王浩 作品数:47 被引量:89 H指数:6 供职机构: 宁夏医科大学基础医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 宁夏回族自治区自然科学基金 中央高校基本科研业务费专项资金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 轻工技术与工程 文化科学 更多>>
细粒棘球绦虫原头节抗原分子Eg-01883的克隆、表达及免疫原性分析 被引量:7 2016年 目的筛选细粒棘球蚴原头节抗原分子Eg-01883,并进行克隆、表达及免疫原性分析,为寻找棘球蚴病特异性诊断抗原提供依据。方法分析已发表的细粒棘球绦虫mRNA测序数据,筛选六钩蚴中不表达、原头节中高表达的抗原分子Eg-01883。提取细粒棘球蚴原头节总RNA,用RT-PCR对目的基因Eg-01883进行克隆,重组构建原核表达载体p ET28a-Eg-01883,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达并纯化目的重组蛋白r Eg-01883。ICR小鼠随机分为3组(每组12只),免疫组小鼠的背部皮下多点注射r Eg-01883,2周后加强免疫1次(剂量均为10μg,100μl/只);佐剂组注射福氏佐剂和PBS,空白对照组不作任何处理。分别于免疫前,首次免疫后1、2、4周每组小鼠尾静脉采血,免疫后6周进行去眼球采血。用ELISA检测3组小鼠免疫后不同时间点的血清特异性Ig G抗体水平,及细胞因子白介素4(IL-4)和γ干扰素(IFN-γ)水平。蛋白质印迹(Western blotting)分析重组蛋白r Eg-01883的免疫原性。结果筛选出在细粒棘球蚴原头节中高表达的抗原分子Eg-01883,克隆、表达和纯化后获得重组蛋白r Eg-01883,该蛋白主要以包涵体形式存在。ELISA检测结果显示,用纯化后的重组蛋白r Eg-01883免疫小鼠,可诱导产生特异性Ig G抗体,免疫组小鼠的血清Ig G抗体水平自首次免疫后1周开始上升,6周时达到最高水平(2.344±0.153),显著高于佐剂组(0.206 1±0.006)和空白对照组(0.241±0.01)(P<0.01)。首次免疫后6周,血清中的细胞因子IFN-γ和IL-4水平,免疫组分别为43.23 pg/ml和24.88 pg/ml,均显著高于佐剂组(21.77 pg/ml,13.27 pg/ml)和空白对照组(17.40 pg/ml,12.25 pg/ml)(P<0.05)。Western blotting分析结果显示,该重组蛋白r Eg-01883抗原可被His-Tag标签抗体、免疫组小鼠血清、原头节继发感染的小鼠血清识别。结论筛选获得细粒棘球绦虫原头节中高表达的抗原分子Eg-01883,克隆、表达、纯化后的重组蛋白r Eg- 赵殷奇 李子华 王浩 朱明星 牛楠 王娅娜 赵嘉庆 李娜 佟雪琪 宋佳卉 赵巍关键词:细粒棘球绦虫 原头节 免疫原性 一种新型黑色素瘤治疗性疫苗(DNA-蛋白质复合纳米颗粒疫苗)免疫治疗作用与机制研究 目的 如何打破癌症免疫耐受是癌症治疗性疫苗的关键所在,单独DNA疫苗或肿瘤抗原疫苗都只能引起有限的抗肿瘤作用,本研究试图将DNA与蛋白质静电耦合为新型疫苗,建立新型的递送系统,产生更有效的抗肿瘤作用.方法 本研究制备C5... 王浩 张晓霞 韩梅 于继云亚麻木酚素对多囊卵巢综合征大鼠髓源抑制细胞及炎症因子的影响 2023年 目的探讨亚麻木酚素(SDG)对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠髓源抑制性细胞(MDSCs)及血浆炎症因子的调节作用。方法32只6周龄雌性SD大鼠随机分为4组。采用来曲唑造模法建立PCOS大鼠模型,每日监测动情周期变化。造模成功后阴性对照组和模型组灌胃生理盐水,SDG对照组和SDG干预模型组灌胃等量SDG溶液。干预8周后,采用流式细胞术检测大鼠外周血、脾脏、肝脏和骨髓中MDSCs比例;ELISA检测血浆中肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素(IL-6)、IL-10的水平;Pearson统计分析MDSCs与炎症因子的相关性。结果与模型组相比,SDG干预模型组脾脏、肝脏和骨髓中MDSCs的比例显著增加,外周血MDSCs比例有增加趋势但无统计学意义;血浆中TNF-α水平显著降低(P<0.01),IL-10显著升高(P<0.05),IL-6水平有所降低,但差异无统计学意义。相关性分析发现,MDSCs与TNF-α、IL-6呈负相关,与IL-10呈正相关。结论SDG通过代偿性增加PCOS大鼠脾脏、肝脏和骨髓的MDSCs以及抑制炎症改善PCOS。 柳媛媛 汪婷 李一唯 郭米雪 马平 海清 李鋆钰 张凤 杨佳潇 张晓霞 王浩关键词:多囊卵巢综合征 炎症因子 富含亚麻酸的膳食亚麻籽油对2型糖尿病大鼠外周血和脾脏髓源抑制细胞及炎症因子的影响 被引量:6 2020年 目的:探讨富含亚麻酸的膳食亚麻籽油(FO)对2型糖尿病(T2DM)大鼠髓源抑制细胞(MDSCs)比例变化及其与血浆炎症因子的相关关系。方法:SD大鼠随机分为正常组(NC)、糖尿病组(T2DM)、亚麻籽油干预对照组(NC+FO)和亚麻籽油干预组(T2DM+FO)。NC+FO组和T2DM+FO组每天摄取亚麻籽油饮食(10%w/w),NC组和T2DM组给予10%玉米油饲料喂养。干预5周后,流式细胞术检测外周血和脾脏MDSCs含量;ELISA检测各组血浆中IL-1β、TNF-α和IL-10水平,Pearson分析两者相关性。结果:与T2DM组相比,T2DM+FO组大鼠外周血和脾脏中MDSCs含量显著增加(P均<0.05),血浆IL-1β和TNF-α表达水平降低(P均<0.05),IL-10升高但差异无统计学意义(P>0.05)。分析外周血和脾脏细胞中MDSCs含量与炎症因子相关性,发现MDSCs与IL-1β和TNF-α呈负相关。结论:FO可募集血浆和脾脏中MDSCs,降低血浆中IL-1β、TNF-α含量,进而发挥抗炎作用,延缓T2DM的进展。 朱丽丽 张晓霞 王振 薛静 汪婷 王浩关键词:2型糖尿病 亚麻籽油 炎症因子 肱二头肌长头腱毗邻结构对其损伤影响的研究进展 2022年 随着人们对锻炼的愈发重视以及对运动的需求不断提高,运动系统疾病越来越多,肱二头肌长头腱(long head of the biceps tendon,LHBT)损伤是非常常见的运动系统疾病,其症状主要表现为肘部屈曲力量的下降、压痛及运动相关的活动痛。LHBT损伤大致可分为上盂唇前后(superior labrum anterior and posterior,SLAP)损伤、肌腱炎、脱位/半脱位、部分撕裂/断裂。 杨超健 马超 解桐 张凯 王浩 马军关键词:肱二头肌 维生素D缺乏患者血清25羟维生素D水平与M-MDSCs、TNF-α、IL-10的差异性分析 2024年 目的 探讨维生素D缺乏患者血清25羟维生素D[25(OH)D]水平与单核细胞型髓源抑制性细胞(M-MDSCs)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-10(IL-10)的相关性。方法 选取2022年6—9月于银川市第一人民医院就诊的维生素D缺乏症患者24例(维生素D缺乏组)和同期健康体检者24例(正常对照组),收集基础临床指标,采集外周抗凝血,分离外周血浆和血细胞后,提取外周血单个核细胞(PBMCs),采用流式细胞术分析CD45+白细胞和CD45^(+)CD15^(-)CD11b^(+)HLA^(-)DR^(-)CD14^(+)M-MDSCs,采用ELISA法检测外周血清TNF-α、IL-10水平,采用Pearson相关分析探讨血清25(OH)D与M-MDSCs、TNF-α及IL-10的相关性。结果 与正常对照组相比,维生素D缺乏组患者外周血白细胞增加、M-MDSCs增高(P均<0.05),血浆中TNF-α水平升高、IL-10降低(P均<0.05)。相关性分析结果显示,25(OH)D与CD45+白细胞、M-MDSCs和TNF-α呈负相关,与IL-10呈正相关(P均<0.05)。结论 维生素D缺乏患者25(OH)D水平降低后可促进炎症发生,并与M-MDSCs密切相关。 刘力源 刘力源 申文科 王雷 马钧柏 王浩关键词:维生素D缺乏 25羟维生素D 肿瘤坏死因子-Α 白细胞介素-10 泛酸激酶及其抑制剂的研究进展 被引量:2 2014年 辅酶A的生物合成对于病原微生物的生存及致病性至关重要,而作为辅酶A生物合成途径的限速酶——泛酸激酶控制着辅酶A生物合成的起始步骤,且其普遍存在于病原体,并与人体中的同源蛋白相似度极低,故引起人们广泛兴趣,成为潜在的新型抗菌靶标研究的热点,其小分子抑制剂有望开发成为具高选择性、低毒副作用的抗菌药。综述泛酸激酶的分类、特性、晶体结构特征及其调控和成为潜在抗菌药物靶标的可行性,并概述具不同结构类型和抗病原微生物活性的在研泛酸激酶抑制剂。 杨延辉 赵建新 王浩 摆茹 韩梅关键词:辅酶A 抑制剂 细粒棘球绦虫原头节抗原分子Eg-08002的克隆、表达及免疫反应性分析 被引量:2 2017年 目的筛选细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus,Eg)原头节抗原分子,并进行克隆、表达及免疫反应性分析。方法在对细粒棘球绦虫六钩蚴和原头节阶段表达的转录组测序数据进行差异分析的基础上,筛选出原头节阶段特异性表达的抗原分子。PCR扩增后克隆至p ET28a载体,构建原核表达载体pET28a-Eg-08002,转化至大肠埃希菌(Escherichia coli)JM109,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,抗His标签镍亲和层析柱纯化重组蛋白rEg-08002,快速免染聚丙烯酰胺电泳分析表达产物;蛋白质印迹(Western blotting)分析rEg-08002的免疫反应性。ELISA分析重组蛋白rEg-08002与细粒棘球蚴病患者血清和健康人血清的免疫反应性。结果筛选出了原头节中高表达的抗原分子Eg-08002,大小为612 bp,构建原核表达载体pET28a-Eg-08002。快速免染聚丙烯酰胺电泳和Western blotting分析结果显示重组蛋白rEg-08002在E.coli JM109中获得高效表达,在相对分子质量(Mr)约为23 000处可见重组蛋白rEg-08002条带,主要以包涵体形式存在,r Eg-08002可被感染棘球蚴的小鼠血清识别。ELISA分析结果表明,12份细粒棘球蚴病患者血清和12份健康人血清的平均吸光度(A450)值分别为1.245±0.265和0.469±0.006,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论筛选出了原头节中高表达的抗原分子Eg-08002,获得的重组蛋白rEg-08002具有较好的免疫反应性。 杨慧 赵殷奇 李子华 赵嘉庆 王浩 王娅娜 朱明星 赵巍关键词:细粒棘球蚴 克隆 免疫反应性 IMB-NY类化合物在制备抗结核分枝杆菌药物中的应用 本发明公开了一种IMB‑NY类化合物在制备抗结核分枝杆菌药物中的应用,所述IMB‑NY类化合物包括IMB‑NY1和IMB‑NY2,本发明还公开了一种含有MTB IspD抑制剂的先导化合物的筛选方法以及一种用于MTB Is... 杨延辉 肖春玲 刘河涛 刘忆霜 蒙建州 鲁众阳 田静 杨志伟 杨玉荣 王浩 王大军 摆茹 梁锦屏十二指肠乳头旁憩室与胆胰疾病的关系 被引量:4 2014年 目的探讨十二指肠乳头旁憩室(PAD)与胆胰疾病的关系。方法收集行内镜逆行胰胆管造影(ERCP)检查患者884例,分为PAD组(185例)和非PAD组(699例),对比分析PAD与胆胰疾病的关系。结果PAD患病率为20.93%(185/884),不同年龄组PAD患病率差异有统计学意义(P=0.000)。PAD患者合并胆道结石、胆囊结石合并胆总管结石、原发性胆总管结石、胆囊切除术后胆总管结石、胆总管探查术后复发性胆总管结石、ERCP术后复发性胆总管结石以及急性胰腺炎患病率高于非PAD患者(P<0.05)。憩室直径、位置不同,PAD合并胆道结石患病率亦不同(P<0.05)。结论 PAD发生与年龄相关,可能是胆道结石及胰腺炎发生的因素之一。 黎明 王浩 王佐正 王琦关键词:十二指肠乳头旁憩室 胆道结石 胆总管结石