李英 作品数:6 被引量:100 H指数:5 供职机构: 中国科学院昆明植物研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 更多>>
杜仲皮中抗真菌蛋白的分离和特性研究 被引量:58 1994年 从杜仲(EucommiaulmoidesOliv)皮中分离纯化到一种新的抗真菌蛋白(EucommiaAntifungalProtein),简称EAFP。将切碎的杜仲树皮用NaCl溶液在组织捣碎器中高速匀浆提取,经硫酸铁沉淀、CM一cellulose离子交换层析和Bio一gel一p一10凝胶层析纯化。如此纯化而得的EAFP在SDS-PAGE胶片上显示一条分子量为5.0kD的单一带。反相HPLC显示4样品是纯的。等电聚焦电泳测得其pI值大于11.0。经还原和氨酰羧甲基化处理,用HPLC层析证明EAFP为单链。用酚一硫酸法未测出其含糖。EAFP是简单单链蛋白。氨基酸组成分析结果表明它宫含Arg、Cys和Gly,不含Met,Lys,Trp,His和Phe。未经热变性或SDS处理的EAFP与考马氏亮蓝试剂不发生显色反应。手工Edman降解法测得N一端3个氨基酸残基的顺序为Gly一Asp一Ala。用羧肽酶A和B酶解EAFP测得其C一末端为Val.0.3mg/mL蛋白明显抑制木霉、小麦赤霉菌、烟草黑茎病菌和棉花枯萎病菌菌丝的生长。蛋白在沸水中保温30min活性不变。 刘小烛 胡忠 李英 杨俊波 李炳钧关键词:抗真菌蛋白 棕榈花序中抗真菌蛋白质的分离及特性 被引量:5 1993年 棕榈花序用盐溶液提取,硫酸铵沉淀,透析,DEAE—Cellulose DE—52离子交换,超滤,再经 Ultrostl AcA—44柱过滤,上 Bio—Gel P—6柱后,分离到一个相对分子量为25.6 kD的蛋白质(TP—1)。TP—1在浓度低于1.0mg/ml即可明显抑制绿色木霉菌丝的生长,对赤霉菌、棉花枯萎菌及稻瘟菌都有抑制作用。TP—1无几丁酶和β—1,3—葡聚糖酶活性.也无血球凝集活性。但经蒽酮法及PAS反应证明是一个糖蛋白。氨基酸成分分析表明,TP—1富含A_(sD)、Gly、Ala和Leu。 杜良成 李英关键词:棕榈 蛋白 滇重楼寄生菌的研究 被引量:20 1999年 从滇重楼(Parispolyphylavar.yunnanensis)地下茎中分离和鉴定出两种细菌———蜡状芽孢杆菌(Baciluscereus)和产碱假单胞菌(Pseudomonasalcaligenes),以及三种真菌———黑团孢霉(Periconiasp.)、白色厚顶孢霉(Pachnocybealbida)和重楼索霉(Hormomycesparidiphilus)。对蜡状芽孢杆菌、产碱假单胞菌和重楼索霉进行了液体培养并测定了胞外多糖含量,结果表明重楼索霉可分泌大量胞外多糖,这可能是导致滇重楼地下茎胶质化和多糖含量增加的原因。 王世林 周立刚 李英 蔡妙英关键词:滇重楼 寄生菌 胞外多糖 转TMV-CP基因的烟草植株中几丁酶和β-1,3-葡聚糖酶活力的变化 被引量:4 1993年 利用交叉保护原理,将病毒外壳蛋白基因预先导入感病烟草中,使其获得对病毒感染的抵抗能力,是目前植物抗病毒遗传育种中一种较为有效的方法,已经使烟草、蕃茄等多种作物获得了对TMV,CMV等病毒的抗性。我们用T-DNA区携有嵌合的烟草花叶病毒外壳蛋白基因和卡那霉素抗性基因(NPTⅡ)的土壤农杆菌转化了烟草,转化株中有胭脂碱(Nopaline)和外壳蛋白(CP)的表达,其中CP的表达量可达100—800 ng/100μg蛋白。这表明转化的烟株中已结构性的预存了大量异体物质,这些物质的存在将如何影响植物本身的抗性系统是值得研究的。几丁酶和β—1。 杜良成 李英 胡运乾关键词:烟草花叶病毒 外壳蛋白基因 烟草 烟草花叶病毒外壳蛋白的基因导入和转化烟株的再生 被引量:5 1989年 用T-DNA区携有嵌合的烟草花叶病毒外壳蛋白基因和卡那霉素抗性基因(NPTⅡ)的土壤农杆菌株pACK403和pACK404与烟草品种SRl和斯佩特G-28单倍体无菌菌叶碟片进行共培养转化。转化后的叶碟片在含有头孢噻肟钠500毫克/升和卡那霉索300毫克/升的培养基上诱导芽,在含有头孢噻肟钠500毫克/升和卡那霉素100毫克/升的培养基上诱导生根。Nopaline测定,烟草花叶病毒外壳蛋白基因的表达检测、转化烟株对烟草花叶病毒侵染抗性的检测结果证明:用这种方法能可靠地将外源基因导入烟草,并能在转化烟株中表达。再生得到的转化烟株在烟草花叶病毒强感染情况下能延迟病症表现4—25天。 李英 胡运乾 陈文岗 王钧关键词:烟草花叶病毒 嵌合基因 珠子参抗真菌糖蛋白的研究 被引量:10 1992年 珠子参(Panax japonicus C.A.Meyer var. major(Burk)Wu et Feng)根茎用盐溶液提取,透析,两次离子交换层析,凝胶过滤,分离到两个蛋白质(ZP-1,ZP-2),其中,ZP-2能明显地抑制绿色木霉、麦类赤霉菌丝的生长。经SDS-PAGE及Sephadex G-75过滤,测得ZP-2的分子量分别为55和66kD,是由分子量非常相近的两个亚基组成。PAS反应表明ZP-2是一个糖蛋白,经GLC分析,中性糖含量为28.91%,由葡萄糖、甘露糖、岩藻糖、木糖、鼠李糖和半乳糖组成;糖醛酸含量经Bitter的方法测得为22.76%。用OPA柱前衍生氨基酸高压液相色谱法测定ZP-2的部分氨基酸组成,结果表明此蛋白质高含酸性氨基酸。ZP-2对人红血细胞无凝集活性,也无几丁酶和β-1,3-葡聚糖酶活性。 杜良成 王世林 李英 胡运乾 胡忠关键词:珠子参 糖蛋白