杨毅力
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 供职机构：中国预防医学科学院更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 逆转录病毒载体的研究现状及其在分子生物学中的应用被引量：1
- 1991年
- 由于重组DNA技术的建立,促使各种真核病毒用作载体成为可能。逆转录病毒是最早被发展为载体的真核病毒之一。已经发展起来的病毒载体还有SV40、牛乳头瘤病毒、腺病毒及痘苗病毒等载体。到目前为止,还没有一种病毒载体能够代替所有其它的病毒载体,但根据不同的目的可采用不同的载体。逆转录病毒在其生命周期中的一环形成前病毒(Provirus)DNA整合到宿主细胞基因组中,而其它病毒都没有能使其DNA高效地整合于宿主细胞染色体中的机制。逆转录病毒的这一特点确定了它在分子生物学中的特殊地位。逆转录病毒用作基因转移载体是在八十年代初发展起来的。1981年Temin。
- 杨毅力赵小侠
- 关键词：逆转录病毒载体分子生物学
- 用逆转录病毒载体表达乙型肝炎病毒表面抗原
- 1992年
- 将含有乙型肝炎病毒(HBV)Pre-S及S基因开放读码框架的DNA片段克隆到逆转录病毒表达载体Pzip-neo SV(X)的5′-端长末端重复序列(LTR)下游BamH Ⅰ位点,构建成重组质粒Pzip-HBS。用磷酸钙沉淀技术将重组质粒转染到辅助包装细胞ψ-2中,经G418筛选,2周后获得的抗性细胞克隆能有效地表达HBsAg。5×10~6细胞培养48小时之后,收集上清,用放射免疫方法测得HBsAg产量达6283cpm,P/N值为32.6。Western blot证实,在分子量约23kD处有一条与乙型肝炎病毒表面抗体相结合的特异性蛋白带。Southern杂交显示,在细胞染色体上整合有HBsAg基因。电镜观察可见上清液中的HBsAg和重组的逆转录病毒颗粒。
- 杨毅力赵小侠龚春梅侯云德
- 关键词：逆转录病毒乙型肝炎病毒抗原
