游扬
- 作品数：3 被引量：19H指数：2
- 供职机构：第三军医大学新桥医院更多>>
- 发文基金：重庆市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 腺苷酸活化蛋白激酶在重症急性胰腺炎大鼠肠黏膜屏障损伤机制中的作用被引量：7
- 2016年
- 目的探讨腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)在重症急性胰腺炎SD大鼠肠道紧密连接损伤中的作用。方法给予SD大鼠腹腔注射不同剂量的20%L-精氨酸溶液,分别制备大鼠重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)及轻症急性胰腺炎(mild acute pancreatitis,MAP)模型,通过检测血清淀粉酶水平、胰腺病理改变以证实胰腺炎模型构建成功。对SAP大鼠分别给予AMPK抑制剂Compound C和谷氨酰胺灌胃处理,小肠组织切片染色观察大鼠小肠组织损伤情况;FITC-Dextran通透实验检测肠道通透性;免疫组化和Western blot方法分别检测肠黏膜细胞αSNAP、AMPK和紧密连接蛋白occludin的表达情况。结果病理切片证实胰腺炎模型构建成功,并且抑制AMPK后明显降低重症急性胰腺炎的病理损伤;SAP大鼠肠黏膜损伤明显,而加入AMPK抑制剂Compound C或肠黏膜保护剂谷氨酰胺可明显抑制SAP大鼠肠黏膜损伤;SAP组建模48 h(410.25±7.80)的肠道通透性相对于对照组(0.51±0.61)显著增强(P<0.05),而加入AMPK抑制剂Compound C 48 h的Com组(372.95±9.33)或肠黏膜保护剂谷氨酰胺的Gln组(367.93±18.90)(P<0.05),可明显降低SAP大鼠肠道通透性;重症急性胰腺炎时,αSNAP表达下调(P<0.05),而AMPK表达明显增强(P<0.05),加入AMPK抑制剂可以明显上调occludin的表达(P<0.01),提示AMPK对occludin蛋白存在负性调控。结论 AMPK信号在大鼠重症急性胰腺炎肠黏膜损伤中过度活化,可通过负性调控occludin蛋白的表达导致肠黏膜损伤,从而促进肠黏膜通透性增强。
- 游扬杨歆常杏邓盛瑜李静杨仕明凌贤龙
- 关键词：重症急性胰腺炎腺苷酸活化蛋白激酶肠屏障OCCLUDIN
- 血清中lncRNA HOTAIR检测方法的建立及其在结肠癌诊断中的应用价值被引量：11
- 2016年
- 目的建立血清中长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)HOTAIR的检测方法及评价其在结肠癌诊断中的作用。方法收集结肠癌患者血清样本47例,正常志愿者血清样本40例,10对结肠癌及癌旁组织。采用TRIzol LS和TRIzol分离组织和血清中的RNA;采用qRT-PCR检测HOTAIR在组织及血清中的表达。结果结肠癌组织或结肠癌患者血清中HOTAIR的表达显著高于癌旁组织或正常志愿者(P<0.05,P<0.01),且TNMⅢ/Ⅳ期的结肠癌患者血清中HOTAIR的表达高于正常志愿者(P<0.05),Ⅲ/Ⅳ期显著高于Ⅰ/Ⅱ期(P<0.01);淋巴结转移及非转移的结肠癌患者血清中HOTAIR的表达均显著高于正常志愿者(P<0.01),且淋巴结转移患者显著高于非转移患者(P<0.05);血清中HOTAIR的表达值诊断结肠癌的敏感性为65.96%,特异性为85.00%,曲线下面积为0.741 0;血清中HOTAIR的表达与CA199值呈显著正相关(P<0.01,R2=0.147 1)。结论成功建立血清中HOTAIR的检测方法,血清中HOTAIR的高表达可能作为诊断结肠癌的生物标志物。
- 杨歆黎伯胜胡长江邓西尹游扬常杏杨仕明凌贤龙
- 关键词：结肠癌血清生物标志物
- PNPase调控线粒体microRNA对线粒体DNA的保护作用被引量：1
- 2014年
- 目的探讨抑制PNPase表达对线粒体microRNA（MitomiRs）表达的影响以及对线粒体DNA的保护作用。方法以人肝癌细胞SK-Hepl、HepG2和人骨肉瘤细胞U2OS为研究对象，用带绿色荧光蛋白的（greenfluorescentprotein，GFP）PNPaseshRNA慢病毒转染细胞，采用Westernblot方法检测PNPase表达。分离细胞线粒体、提取线粒体RNA、microRNA芯片检测下调PNPase前后线粒体microRNA（MitomiRs）种类的变化；Q—PCR检测mtDNA损伤频率、ELISA方法检测线粒体8-羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）。结果激光共聚焦显微镜观察显示，SK—Hepl、HepG2和U20S细胞转染空载体病毒及PNPaseshRNA慢病毒转染后12～24h可见明显的绿色荧光。当MOI（转染复数）=20时，3种细胞的慢病毒转染效率达80％以上。连续观察2周，转染效率仍维持在70％～80％。Westernblot检测结果显示PNPaseshRNA组细胞PNPase蛋白表达低于正常对照组及阴性对照组。microRNA芯片显示：PNPaseshRNA后目的细胞MitomiRs表达谱发生明显变化，miR．30c-2—3p、miR-494、miR-1273g-3p、miR-4443表达上调，而miR-324—3p、miR-574—5p、miR-371b-5p、miR-6068、miR-21—5p表达下调。Q—PCR检测显示PNPaseshRNA组细胞mtDNA损伤频率减少。ELISA结果显示PNPaseshRNA组线粒体8-OHdG含量下降。结论抑制肿瘤细胞线粒体PNPase表达可导致MitomiRs表达谱发生变化，同时，肿瘤细胞mtDNA损伤减少，提示MitomiRs可能参与了mtDNA复制的调控。
- 李力力游扬周源凌贤龙
- 关键词：PNPASE线粒体
