汪钦
- 作品数：21 被引量：40H指数：4
- 供职机构：第四军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学更多>>
- 乙肝治疗耐药基因突变的焦磷酸测序技术诊断被引量：3
- 2011年
- 目的:建立焦磷酸测序技术检测拉米夫定和阿德福韦酯治疗乙肝所致乙肝病毒基因耐药突变的定量检测方法,为临床乙肝耐药诊断和治疗提供依据。方法:针对乙肝病毒DNA聚合酶基因序列上4个常见基因突变位点的6种突变形式,分别克隆构建野生型和突变型质粒作为标准品,应用生物信息学手段设计目标基因通用PCR引物和各突变点的焦磷酸测序引物,建立焦磷酸测序的突变检测方法。对接受拉米夫定、阿德福韦酯治疗的慢性乙型肝炎患者血清标本进行检测。结果:构建了乙肝病毒四种常见耐药性突变的标准株和变异株克隆,建立了分别或同时检测拉米夫定、阿德福韦酯耐药突变的焦磷酸测序方法,对68例临床耐药或疑似耐药的患者血清标本进行检测,双脱氧测序验证,检出拉米夫定耐药突变32例,阿德福韦酯耐药突变5例,其中焦磷酸测序检出20例为混合突变,而双脱氧测序显示为6例。结论:成功建立了焦磷酸测序定量检测拉米夫定、阿德福韦酯耐药基因突变的方法,构建了乙肝病毒耐药基因突变的标准质粒,为临床动态监测乙肝病毒变异病毒株、指导合理用药奠定了基础。
- 汪钦郭晏海李勇年刘永兰包晗赵锦荣梁平雷小英张菊颜真
- 关键词：乙肝耐药基因焦磷酸测序阿德福韦酯
- PIK3CA基因突变的MassARRAY分子量阵列分析
- 2011年
- 目的:利用MassARRAY分子量阵列分析系统检测胃癌组织PIK3CA基因突变。方法:从胃癌石蜡包埋组织中提取基因组,PCR反应扩增目的基因片段,MassARRAY分子量阵列分析系统检测PIK3CA基因突变;焦磷酸测序验证检测结果。结果:中国西部地区144例胃癌组织样本中PIK3CA_E542K(1624G>A)突变携带率为77.6%,PIK3CA_E545K(1633G>A)突变携带率为84%。MassARRAY分子量阵列分析系统检测结果与焦磷酸测序结果达到100%吻合。结论:建立了MassARRAY分子量阵列分析系统检测基因突变的方法,初步建立了中国西北地区汉族人群胃癌组织PIK3CA基因PIK3CA_E542K(1624G>A)和PIK3CA_E545K(1633G>A)位点突变频数。
- 梁平赵锦荣惠延平孙建斌王伟汪钦包晗刘永兰金天博郭晏海张菊颜真
- 关键词：胃癌基因基因分型基因突变
- NDRG2基因启动子甲基化与肺腺癌细胞中mRNA表达相关性的实验研究被引量：2
- 2010年
- 目的:探讨肺腺癌细胞中NDRG2基因启动子甲基化状态及其与基因表达的关系。方法:甲基化焦磷酸测序技术检测启动子区域甲基化状态,荧光定量PCR技术检测不同药物浓度下培养细胞中NDRG2基因mRNA的表达水平,分析启动子区域甲基化与基因表达之间的关系。结果:在体外培养细胞中检测到NDRG2基因启动子区域呈现不同程度的甲基化,甲基化频率分别为肺癌A549细胞71.8%、GLC-82细胞86.1%、人脐静脉内皮ECV-304细胞36.8%、胃上皮GES-1细胞42.9%。NDRG2基因mRNA表达与其启动子甲基化程度成反比,甲基转移酶抑制剂5-杂氮-2-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)作用于细胞后,A549和GLC-82细胞中NDRG2基因的mRNA转录明显上调,至72 h差异显著(P<0.05)。结论:肺腺癌细胞中NDRG2基因启动子CpG岛存在高甲基化,甲基化程度与该基因的表达具有负相关性,5-Aza-CdR能在一定程度上提高NDRG2的转录水平。
- 李慎梁平刘永兰黄启超汪钦包晗赵锦荣雷小英郭晏海颜真
- 关键词：NDRG2基因启动子甲基化焦磷酸测序5-杂氮-2-脱氧胞苷
- 肝癌细胞外泌体miRNA鉴定及hsa-miR-1246功能研究
- 目的：筛选肝癌细胞与正常肝细胞有显著差异表达的miRNA,预测其靶基因与干预信号通路,研究miRNA与肝癌发生发展等相关的功能,为肝癌的早期诊断以及治疗提供依据。方法：PEG富集肝癌细胞与正常肝细胞外泌体并予以鉴定,Il...
- 祝春来纪奇峰王伟汪钦颜真
- 关键词：肝癌外泌体MIRNA信号通路
- 毛细管微体系壁表偶联酶促化学发光特征初探及应用
- 为了解毛细管微体系内壁表偶联酶促化学发光规律并应用于核酸杂交检测,本研究将不同浓度的辣根过氧化物酶(HRP)和经过核酸杂交固定于毛细管内壁的HRP用于催化化学发光。结果如下:1.微体系的游离HRP化学发光线性检测范围窄(...
- 向安汪钦包晗颜真郭晏海
- 关键词：毛细管核酸杂交辣根过氧化酶化学发光
- PLCE1基因及rs2274223和rs3765524单体型的克隆与表达
- 目的：克隆人PLCE1基因，构建PLCE1 rs2274223和rs3765524 GT(PLCE1 Minor)和AC(PLCE1 Major)单体型真核表达重组载体，研究PLCE1基因多态性及单体型与基因表达的相关性...
- 李达代鹏王伟张文涛汪钦束毅祝春来纪奇峰颜真
- 关键词：单核苷酸多态性重叠延伸PCR基因克隆基因表达
- 文献传递
- 应用Logistic回归与多因子降维法分析胃癌易感基因多态性被引量：3
- 2014年
- 目的应用Logistic回归与多因子降维法(multifactor dimensionality reduction,MDR)分析胃癌易感基因多态性,为胃癌的早期诊断和预警奠定基础。方法采用病例-对照研究,以中国西北476例汉族胃癌患者为病例组,361名非肿瘤、非消化系统疾病个体为对照组;通过候选基因策略,应用MassARRAY质谱平台分析与代谢、炎症相关的18个基因的37个单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点;利用Logistic回归与MDR对基因分型结果进行分析。结果 Logistic回归分析显示,磷脂酶Cε1(phospholipase C epsilon 1,PLCE1)_rs3765524[OR=1.341,95%CI(1.003,1.792)]、还原型辅酶Ⅰ/Ⅱ醌氧化还原酶1[NAD(P)H:quinone oxidoreductase 1,NQO1]_rs1800566[OR=0.615,95%CI(0.418,0.903)]、X线修复交叉互补基因1(X ray repair cross complementing gene 1,XRCC1)_rs25487[OR=0.688,95%CI(0.490,0.967)]3个SNP位点的基因型分布与胃癌易感性显著相关(P<0.05);MDR分析显示,PSCA_rs10216533-XRCC1_rs25487[模型Ⅰ:OR=3.566,95%CI(2.614,4.863)]、MTHFR_rs1801131-PSCA_rs2976392-CYP17A1_rs6163-CYP19A1_rs4646-CYP19A1_rs1902586-MMP2_rs243865[模型Ⅱ:OR=7.257,95%CI(5.337,9.870)]、IL1B_rs16944-PSCA_rs10216533-CYP17A1_rs6163-NQO1_rs1800566-ENOSF1_rs2298581-XRCC1_rs25487[模型Ⅲ:OR=15.837,95%CI(11.252,22.289)]3个模型内部各位点之间具有显著交互作用(P<0.000 1)。结论 PLCE1、NQO1、XRCC1、PSCA、MTHFR、CYP17A1、CYP19A1、MMP2、IL1B、ENOSF1等基因多态性与我国西北地区汉族人群胃癌发病风险相关;在胃癌的早期诊断与预警中应联合Logistic回归和MDR等方法,兼顾单因素与多因素交互的影响进行综合分析。
- 张文涛梁平代鹏王伟华汪钦孙建斌王伟颜真
- 关键词：胃癌单核苷酸多态性LOGISTIC回归多因子降维法
- 药物基因组学与个体化医药专业人才教育探讨被引量：1
- 2015年
- 通过探讨药物基因组学与个体化药物研发、临床用药以及遗传信息咨询、基因检测与分析等的关系,阐明药物基因组学相关知识与技能培养在个体化医药人才教育中的重要意义。进而分析国内外现状与差距,总结教研室实践经验,强调加强药物基因组学教育对促进我国个体化医药发展与专业人才教育,深化我国医学教育改革的重要意义。
- 向安雷小英汪钦汪莉郭晏海卢兹凡
- 关键词：药物基因组学
- 本科生基因工程教学改革初探被引量：5
- 2012年
- 基因工程是高等教育中生物技术专业的主干课程,其突出特点是技术性强。为了使学生易于理解和掌握该门课程,并具有较强的科研交流能力,在早期教学实践的基础上进行了部分教学改革,通过调整理论课和实验课设置,增设基础综合实验及双语教学,突出案例和基于问题的教学等,提高了教学效果。
- 雷小英向安刘永兰汪钦梁平赵锦荣郭晏海张菊颜真
- 关键词：基因工程教学改革教学方法
- 一种简易SNP检测方法的建立被引量：2
- 2011年
- 目的:建立一种快速、简单的SNP(Single Nucleotide Polymorphisms)检测方法。方法:设计带生物素标记的扩增引物对检测用具有单碱基差异的野生型和突变型靶序列分别进行扩增,然后通过紫外交联的方式将相应检测靶序列的探针固定在硝酸纤维素膜上,借助Taq酶完成膜上单引物延伸,从而对探针捕获的靶序列进行延伸固定在膜上,最后使用生物素-亲和素酶联显色(ABS-ELISA)反应肉眼观察结果。结果:阳性和阴性对照探针显示正常。野生型探针和突变型探针能够分别特异性结合靶序列,并通过生物素和亲和素显色系统放大为一种肉眼可判断结果的检测形式。结论:建立了一种基于硝酸纤维素膜载体上进行核酸扩增的SNP检测方法。
- 包晗赵锦荣汪钦郭晏海刘永兰雷小英梁平孙建斌颜真
- 关键词：硝酸纤维素膜核酸扩增SNP生物素
