- 宫颈癌HeLa细胞特异性结合肽的筛选及鉴定被引量：1
- 2012年
- 背景与目的:宫颈癌的分子靶向治疗具有很好的疗效,同时可以显著减少抗癌药物对人体自身的损伤,因此备受关注。本研究利用噬菌体体内展示技术筛选及鉴定宫颈癌特异性结合肽,将有可能成为化疗药物的靶向载体,为宫颈癌靶向药物治疗奠定基础。方法:体外培养宫颈癌HeLa细胞接种裸鼠,建立肿瘤动物模型。将随机肽库尾静脉注入裸鼠体内,循环15 min,心脏灌注后回收肿瘤组织噬菌体扩增、纯化并以此作为起始物进行第2轮的筛选,如此进行3轮体内筛选后挑取噬菌体克隆,进行免疫组化及ELISA实验,初步鉴定噬菌体克隆对宫颈癌细胞的亲和力及特异性,并将具有强亲和力的克隆进行测序。结果:ELISA结果显示,随机挑选10个噬菌体单克隆中8个克隆对HeLa细胞具有很强的亲和力,将这8个克隆进行测序,获得相同短肽序列LLRSTGF。结论:利用噬菌体展示技术筛选出与宫颈癌细胞HeLa特异性结合的短肽,进一步与化疗药物结合,为宫颈癌靶向治疗提供新的方法。
- 何晓娟郭彩霞杨陈梁晓秋
- 关键词：宫颈癌HELA细胞噬菌体随机肽库特异性结合肽
- OSTP增强紫杉醇诱导卵巢癌A2780细胞凋亡的作用被引量：2
- 2014年
- 目的研究卵巢癌特异性结合肽(OSTP)及联合紫杉醇对卵巢癌A2780细胞生长及凋亡的影响。方法体外培养卵巢癌A2780细胞,随机分为4组:溶剂对照组(1640和0.1%DMSO组)、OSTP组、紫杉醇组、OSTP联合紫杉醇组。采用四甲基偶氮唑盐(MTT法)检测OSTP对A2780细胞生长的影响;用Annexin-V-FITC和PI双染法标记A2780细胞,通过流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果 MTT法检测OSTP以不同浓度作用于卵巢癌A2780细胞时,可对该细胞的生长起到抑制作用,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。应用流式细胞技术检测细胞凋亡发现:不同浓度的OSTP(20、40、80、160、320μmol/L)对A2780细胞的凋亡率分别7.88%、8.348%、8.727%、9.393%和10.68%,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01),提示OSTP可诱导细胞凋亡。OSTP和紫杉醇联合应用,在不同的预处理组(加OSTP80μmol/L 0、3、6、12h)后再加紫杉醇10μmol/L作用48h,结果发现细胞凋亡率分别是39.40%、53.09%、48.18%和45.62%,均高于OSTP和紫杉醇单独用药及两者的凋亡率相加值,且差异有统计学意义(P<0.001)。提示OSTP能增强紫杉醇诱导的卵巢癌A2780细胞凋亡作用。结论 OSTP对卵巢癌A2780细胞有生长抑制及凋亡作用,尤其是OSTP能增强紫杉醇诱导卵巢癌A2780细胞凋亡的作用,对于探讨和开发OSTP作为靶向化疗增敏剂治疗卵巢癌有良好的应用前景。
- 卢雪琳杨陈梁晓秋刘小敏周建斌
- 关键词：紫杉醇细胞凋亡
- 卵巢癌特异性结合肽OSTP的鉴定被引量：2
- 2013年
- 目的验证卵巢癌特异性结合肽(OSTP)对卵巢癌A2780细胞的特异性结合作用。方法合成OSTP并标记荧光素5-FAM。将培养的卵巢癌A2780细胞及对照组胃癌SGC7901细胞、骨肉瘤MG63细胞分别加5-FAM-OSTP孵育,荧光显微镜下观察拍照。构建卵巢癌A2780细胞荷瘤小鼠模型,尾静脉注入5-FAM-OSTP,循环1 h后进行左心室灌注,取肿瘤组织及各脏器组织,行冰冻切片,荧光显微镜下观察拍照。结果成功合成和标记5-FAM-OSTP。荧光显微镜观察显示:5-FAM-OSTP孵育后的卵巢癌A2780细胞产生明亮的黄绿色荧光,而对照组SGC7901、MG63细胞不产生荧光。裸鼠体内实验结果显示:肿瘤组织可见强荧光信号,平均荧光强度为17.656±1.980;肝组织平均荧光强度4.277±0.291;肾组织平均荧光强度4.422±0.767;其他脏器均无可见荧光信号。肿瘤组织与肝、肾组织的荧光强度间差异有显著性(P<0.05)。结论通过体内外实验证实了5-FAM-OSTP对卵巢癌A2780细胞具有特异结合作用,有望成为卵巢癌靶向化疗药物的导向肽。
- 杨陈何晓娟卢雪琳梁晓秋周建斌
- 关键词：靶向作用
- 特异性结合肽与卵巢癌靶向效应的研究
- 目的：验证课题组前期利用噬菌体展示技术所筛选的卵巢癌特异性结合肽的靶向性及定位分布情况，将此肽命名为OSTP（Ovarian Cancer Specific Targeting Peptide）。通过分析OSTP对卵巢癌...
- 杨陈
- 关键词：卵巢癌
- 文献传递
