汤永辉
- 作品数：13 被引量：9H指数：2
- 供职机构：东南大学附属中大医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金江苏省卫生厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- BRAF V600E对人胰腺癌细胞株Panc-1生物学行为的影响
- 目的通过构建BRAF V600E真核细胞表达载体并转染人胰腺癌细胞系Panc-1,探讨BRAF V600E对人胰腺癌细胞系Panc-1生物学行为的影响,为研究胰腺癌的发病机制与治疗提供理论依据。
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- 汤永辉
- 关键词：生物学行为噻唑蓝
- 文献传递
- 胰腺癌相关基因寡核苷酸芯片的制备和应用
- ＜正＞目的研究胰腺癌相关基因寡核苷酸芯片的构建及其在检测胰腺癌基因表达谱方面的应用。方法有目的地筛选胰腺癌相关基因,采用合成后点样的方法将合成的寡核苷酸探针点于同型双功能偶联剂（APS-PDC）包被的基片上,制成寡核苷酸...
- 石欣卫文俊高乃荣程张军汤永辉
- 关键词：胰腺癌基因寡核苷酸芯片基因表达谱分析
- 文献传递
- 胰腺癌组织中C-erbB-2、P53及PCNA的表达及临床意义被引量：1
- 2005年
- 目的:研究胰腺癌中C-erbB-2、P53和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达及其与临床病理学特征的关系,为胰腺癌的诊断及治疗提供理论依据。方法:39例胰腺癌组织取自手术标本,并经病理证实。应用免疫组织化学法检测C-erbB-2、P53及PCNA的表达。结果:胰腺癌组织中C-erbB-2、P53的阳性表达率分别为51.3%和59.0%,PCNA低、高增殖活性表达率分别为41.0%和59.0%。C-erbB-2阳性表达率与淋巴结转移、局部浸润、分化程度及临床分期等均显著相关(均为P<0.05)。P53表达率与临床分期、组织分化程度显著相关(均为P<0.05),而与淋巴结转移及局部浸润无关(均为P>0.05)。伴有淋巴结转移的癌组织中PCNA高增殖活性表达率明显增高(P<0.05),在低分化与高中分化胰腺癌组织中PCNA增殖指数具有明显差异(P<0.05)。C-erbB-2阳性率与肿瘤增殖活性相关(r=0.543,P<0.01),而与P53的表达无关。结论:C-erbB-2、P53及PCNA与胰腺癌发生、发展关系密切,是反映胰腺癌生物学行为的重要指标。
- 卫文俊石欣高乃荣杨林程张军汤永辉
- 关键词：胰腺癌P53增殖细胞核抗原
- 胰腺癌组织中CDC25B表达及临床意义的初步探讨
- 2007年
- 目的研究CDC25B基因在胰腺癌组织中的表达,探讨其在胰腺癌发病机制中的作用。方法利用实时荧光定量-PCR技术检测24例胰腺癌组织和4例正常胰腺组织中CDC25B基因的表达,PCR产物的定量方法采用比较Ct法,应用western blot检测其蛋白的表达水平。用Kaplan-Meier生存率曲线分析CDC25BmRNA与预后的关系。结果实时荧光定量-PCR发现CDC25B基因平均模板量在正常胰腺组织中为0.000635±0.000210,胰腺癌组织中为0.001988±0.000650;与正常胰腺组织相比,胰腺癌组织中CDC25B mRNA表达上调3.13倍(P<0.05),CDC25B mRNA升高5倍以上者生存时间缩短。胰腺癌组织中CDC25B蛋白也过度表达,正常胰腺组织CDC25B蛋白表达为1.22±0.33,胰腺癌组织为5.56±1.57,上调4.56倍(P<0.01)。结论CDC25B在胰腺癌组织中表达明显上调,CDC25B mRNA升高者预后差。
- 石欣卫文俊高乃荣程张军汤永辉
- 关键词：胰腺肿瘤
- CDC25B基因在胰腺癌组织中的表达被引量：3
- 2006年
- 近年来发现CDC25B基因是一种潜在的癌基因，在许多肿瘤的发生和发展中起到重要作用，但在胰腺癌中的表达和作用机制尚不明确。本研究旨在检测胰腺癌和正常胰腺组织中CDC25B基因的表达情况，探讨CDC25B基因在胰腺癌发病机制中的作用。
- 石欣卫文俊高乃荣程张军汤永辉
- 关键词：胰腺癌组织正常胰腺组织发病机制癌基因
- 胰腺癌组织中BRAF表达的初步研究
- ＜正＞目的了解 BRAF 基因在正常胰腺和胰腺癌组织中的表达水平。方法 6例胰腺癌标本取自胰腺癌手术,男性3例,女性3例;3例正常胰腺组织取自外伤性胰腺损伤需切除部分胰腺者,男性2例,女性1例。用 Trizol 法抽提每...
- 石欣程张军卫文俊汤永辉高乃荣
- 关键词：胰腺癌
- 文献传递
- 人BRAF野生型及V600E突变型真核表达载体的构建及表达
- 2008年
- 目的:构建BRAF野生型和V600E突变型真核表达载体;转染并筛选稳定表达BRAF的胰腺癌细胞株,为探讨BRAF V600E突变在胰腺癌发生发展中的作用提供合适的细胞模型.方法:将BRAF野生型及V600E突变型cDNA克隆于真核表达载体pCMV-Myc中,构建pCMV-Myc-BRAFW及pCMV-Myc-BRAF V600E重组质粒,酶切鉴定、测序证实序列正确后,利用脂质体将重组质粒转染胰腺癌细胞Panc-1,经G418培养筛选获得抗性细胞克隆,用RT-PCR和Western blot鉴定野生型和V600E突变型BRAF基因在Panc-1细胞中的表达.结果:酶切鉴定和序列分析证实,重组克隆pCMV-Myc-BRAFW和pCMV-Myc-BRAF V600E序列正确,RT-PCR和Western blot结果显示G418筛选获得的转基因Panc-1细胞稳定表达BRAF和BRAF V600E.结论:成功构建了pCMV-Myc-BRAFW和pCMV-Myc-BR AFV600E真核表达载体,建立了稳定表达BRAF和BRAF V600E的胰腺癌细胞株.
- 程张军石欣汤永辉高乃荣
- 关键词：BRAF逆转录聚合酶链式反应WESTERNBLOT真核表达
- 胰腺癌相关基因研究进展被引量：1
- 2006年
- 汤永辉高乃荣石欣
- 关键词：基因研究进展胰腺癌以手术为主姑息性手术新发病例
- CDC25B基因在肝细胞肝癌的表达被引量：1
- 2007年
- 目的探讨CDC25B基因在肝细胞肝癌（HCC）组织中的表达，以探讨其在HCC发生和发展中的作用。方法联合应用激光显微切割和实时定量PCR技术检测24例正常肝脏组织和24例HCC组织中CDC25B基因的表达，PCR产物的定量方法采用比较Ct法；应用Western blot检测其蛋白的表达水平；应用免疫组织化学方法检测增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen，PC—NA）的表达。结果在显微镜下用激光显微切割机，将单个肝细胞成功切下，提取RNA后，逆转录成cDNA，实时定量PCR发现CDC25B基因平均模板量在正常肝脏组织中为0．0006350±0．00021，HCC组织中为0．001988±0．00065，上调约3倍（P〈0．01）。CDC25B mRNA的表达与PCNA明显相关（r=0．45，P〈0．05）。HCC组织中CDC25B蛋白也过度表达，正常肝脏组织CDC25B蛋白表达为1．02±0．43，HCC组织为6．01±1．66，上调约6倍（P〈0．01）。结论CDC25B在HCC组织中表达明显上调，该基因的高表达与细胞周期调节机制的关系以及在HCC细胞的恶性转化中的作用还有待进一步探讨。
- 石欣高乃荣卫文俊程张军汤永辉
- 关键词：激光显微切割实时定量PCR
- 胰腺癌相关基因寡核苷酸芯片的制备和初步应用被引量：1
- 2007年
- 目的探讨胰腺癌相关基因寡核苷酸芯片的构建,初步验证其在检测胰腺癌基因表达谱方面的应用。方法有目的地筛选胰腺癌相关基因,采用合成后点样的方法,制成寡核苷酸基因芯片。TRIzol 法抽提组织总 RNA,在 cDNA 第一链合成过程中,通过反转录酶将 CyDye 标记核苷酸直接掺入到 cDNA 中制备荧光探针,其中用 Cy3-dCTP 标记胰腺癌组织,Cy5-dCTP 标记正常胰腺组织。将荧光标记探针与芯片杂交16～18 h。用 Agilent 扫描仪进行扫描,Imagene3.0软件进行图像分析,计算两种荧光 Cy3与 Cy5信号强度的比值。挑选差异基因 CDC25B 和 TUSC3进行荧光定量 PCR(sybrgreen 方法)验证,PCR 产物的定量方法采用比较 Ct 法。结果芯片杂交扫描图像信号清晰,具有较低的整体背景和较高的信噪比,各阳性质控点信号均匀一致,阴性质控点和空白点信号低。与正常组织相比,胰腺癌组织中差异表达基因24条,占全部基因的25.5%,其中上调基因17条(18.1%),下调基因7条(7.4%)。荧光定量 PCR 验证,CDC25B 和 TUSC3基因在胰腺癌中的表达趋势与芯片实验的结果一致。结论本研究制备的胰腺癌相关基因芯片可同时、并行检测多种胰腺癌相关基因的表达改变,具有一定的特异性和敏感性。胰腺癌组织与正常胰腺组织相比,基因表达谱具有明显差异。
- 石欣卫文俊高乃荣程张军汤永辉
- 关键词：胰腺肿瘤基因寡核苷酸芯片基因表达
