杨大伟 作品数:13 被引量:57 H指数:6 供职机构: 山东出入境检验检疫局 更多>> 发文基金: 国家质检总局科技计划项目 山东出入境检验检疫局科研项目 安徽省自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 轻工技术与工程 理学 更多>>
对虾白斑综合症病毒变性高效液相色谱检测方法的建立与应用 2011年 据对虾白斑综合症病毒(WSSV)的基因保守序列,使用Primer Explorer V3软件设计了2条引物,利用PCR的扩增产物,结合变性高效液相色谱(DHPLC)技术,建立了一种对虾白斑综合症病毒的DHPLC快速检测方法。该检测方法特异性好,与传染性皮下和造血器官坏死病毒、斑节对虾杆状病毒、肝胰腺细小病毒、对虾杆状病毒以及对虾基因组DNA无交叉反应;检测灵敏度较高,约为10-5ng/μL,高于常规PCR及荧光定量PCR的灵敏度。用建立的DHPLC方法对100尾对虾样品进行了临床检测,结果与荧光定量PCR检测结果一致。WSSV的DHPLC检测方法,特异性强、灵敏度高,是对WSSV进行有效检测的一种新方法。 赵巍 马亚 赵玉然 杨大伟 梁成珠 刘荭 何俊强 史秀杰 岳志芹关键词:变性高效液相色谱 对虾 白斑综合症病毒 发酵乳酸杆菌PCR快速检测方法研究 被引量:2 2010年 〔目的〕建立一种特异、灵敏的发酵乳酸杆菌快速检测方法。〔方法〕根据发酵乳酸杆菌纤维二糖tuf基因延伸因子基因tu设计一对PCR引物,进行引物的特异性和灵敏度试验。〔结果〕PCR得到了较好的特异性扩增,其他干扰菌都无扩增,灵敏度达1.3×104cfu/ml。〔结论〕该方法能够实现发酵乳酸杆菌的快速检测,具有灵敏度高、特异性好的特点。 刘云国 侯大海 刘帅帅 李俊峰 周福通 王建广 杨大伟关键词:PCR 两种方法测定板栗直链淀粉含量的比较 被引量:10 2010年 比较碘比色法和碘电位滴定方法测定安徽大红袍和蜜蜂球两种板栗直链淀粉的含量,结果表明:两种方法测得的大红袍板栗直链淀粉含量均高于蜜蜂球板栗,碘比色法测得两种板栗直链淀粉的含量均高于碘电位滴定法。两种测定方法操作均快速简便,但与传统碘比色法相比,碘电位滴定法标准工作曲线采用多个函数拟合的方法绘制而成,直线回归方程相关系数更趋近于1,测得结果的稳定性、重复性较好,是测定板栗直链淀粉含量的一种科学合理有效的新方法。 陈俊芳 周裔彬 白丽 杨大伟关键词:板栗 直链淀粉含量 应用依赖解旋酶DNA恒温扩增技术检测副溶血性弧菌 被引量:10 2011年 以副溶血性弧菌的tlh基因为目的片段设计特异性引物,成功建立了恒温条件下快速检测副溶血性弧菌的依赖解旋酶DNA恒温扩增技术(HDA)的检测法,进行了特异性和灵敏度实验,并与普通PCR方法进行了比较。该HDA检测方法最低检测限为19.9ng·mL-1,与普通PCR方法相当。副溶血性弧菌的HDA检测方法具有普通PCR的特异、灵敏等特点,并且对仪器要求更低,用普通水浴槽即可进行反应。 石琰璟 王建广 房保海 张健 祝素珍 刘云国 姜英辉 雷质文 杨大伟关键词:副溶血性弧菌 大肠埃希氏菌O157:H7的HDA检测方法的建立 被引量:5 2011年 采用自行建立和优化的依赖解旋酶DNA恒温扩增(HDA)检测体系,建立HDA检测方法对大肠埃希氏菌O157:H7进行检测。采用大肠埃希氏菌O157:H7的rfbE基因为目的片段设计特异性引物,建成可快速检测大肠埃希氏菌O157:H7的HDA检测法,进行了特异性和灵敏度试验,并与普通PCR方法进行了比较。结果表明:所建立起的检测法,灵敏度为4.3×103 cfu·mL-1,灵敏度与普通PCR方法相当。大肠埃希氏菌O157:H7的依赖解旋酶DNA恒温扩增检测方法具有普通PCR的特异、灵敏等特点,并且对仪器要求更低,用普通水浴槽即可进行反应。具有广阔的推广前景。 王建广 雷质文 石琰璟 付静芸 房保海 祝素珍 姜英辉 刘云国 张健 杨大伟凝结芽孢杆菌PCR快速检测方法研究 被引量:6 2010年 目的:建立一种特异、灵敏的凝结芽孢杆菌快速检测方法。方法:根据凝结芽孢杆菌寡聚-1,6-葡萄糖苷酶基因设计一对PCR引物,进行了引物的特异性和灵敏度试验。结果:PCR得到了较好的特异性扩增,其它干扰菌都无扩增,灵敏度达5×103cfu/ml。结论:该方法能够实现凝结芽孢杆菌的快速检测,具有灵敏度高、特异性好的特点。 刘云国 刘帅帅 周福通 杨大伟 王建广关键词:凝结芽孢杆菌 PCR PCR结合变性高效液相色谱快速检测发酵乳酸杆菌 2011年 采用多聚酶链式反应结合变性高效液相色谱技术建立了发酵乳酸杆菌的快速检测方法。以编码发酵乳酸杆菌Lactobacillus fermentum延伸因子(EF-Tu)基因为靶基因设计引物,优化PCR体系,以加氏乳酸杆菌等26株试验菌株做特异性检测;并将标准菌株稀释成不同梯度,做灵敏度检测。试验结果表明,该方法有很好的特异性,且灵敏度高,检测限可达到100CFU/ml。 杨大伟 周裔彬 刘云国 雷质文 陈俊芳 王建广 李正义关键词:PCR 变性高效液相色谱 水分、温度、时间和pH对板栗淀粉颗粒形态的影响 被引量:6 2010年 以安徽大红袍板栗为原料,采用光学显微镜分析其在不同水分、温度、时间和pH条件下表观形态的变化。结果表明:随着淀粉体系中水分含量的升高,板栗淀粉颗粒越易膨胀破裂,水分含量达到70%后,大部分淀粉颗粒膨胀;加热温度和加热时间都能促进板栗淀粉颗粒膨大破裂,而加热温度对颗粒形态变化的影响较加热时间大;常温下中性和酸性条件对板栗淀粉颗粒膨胀的影响不大,而强碱性条件对板栗淀粉糊化有明显的作用,当pH达到13时,淀粉颗粒明显膨胀。 陈俊芳 周裔彬 白丽 杨大伟关键词:板栗淀粉 水分 温度 PH 食品中A型肉毒梭菌PCR-DHPLC检测方法的建立 被引量:6 2011年 目的:建立食品中A型肉毒梭菌的快速检测方法。方法:应用PCR结合变性高效液相色谱(DHPLC)技术,以A型肉毒梭菌的A型肉毒神经毒素基因作为靶基因设计特异性引物,PCR扩增的产物经DHPLC技术进行快速检测。以非A型肉毒梭菌,产气荚膜梭菌等23株参考菌株做特异性实验;A型肉毒梭菌DNA稀释成不同梯度,做灵敏度实验。结果:与传统的检测方法相比,该方法具有很好的特异性,方法灵敏度较高,最低检出限可达到为111ng/tube。结论:该方法可以快速、准确检测A型肉毒梭菌,是食品中致病菌快速检测的新技术。 杨大伟 刘云国 谭乐义 周裔斌 祝素珍 王建广 贾俊涛 姜英辉关键词:变性高效液相色谱 PCR 变性高效液相色谱技术在快速检测食品微生物中的应用研究 本研究以产黄曲霉毒素菌,白色念珠菌,A 型肉毒梭菌,凝结芽孢杆菌及发酵乳杆菌为研究对象,基于分子生物学技术,采用变性高效液相色谱法结合常规的PCR,初步建立了快速高效的检测方法,以期为食品致病微生物的快速检测方法建立提供... 杨大伟关键词:变性高效液相色谱 食品微生物检测 白色念珠菌 肉毒梭菌 文献传递