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王林美: 作品数：74 被引量：246H指数：9; 供职机构：辽宁省农业科学院更多>>; 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目国家自然科学基金大连市科技计划项目更多>>; 相关领域：农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>

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荧光定量实时PCR方法分析柞蚕核型多角体病毒对不同昆虫细胞的感染性: 柞蚕核型多角体病毒(ApMNPV)通常只感染柞蚕、樗蚕等少数昆虫及所属细胞,具有较高的宿主专一性。我们曾发现ApNPVΔph/egfp~+在感染不同昆虫细胞后,绿色荧光蛋白有不同程度表达。为进一步了解ApNPVΔph/e...; 赵振军王林美岳冬梅叶博张波范琦; 关键词：柞蚕核型多角体病毒昆虫细胞; 文献传递

柞蚕核型多角体病毒对Tn-Hi5细胞的感染性及抗细胞凋亡分析被引量：1: 2015年; 细胞凋亡是昆虫宿主细胞抗病毒感染及控制病毒复制增殖的一个复杂的分子生物学机制。前期研究发现柞蚕核型多角体病毒(Ap NPV)的重组病毒Ap NPV-Δph/egfp+能够感染非特异性宿主细胞Tn-Hi5,并表达EGFP蛋白。利用实时荧光定量PCR方法进一步检测分析Ap NPV-Δph/egfp+在Tn-Hi5细胞中的复制增殖特点以及子代病毒的感染性;通过检测细胞凋亡信号通路中类caspase-3蛋白酶活性,分析Ap NPV-Δph/egfp+感染Tn-Hi5细胞后对抗细胞凋亡的作用途径。结果显示,随着病毒感染时间的延长,Ap NPV-Δph/egfp+在Tn-Hi5细胞中的DNA拷贝数增加,被感染的Tn-Hi5细胞能够产生子代病毒,但病毒DNA拷贝数逐代减少;Ap NPV-Δph/egfp+感染Tn-Hi5细胞后可抑制放线菌素D诱导的细胞类caspase-3蛋白酶活性。研究结果证实Ap NPV能够在Tn-Hi5细胞中复制增殖,并具有抑制由放线菌素D诱导的细胞凋亡的作用。; 赵振军王林美叶博岳冬梅张波李树英都兴范范琦; 关键词：柞蚕核型多角体病毒细胞凋亡

大豆低聚糖对人胃癌细胞株BGC-823细胞的细胞凋亡和细胞周期的影响被引量：5: 2010年; 目的通过观察大豆低聚糖对胃癌癌细胞株BGC-823细胞的细胞周期和细胞凋亡的影响,探索乳酸杆菌发酵滤液对胃癌细胞作用的可能机制。方法用光镜和流式细胞仪分析不同浓度大豆低聚糖对BGC-823细胞的凋亡诱导效果;用流式细胞仪分析不同浓度大豆低聚糖对BGC-823细胞细胞周期的影响。结果大豆低聚糖可以诱导BGC-823细胞的凋亡。形态学观察处理后的BGC-823细胞,可见细胞变形,细胞皱缩,体积变小,细胞间隙增大,细胞核固缩。流式细胞仪分析50 mg/ml和100 mg/ml大豆低聚糖作用48 h和72 h BGC-823细胞的凋亡比例,分别为6.76%和7.93%。50 mg/ml大豆低聚糖作用48 h,引起BGC-823细胞G1期阻滞,100 mg/ml大豆低聚糖作用48 h,引起BGC-823细胞出现S期阻滞。结论大豆低聚糖可诱导部分BGC-823细胞凋亡。大豆低聚糖对BGC-823细胞的生长抑制作用在低浓度时可能通过G1期阻滞实现,在高浓度时可能通过S期阻滞实现。; 文姝方芬樊江杰刘跃坚王林美李华军袁杰利凌宗欣李晓芳刘洋唐立; 关键词：大豆低聚糖胃癌细胞细胞周期细胞凋亡

柞蚕蛹卵巢原代细胞培养方法的研究: 研究柞蚕蛹卵巢原代细胞制作、培养。以卵巢组织为材料,采用机械分散法、胰酶消化法及螯合剂分散法,选取Grace、TC-100、MGM-448三种培养基体外培养2个月观察细胞生长变化。机械分散法对细胞无损伤;胰酶消化法有轻微...; 王林美范琦张波叶博赵振军李树英; 关键词：柞蚕卵巢原代培养; 文献传递

蛹虫草对人胃癌细胞BGC-823生长抑制与诱导凋亡作用研究被引量：6: 2009年; 目的研究蛹虫草水提物(the aqueous extract of Cordycep Militaris,AEoCM)对人胃癌细胞(BGC-823)生长抑制与凋亡诱导作用。方法采用不同浓度的AEoCM分别作用于胃癌BGC-823细胞,24、48和72 h后,应用倒置相差显微镜观察胃癌细胞的形态变化,四氮甲基唑蓝(MTT)测定细胞生长抑制效应,流式细胞仪(FCM)检测细胞周期变化及凋亡率,免疫组化方法测定NK-kBP65的表达。结果AEoCM能显著抑制BGC-823细胞增殖,且在一定的浓度范围内呈时间和浓度依赖性。形态学观察发现,细胞变暗、皱缩,形状不规则;FCM检测结果显示,G2期的细胞于作用72 h后分布显著增加,使细胞阻滞于G2期。0.5 g/L AEoCM在24、48和72 h凋亡率分别为4.655%、11.039%和19.368%,其凋亡程度与时间呈正相关,免疫组化方法测定NK-kBP65的表达下调。结论AEoCM能明显抑制BGC-823细胞的生长,诱导其细胞凋亡,其诱导细胞凋亡的机制可能与下调NK-kBP65的表达有关。; 王林美都兴范李学军李树英; 关键词：蛹虫草胃癌细胞凋亡 BP65

柞蚕核型多角体病毒对柞蚕蛹卵巢细胞感染性研究被引量：1: 2013年; 研究柞蚕核型多角体病毒(ApNPV)与宿主细胞相互作用及形态发生机制,以便更好地开发利用杆状病毒表达系统。体外培养柞蚕蛹卵巢原代细胞,ApNPV病毒悬液感染细胞,测定细胞感染率及半数组织培养感染剂量,应用倒置相差显微镜和电子显微镜观察ApNPV感染后细胞的形态学变化。结果显示,ApNPV感染柞蚕蛹卵巢细胞5 d,倒置相差显微镜下观察即可发现细胞胀大,细胞内有多角体病毒出现;感染7 d,细胞内多角体病毒数量增多,细胞感染率为40.2%,细胞上清液中无包涵体病毒(NOV)效价滴度为6.95×105TCID50/mL。电子显微镜下观察到受病毒感染的细胞早期表现为细胞核膨大,而后核内出现病毒发生基质和核衣壳,核衣壳获得套膜形成病毒束,发育为成熟的病毒粒子,众多病毒粒子同时封存在一个折光性强,具有蛋白质性质、直径在0.7-10μm的多角体中。得出结论,ApNPV对柞蚕蛹卵巢细胞高度敏感,其在柞蚕蛹卵巢细胞内复制为典型的杆状病毒非同步复制。; 王林美岳冬梅李树英范琦叶博赵振军张波; 关键词：柞蚕核型多角体病毒卵巢细胞

樗蚕组织细胞培养及对柞蚕NPV病毒的感染试验被引量：1: 1996年; 采用细胞原代培养的方法对樗蚕〔ＰｈｉｌｏｓａｎｉａｃｙｎｔｈｉａｗａｌｋｅｒＦｌｄｒ．（Ｓａｍｉａ）〕的血球细胞、卵巢细胞、精巢细胞进行了初代及初期传代培养，樗蚕的组织细胞对柞蚕ＮＰＶ病毒十分敏感。; 王林美刘淑珊; 关键词：樗蚕细胞培养核型多角体病毒

柞蚕蛹虫草水提物对人乳腺癌细胞MCF-7增殖和凋亡的影响被引量：8: 2014年; 研究柞蚕蛹虫草水提物(Aqueous extract from cordycep militaris of antheraea pernyi,AEoAPC)对人乳腺癌细胞MCF-7生长抑制与凋亡的作用。将不同浓度的AEoAPC分别作用于人乳腺癌细胞MCF-7 24、48、72 h后,应用倒置相差显微镜观察人乳腺癌细胞MCF-7的形态变化,噻唑蓝比色法测定细胞生长抑制效应,流式细胞术检测细胞周期变化及凋亡率。结果表明:AEoAPC能显著抑制人乳腺癌细胞MCF-7的增殖,且在一定的浓度范围内呈时间和浓度的依赖性;形态学观察发现,细胞形状不规则、变暗、皱缩;FCM检测结果显示,作用72 h后G0-G1期(DNA合成前期)的细胞分布有所增加,使细胞阻滞于G2期(DNA合成后期)和S期(DNA合成期);0.8 g/L AEoAPC在24、48、72 h凋亡率分别为8.65%、14.20%、26.30%,其凋亡程度与时间呈正相关。说明AEoAPC能明显抑制人乳腺癌细胞MCF-7的生长,诱导其细胞凋亡。; 岳冬梅王林美李树英; 关键词：柞蚕蛹虫草乳腺癌细胞细胞周期

高通量DNA快速提取方法及其在柞蚕微孢子虫分子诊断中的应用: 2019年; 针对柞蚕微孢子虫分子检测受限于繁琐的DNA提取而局限于实验室使用的瓶颈问题,以成本较低的碱裂解法结合磁珠抽提,建立了一种全程在96孔板上使用排枪操作的高通量DNA提取方法(HT提取),对比HT-冻融法和HT-SDS法2种裂解方法获得的DNA在常规PCR与荧光定量PCR(qPCR)中的检测下限,并进行微粒子病筛查的应用。结果表明,HT提取法与传统方法相比,无繁琐预处理,操作快速、通量高,污染低、抗干扰、提取DNA品质好,主要耗材能重复使用,可自动化,人力物力成本较低;HT-SDS法具有更稳定的裂解效果,获得的DNA用于常规PCR、qPCR检测下限可达45和0045个/μL;HT-冻融法在常规PCR与qPCR中的检测下限为45和045个/μL,而传统抽提方法的常规PCR检测下限仅为110个/μL。结合HT-SDS法和qPCR,对3 000个样品进行微粒子病筛查,结果显示,其检测灵敏度显著高于现行镜检技术,最高高出近11倍,且对低带毒品种优势尤为显著,有望实现在柞蚕种茧微粒子病检疫及柞蚕种质资源保护中的应用,促进柞蚕业发展。; 李佩佩李佩佩徐亮岳冬梅徐亮何龙米锐叶博王林美赵振军李树英米锐; 关键词：高通量 DNA提取柞蚕微孢子虫分子诊断高灵敏度

蛹虫草中虫草素的研究进展被引量：10: 2012年; 虫草素是虫草中特有的活性成分,具有广泛的生物活性和显著的药理作用。就近年来蛹虫草中虫草素的理化性质、合成、提取纯化方法及药理作用等方面的研究进展进行综述。; 都兴范李军王林美; 关键词：提取纯化药理作用

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