度。结果 LAMA2(CFA1:70997779),LRR1(CFA8:29247021),SCR(CFA24:28944481),COL6A3(CFA25:51031100)和FN1(CFA37:25095511)SNP位点的变异型与拉布拉多犬的髋关节发育不良没有显著相关性(P>0.05)。COL6A3(CFA25:51040259)SNP位点的A/A型与拉布拉多犬的髋关节发育不良存在极显著相关性(P=0.007)。结论 COL6A3(CFA25:51040259)SNP位点的A/A型可能成为拉布拉多犬髋关节发育不良的实用性遗传学诊断指标,但尚需大样本确认。 赵明媛 韩芳 李雅婵 俞剑熊 张雅丽 周子娟 王福金 王爱国 王靖宇关键词:拉布拉多犬 遗传学诊断