武向梅
- 作品数：22 被引量：71H指数：6
- 供职机构：重庆医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：重庆市自然科学基金国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 沉默Bmi-1表达可促进MCF-7乳腺癌细胞凋亡并抑制其侵袭被引量：7
- 2016年
- 目的探讨B细胞特异的Moloney鼠白血病病毒插入位点1(Bmi-1)基因沉默对细胞增殖与侵袭的影响及可能的分子机制。方法收集经病理确诊的乳腺癌及癌旁组织,采用实时荧光定量PCR检测Bmi-1的表达差异;采用LipofectamineRNAi MAX转染试剂将靶向Bmi-1基因的小干扰RNA(siRNA)转染MCF-7细胞,流式细胞术检测Bmi-1沉默后细胞周期和凋亡的改变,Western blot法检测凋亡相关基因P21、Bax、Bcl-2的表达变化。TranswellTM侵袭实验检测MCF-7细胞侵袭力变化,Western blot法检测上皮钙黏素(E-cadherin),神经钙黏素(N-cadherin)、波形蛋白(vimentin)的表达水平。结果乳腺癌组织Bmi-1 mRNA表达量高于癌旁组织,沉默Bmi-1基因可使MCF-7细胞周期阻滞于G1期,凋亡细胞增多;与空白对照组、阴性对照siRNA转染组相比,Bmi-1-siRNA组中P21与Bax的表达水平明显上调,Bcl-2明显下调。沉默Bmi-1基因表达可抑制MCF-7细胞的侵袭力,与对照组相比,下调Bmi-1可增强E-cadherin的表达,减少N-cadherin、vimentin的表达。结论下调Bmi-1的表达可引起MCF-7细胞G1期阻滞,促进细胞凋亡,与P21表达上调,Bax/Bcl-2比率升高有关;下调Bmi-1水平可抑制MCF-7细胞侵袭性,与抑制肿瘤细胞上皮间质转化有关。
- 邓小园武向梅翁华莉宋方洲
- 关键词：BMI-1乳腺癌细胞凋亡细胞侵袭
- 沉默Bmi-1基因表达稳定细胞株的建立及其生物学特性的研究被引量：5
- 2012年
- B细胞特异性莫洛尼鼠白血病病毒插入位点1(B-cell-specific moloney murine leukemia virus insertionsite 1,Bmi-1)基因是多梳基因家族成员,参与细胞增殖调控.研究发现Bmi-1基因可能参与肿瘤的形成,可能成为肿瘤潜在的治疗靶点.用RNA干扰(RNA interference,RNAi)沉默Bmi-1基因表达观察其对乳腺癌细胞株MCF-7侵袭和转移等生物学特性的影响,以探讨Bmi-1在乳腺癌发生发展中的作用.PT67细胞包装质粒后产生的逆转录病毒感染MCF-7细胞,嘌呤霉素筛选建立稳定细胞株,稳定抑制Bmi-1的细胞株命名为MCF-7/Bmi-1si.通过RT-PCR和Western blot分别从mRNA和蛋白水平检测Bmi-1的表达量;平板克隆形成实验检测细胞克隆形成能力;Transwell侵袭小室模型检测细胞体外侵袭和转移能力.MCF-7/Bmi-1si组与MCF-7和MCF-7/GFPsi组相比,Bmi-1 mRNA和蛋白表达量明显减少,克隆形成数及形成率也明显减少(P<0.05).侵袭和转移实验表明:与MCF-7和MCF-7/GFPsi组相比,MCF-7/Bmi-1si组细胞在Transwell侵袭小室中24 h穿膜细胞数明显减少(P<0.05).结果表明沉默Bmi-1基因表达稳定细胞株构建成功,Bmi-1基因表达的沉默能显著降低MCF-7细胞的体外增殖及侵袭转移能力.
- 武向梅余华荣卜友泉易发平汪长东刘革力苟小燕邓小园宋方洲
- 关键词：BMI-1基因乳腺癌RNA干扰MCF-7细胞
- 利用球孢链霉菌发酵液消化双歧杆菌细胞壁提取质粒的研究被引量：2
- 2008年
- 目的寻找一种经济适用的提取双歧杆菌质粒的方法。方法利用球孢链霉菌发酵产生的变溶菌素来消化双歧杆菌细胞壁,提取质粒,并与商业化溶菌酶法比较。结果球孢链霉菌发酵液与溶菌酶均成功提取到质粒。结论利用球孢链霉菌发酵液提取质粒经济简便。
- 罗耀玲黄雪萍武向梅丁嵩涛马永平宋方洲
- 关键词：双歧杆菌质粒
- 泌尿生殖系统整合课程改革的实践及课程整合的思考被引量：2
- 2021年
- 本研究主要从教学内容、教学方法和评价体系三方面介绍重庆医科大学开展的泌尿生殖系统整合课程改革。在教学内容上将基础学科和临床学科中涉及泌尿生殖系统的部分提取出来加以整合。在教学实施环节跨科室组建教学团队,实行多学科联组教学。为了调动学生的学习热情,启发和培养学生的科研思维而改进教学方法,如运用病例引入式教学法、问题讨论及辩论会等多种教学形式。采用科学的评价体系对学生学习全过程持续观察、记录。本文也提出了改革中存在的一些问题并提出解决方案,以资相关院校同行探讨和借鉴。
- 武向梅余华荣涂柳乔娟刘星
- 关键词：泌尿生殖系统整合课程生理
- 干扰Bmi-1表达对宫颈癌Hela细胞TGF-β/Smads通路基因表达的影响
- 2013年
- [目的]干扰Bmi-1对siRNA转染宫颈癌细胞系Hela中TGF-β、Hey1、Hes1、Bmp7、Smad3、Casp3和Casp6基因的表达影响,为寻找宫颈癌中Bmi-1的靶基因奠定基础。[方法]将Bmi-1 siRNA转染Hela细胞,实时荧光定量RT-PCR方法检测转染前后Hela细胞中TGF-β、Hey1、Hes1、Bmp7、Smad3、Casp3和Casp6基因的表达变化,对有明显变化的基因用WesternBlot在蛋白水平进一步验证。[结果]Hela细胞中Bmi-1基因RNA干扰后,TGF-β表达上调,Smad3、Casp3和Casp6基因表达下调。[结论]沉默Bmi-1的表达可使宫颈癌细胞系Hela中TGF-β、Smad3、Casp3和Casp6的表达量均有不同程度的改变,Bmi-1基因在宫颈癌发生发展中可能与TGF-β/Smads信号通路有关。
- 邓小园武向梅刘革力翁华莉易发平卜友泉宋方洲
- 关键词：BMI-1基因宫颈癌RNA干扰
- 抑制葡萄糖转运蛋白1表达可降低神经母细胞瘤细胞的增殖、侵袭和迁移能力被引量：3
- 2018年
- 目的研究抑制神经母细胞瘤细胞中葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)的表达对肿瘤细胞增殖和侵袭迁移能力的影响。方法运用特异性的小分子抑制剂WZB117抑制神经母细胞瘤细胞中GLUT1的表达,实时定量PCR检测GLUT1 mRNA水平表达,Western blot法检测其蛋白水平表达,CCK-8法检测细胞增殖能力,TranswellTM侵袭、迁移实验分别检测细胞侵袭、迁移能力。结果 WZB117作用于细胞后,GLUT1 mRNA水平增高,蛋白水平降低;细胞增殖受到抑制,细胞侵袭和迁移能力降低。结论抑制神经母细胞瘤细胞中GLUT1的表达能减弱肿瘤细胞恶性生物学行为。
- 彭妍邢思宁唐瑚应刘星汪长东易发平刘革力武向梅
- 关键词：神经母细胞瘤葡萄糖转运蛋白1糖酵解迁移
- 支架式教学模式在生理学教学中的应用被引量：3
- 2013年
- 生理学具有系统性、联系性强,推理内容多的特点,是一门比较难学的医学基础课程。为帮助学生学好这门重要的课程,在教学过程中应积极探索有效的教学模式。回顾了支架式教学模式的起源和基本理念,具体分析了在生理学教学过程中支架式教学模式的应用,探讨其对生理学教学实践的指导,以期对生理学教学改革有所启发。
- 武向梅宋方洲
- 关键词：生理学支架式教学教学模式
- RNAi沉默Bmi-1基因表达对MCF-7细胞生物学特性及阿霉素敏感性影响的研究
- 乳腺癌是一种常见的严重危害妇女身心健康的恶性肿瘤。调查数据显示，全球每年有120万妇女罹患乳腺癌，且有50万死于该病。在西欧、北美等发达国家，乳腺癌的发病率占女性恶性肿瘤首位，而在中国，发病率更是逐年攀升，并有年轻化趋势...
- 武向梅
- 关键词：阿霉素敏感性
- 文献传递
- siRNA介导的Bmi-1基因沉默对乳腺癌细胞株MDA-MB-231侵袭迁移的影响被引量：4
- 2014年
- 目的:利用小干扰RNA技术沉默Bmi-1基因的表达,探讨其对人乳腺癌细胞株MDA-MB-231侵袭转移能力的影响。方法:设计并化学合成了针对Bmi-1的小干扰RNA,转染具有高转移性的MDA-MB-231细胞,利用qRT-PCR和Western blot分别检测Bmi-1基因mRNA和蛋白的表达水平。体外通过Transwell小室、Matrigel胶模型﹑流式细胞术,观察Bmi-1被沉默后对乳腺癌细胞株MDA-MB-231生物学行为的影响。结果:qRT-PCR和Western结果显示,Bmi-1-siRNA转染组Bmi-1基因表达水平被有效抑制。与对照组相比,Bmi-1-siRNA转染组的细胞侵袭转移能力明显下降,细胞周期发生明显变化,细胞的增殖受到明显抑制。结论:抑制Bmi-1基因的表达可明显抑制MDA-MB-231细胞的侵袭迁移能力。
- 李海玉武向梅陈兴凤李韵樊建军刘革力宋方洲
- 关键词：BMI-1RNA干扰迁移
- 沉默Bmi-1基因表达对MCF-7细胞阿霉素敏感性的影响被引量：1
- 2012年
- 目的研究Bmi-1对MCF-7细胞阿霉素敏感性的影响及机制。方法阿霉素处理MCF-7／Bmilsi、MCF-7／GFPsi和MCF一7细胞株，M1Tr法检测阿霉素的IC50；DAPI检测阿霉素处理后细胞的凋亡，计算凋亡指数（apoptosisindex，AI）；Western印迹检测相关蛋白P53，phospho—Akt（Ser473）（pAkt），totle—Akt（tAkt），Bcl-2，Bax的表达。结果阿霉素处理72h的MCF-7／Bmi．1si组生长抑制率明显高于MCF-7和MCF-7／GFPsi组，MCF-7／Bmilsi组的IC50为（0．15±0．02）μg／ml，而MCF-7组和MCF-7／GFPsi组的IC50分别为（0．87±0．06）μg/ml和（0．81±0．02）μg/ml（P〈0．05）。阿霉素处理48h后用DAPI检测凋亡发现，MCF-7／Bmi．lsi＋doxorubiein组可见大量凋亡细胞，而MCF-7＋doxorubicin和MCF-7／GFPsi＋doxo—rubicin组出现较少的凋亡细胞，MCF-7／Bmi-1si＋doxorubicin组凋亡指数明显高于对照组（P〈0．05）。进一步研究发现：MCF-7／Bmi．1si＋doxorubicin组与MCF-7＋doxorubiein及MCF-7／GFPsi＋doxorubiein组相比，P53表达量增加，tAkt表达未发生改变，而pAkt的表达明显减少，另外，Bcl-2表达量减少而Bax表达量增加，差异具有显著性（P〈0．05）。结论沉默Bmi—l基因表达能增加MCF-7细胞对阿霉素的敏感性，增加阿霉素引起的凋亡。
- 武向梅余华荣卜友泉易发平汪长东刘革力邓小园苟小燕宋方洲
- 关键词：BMI-1基因乳腺癌阿霉素
