李绵洋
- 作品数：95 被引量：303H指数：9
- 供职机构：中国人民解放军总医院更多>>
- 发文基金：解放军总医院临床科研扶持基金国家重大科学仪器设备开发专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学语言文字更多>>
- 临床检验急诊检验技术人员培训模式的探讨被引量：1
- 2015年
- 目的探讨临床检验急诊检验技术人员的培养模式,完善临床检验技术人员培养体系。方法通过建立急诊检验人才培养导师制、急诊检验大讲台、急诊检验微信平台检验报告网络化复检与教学、医疗纠纷现场模拟、急诊检验质量监督等多种形式的培养形式,多方位构建急诊检验人才的培养平台。结果 2011提10月–2015年12月,培养急诊检验带教师资10人,培养急诊检验技术人员80名;开展急诊检验大讲台活动,每年进行急诊检验继续教育专项培训10次;建立急诊检验诊断与教学的微信平台,推出平台栏目开展急诊检验品管圈活动、ISO15189质量评价活动,进行急诊检验的质量监督,ISO15189质量评价活动成为了日常工作的一部分;举行医疗纠纷现场模拟4场次,大大减少了病人投诉事件。结论围绕急诊检验人才培养开展理论授课、网络教学、现场模拟等教学形式的急诊检验人才培养模式,可加强急诊检验人才的培养,促进急诊检验质量的不断提高。
- 向代军刘晓婷兰亚婷李健李绵洋王成彬
- 关键词：急诊
- miR-181a在转染乙型肝炎病毒基因组的HepG2.2.15细胞中的表达研究被引量：3
- 2008年
- 目的鉴定分析microRNA(miRNA)miR-181a在转染了乙型肝炎病毒(HBV)基因组的HepG2.2.15细胞中的表达情况,探讨miR-181a在与HBV相关的肝脏疾病中的作用。方法以本课题组基因芯片结果为基础,设计并合成miR-181a探针,采用Northernblotting检测miR-181a在HepG2.2.15和HepG2细胞(对照组)中的表达水平,应用生物信息学方法结合mRNA表达谱芯片结果预测miR-181a的靶基因,选取靶基因HLA-A2,应用流式细胞仪分析HLA-A2分子在上述2种细胞中的表达。结果Northernblotting结果显示,与对照组相比,miR-181a在HepG2.2.15细胞中的表达量显著增高;miR-181a可能的靶基因包括C8A、IDH1和HLA-A等,miR-181a可能通过其种子序列与其靶基因HLA-A的3′-UTR区部分互补结合来调节HLA-A的表达;流式分析也显示HLA-A2分子在HepG2.2.15细胞中的表达量(43.9%)显著低于HepG2细胞(96.6%)。结论miR-181a在HBV转染的HepG2.2.15细胞中高表达,并可能下调靶基因HLA-A的表达,推测这可能是HBV感染后病毒逃避免疫反应、持续复制的机制之一。
- 刘妍王春梅李绵洋王琳程勇前张玲霞徐东平
- 关键词：乙型肝炎病毒HLA抗原
- MHC五聚体方法检测基因疫苗体外诱导的抗原特异性细胞毒T淋巴细胞
- 2010年
- 目的 探讨MHC五聚体方法检测在体外用抗B细胞淋巴瘤基因疫苗（简称基因疫苗）刺激PBMC生成抗原特异性CTL的效率.方法 用于细胞培养的4份血液标本来自2例B淋巴细胞肿瘤患者（1例为滤泡性淋巴瘤患者,另1例为毛细胞白血病患者）和2名健康对照者.分别检测上述标本中PBMC受基因疫苗刺激后CTL生成情况.PBMC贴壁培养获得DC前体,在重组细胞因子GM-CSF和IL4的支持下诱导培养DC,采用基因枪方法将基因疫苗质粒导入DC,RT-PCB方法检测转染后细胞IgHV1-GM-CSF mRNA的转录,ELISA方法检测细胞因子GM-CSF的表达,并验证转染是否获得有效表达.转染后的DC再与从PBMC中获得的淋巴细胞共培养,诱导抗原特异性的CTL;共进行2次DC刺激,共计培养24 d,分别在培养前、培养第7天、第17天及第24天收获培养细胞,培养分为转染基因疫苗组和转染对照质粒组,流式细胞术分析培养细胞中CD3＋ CD8＋细胞亚群的水平;用针对基因疫苗抗原肽抗原表位的MHC五聚体荧光抗体检测CTL产生水平.结果 基因枪颗粒轰击方法转染DC后,RT-PCR结果显示转染得到了表达;转染基因疫苗组的DC中GM-CSF含量为（28±6）ng/106个细胞,而转染对照质粒组的DC中GM-CSF含量为（10±3）ng/106个细胞,差异有统计学意义（t=5.191,P〈0.01）.分析培养后的T淋巴细胞亚群,显示随着培养时间的延长,CD3＋CD8＋细胞亚群比例明显增加,转染对照质粒组在培养前、培养第7天、第17天和第24天的比例分别为（34.24±2.72）%,（46.06±3.08）%,（65.34±4.26）%,（73.86±4.85）%,而在转染基因疫苗组,其比例分别为（32.28±2.08）%,（45.32±3.81）%,（63.37±4.21）%,（75.01±3.20）%.两因素方差分析显示培养不同时间点的CD3＋CD8＋细胞亚群比例差异有统计学意义（F培养时间=176.966,P〈0.01）,但转染因素本身对其产生的影响差异无统计学意义（F转染因素=0.657,P〉0.05）.MHC五聚体检测结�
- 李绵洋朱平王成彬王红霞潘玉玲丛玉隆达万明
- 关键词：疫苗T淋巴细胞组织相容性抗原I类
- 冬凌草甲素对多发性骨髓瘤抗肿瘤的机制研究被引量：10
- 2014年
- 本研究探讨冬凌草甲素(Oridonin)对人多发性骨髓瘤(MM)细胞株U266抗肿瘤作用及其分子机制。CCK-8法检测冬凌草甲素对细胞增殖的影响;瑞氏染色法观察细胞的形态学改变;流式细胞术检测细胞凋亡;实时荧光定量PCR方法检测U266细胞FGFR3、BCL2、CCND1、MYC基因表达水平的变化;Western blot方法分析BCL2、MYC、CCND1、FGFR3和P53蛋白表达水平的变化。结果表明,①冬凌草甲素能够抑制U266细胞增殖,且呈浓度和时间依赖性;②10μmol/L冬凌草甲素处理U266细胞24 h后,光学显微镜下可观察到典型的细胞凋亡形态学改变;③U266细胞凋亡比例随冬凌草甲素药物浓度及作用时间的延长而增加;④经冬凌草甲素处理后的U266细胞中,FGFR3、BCL2、CCND1、MYC基因表达下调,同时其相应的蛋白质表达下调,P53蛋白表达上调,上述变化均呈浓度和时间依赖性。结论:冬凌草甲素可以抑制人多发性骨髓瘤U266细胞增殖并诱导其凋亡,发挥其抗肿瘤作用。本研究为MM新的靶向治疗方案选择提供理论依据。
- 段浩清李绵洋高丽张俊峰王蔚李燕马一盖王成彬
- 关键词：冬凌草甲素多发性骨髓瘤U266细胞细胞凋亡细胞增殖
- 骨髓增生异常综合征GSTM5基因启动子区甲基化的状态及意义被引量：2
- 2022年
- 目的探讨谷胱甘肽转移酶mu5(GSTM5)启动子区甲基化状态在骨髓增生异常综合征(MDS)发生发展中的作用,为MDS的早期诊断提供新的潜在分子标记物。方法收集2018年10月至2021年6月在解放军总医院血液科初诊的40例MDS[MDS伴单系发育异常(MDS-SLD)5例,MDS伴多系发育异常(MDS-MLD)7例,MDS伴环形铁粒幼红细胞(MDS-RS)6例,MDS伴原始细胞增多Ⅰ型(RAEB1)13例,MDS伴原始细胞增多Ⅱ型(RAEB2)9例]患者、8例MDS转化为急性髓系白血病(sAML)患者和6例对照(4例缺铁性贫血、2例营养性巨幼细胞性贫血)患者的骨髓血标本。采用Agena MassARRAY核酸质谱技术对3组标本进行GSTM5基因启动子区甲基化的定量检测。采用Wilcoxon非参数检验比较不同组GSTM5基因甲基化水平。采用受试者工作特征(ROC)曲线评价试验的特异度、敏感度和准确度。结果聚类分析结果显示,MDS组GSTM5甲基化率高于对照组[0.50(0.27,0.79)比0.29(0.10,0.45),P<0.05];sAML组GSTM5甲基化率明显高于MDS组[0.67(0.36,0.86)比0.50(0.27,0.79),P<0.05]。分析各CpG位点甲基化率的差异,在CpG_1、CpG_4,5、CpG_6,7,8、CpG_11、CpG_13,14、CpG_15、CpG_16、CpG_22和CpG_24位点,MDS组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,在CpG_6,7,8单位曲线下面积最大,AUC=0.861(95%CI 0.717~1.000,P<0.05),敏感度和特异度分别为85%和83%。分析GSTM5甲基化与MDS疾病发展的关系,在骨髓原始细胞较高组和高危亚组(RAEB)中GSTM5基因甲基化水平较高。结论GSTM5基因启动子区甲基化在MDS中较常见,并且在MDS发生发展过程中可能起重要作用,可作为诊断MDS的潜在肿瘤标志物。
- 虞亚菲王驰常青张兆怡轩冉李绵洋
- 关键词：骨髓增生异常综合征甲基化表观遗传学
- 骨髓细胞形态、细胞化学染色及骨髓活检切片联合检测在低原始细胞骨髓增生异常综合征与溶血性贫血鉴别诊断中的价值被引量：27
- 2016年
- 目的:探讨骨髓细胞形态、细胞化学染色和骨髓活检切片联合检测低原始细胞骨髓增生异常综合症(myelodysplastic syndrome,MDS)与溶血性贫hemolytic anemia,HA)鉴别诊断中的价值。方法:回顾性分析解放军总医院2009年9月到20巧年3月确诊的低原始细胞(<5%)MDS患者85例,HA患者61例的临床数据,比较两组一般临床特征、细胞遗传学和分子遗传学参数、骨髓细胞计数以及形态特征、细胞化学染色参数及骨髓活检特征的差异。结果:MDS组与HA组患者的一般临床特征相比较,其差异无统计学意义(P>0.05);而MDS组巨核病态造血发生率、环核铁粒幼红细胞阳性率和阳性水平、幼红细胞糖原阳性率和阳性水平、骨髓活检中MDS幼稚前体细胞异常定位及巨核病态造血发生率均明显高于HA组,其差异均具有统计学意义(P<0.05)。联合检测可识别90.6%的低原始细胞MDS。结论:骨髓细胞形态、细胞化学染色及骨髓活检切片联合检测能及时、准确地鉴别诊断低原始细胞MDS与HA。
- 顾李霖康慧媛潘玉玲刘改霞葛素君李绵洋王成彬
- 关键词：骨髓增生异常综合征溶血性贫血细胞形态细胞化学染色骨髓活检切片
- 高剪切力活化血小板钙离子反应的研究被引量：5
- 2004年
- 目的 检测细胞外钙离子 (Ca2 + )浓度对高剪切力诱导血小板聚集的影响 ,并测定高剪切力活化血小板时血小板内Ca2 + 浓度的变化 ,探讨Ca2 + 在剪切力活化血小板中的作用。方法 用锥板黏度计施加高剪切力作用 ,以荧光抗体CD6 1PerCP标记血小板 ,流式细胞术 (FCM )测定血小板聚集率。以荧光染料Fluo 3AM标记血小板 ,FCM测定高剪切力作用后血小板内Ca2 + 浓度 ;并测定二磷酸腺苷 (ADP)对高剪切力作用下Ca2 + 反应的影响。结果 洗涤全血标本或加入钙离子螯合剂乙二醇四乙酸 (EGTA) ,造成细胞外低钙或无钙环境 ,高剪切力诱导的血小板聚集率由 5 9 6 %±5 1%下降到很低水平 ,而加入外源性Ca2 + 在一定程度上增强这种聚集。全血标本受到高剪切力作用 ,血小板内Ca2 + 浓度发生明显的升高 ;增加细胞外Ca2 + 浓度能增强这种反应 ,降低细胞外Ca2 + 浓度或阻断血小板膜糖蛋白GPⅠb/Ⅸ与血浆血管假性血友病因子 (vWF)之间的相互作用 ,使血小板Ca2 + 反应消失 ,而阻断GPⅡb/Ⅲa与血浆vWF之间的相互作用则无明显影响。低浓度的ADP与高剪切力对血小板钙离子反应有协同作用。结论 细胞外Ca2 + 是高剪切力诱导血小板聚集的必需条件 ,血小板内Ca2 + 反应可能是剪切力活化血小板时信息传递的重要物质基础。
- 丛玉隆李绵洋邓新立秦小玲张立文杨宏伟胡金麟李楠
- 关键词：钙离子流式细胞术血小板聚集率
- ZO-1基因甲基化在MDS进展中的意义被引量：5
- 2015年
- 目的:探讨ZO-1基因甲基化在骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome,MDS)向急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)转化中的临床意义,为MDS患者的预后评估进一步提供理论依据。方法:采用甲基化特异性PCR(methylation specific PCR,MS-PCR)方法检测ZO-1基因在正常对照者骨髓标本(normal control,NC)、MDS、AML患者骨髓标本中的甲基化状态。运用亚硫酸氢盐侧序PCR(bisulfite sequencing PCR,BSP)方法检测1例MDS系列标本ZO-1基因在其MDS-RA、MDS-RAEB、AML阶段的甲基化状态。结果:ZO-1基因在NC、MDS、AML患者标本中的甲基化阳性率存在明显差异(P=0.000),在NC组未发现甲基化阳性,在AM L组阳性率最高(65.0%)。MDS/AML患者ZO-1基因甲基化阳性组髓系原始细胞比例更高(P=0.000)。1例MDS患者系列标本显示,随着疾病进展,在MDS-RA、MDS-RAEB、AML阶段中,甲基化位点阳性频率存在明显差异(P=0.000),在AML阶段阳性频率最高(64.65%)。结论:ZO-1基因启动子区高甲基化发生于MDS/AML患者中,随着恶性克隆增生,ZO-1基因甲基化阳性率及甲基化位点阳性频率越来越高,在一定程度上预示着MDS疾病进展,进一步提示ZO-1基因甲基化水平可成为监测MDS患者急性白血病转化的新指标。
- 康慧媛王新荣高丽王蔚李绵洋王莉莉王成彬于力
- 关键词：甲基化ZO-1基因骨髓增生异常综合征
- 淋巴瘤中骨髓形态联合血清肿瘤标志物检测的诊断及预后意义
- 本文拟探讨骨髓形态联合血清肿瘤标志物(tumor marker,TM)水平检测在淋巴瘤(lymphoma)诊断及预后中的意义。对我院2012 年1 月—2013 年10 月确诊的47 例淋巴瘤患者及20 例健康对照标本进...
- 康慧媛汪洋金淑媛李绵洋潘玉玲刘改霞冯晓倩王成彬
- 关键词：淋巴瘤肿瘤标志物骨髓形态学
- 葛根素通过对Th1/Th2/Th17平衡的免疫调节作用减轻大鼠烟雾吸入性肺损伤的炎症反应被引量：4
- 2015年
- 目的 Th1/Th2/Th17平衡在炎症反应中具有重要的作用。本文探讨葛根素(Pue)能否通过对Th1/Th2/Th17平衡的免疫调节作用而减轻黑火药烟雾所致大鼠肺损伤的炎症反应。方法将健康成年雄性Wistar大鼠40只随机分为正常对照组(Con组)、葛根素空白组(Pue组)、吸入性肺损伤组(ALI组)、葛根素治疗组(ALI+Pue组),每组10只。使用自制发烟装置建立大鼠吸入性肺损伤模型,Pue组和ALI+Pue组均按100mg/kg剂量在烟雾吸入后30min行腹腔注射;Con组、ALI组行腹腔注射生理盐水(12ml/kg)。24h后检测各组大鼠肺血管通透性的标志包括肺湿/干重比(W/D)和支气管肺泡灌洗液(BALF)中的蛋白含量,中性粒细胞聚集和激活的标志{肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性},BALF中细胞计数及白细胞分类计数,观察肺组织的大体及病理学改变,并用流式细胞仪分析外周血Th1/Th2/Th17细胞的表达。结果 ALI组肺W/D、BALF蛋白含量、MPO活性、细胞计数显著高于Con组、Pue组(P<0.05)。ALI+Pue组肺W/D、BALF蛋白含量、MPO活性、细胞计数显著低于ALI组(P<0.05)。ALI组的中性粒细胞、淋巴细胞、巨噬细胞均大于Con组、Pue组(P<0.05)。ALI+Pue组中性粒细胞、淋巴细胞明显低于ALI组(P<0.05),但是ALI+Pue组巨噬细胞与ALI组比较差异无统计学意义(P>0.05)。光镜下可见Con组、Pue组大鼠肺泡结构完整、清晰,肺泡腔干净,肺泡间隔均匀一致,间质无炎细胞浸润;烟雾吸入后24 h的ALI组大鼠肺泡间隔增厚,腔内可见渗出,肺泡间质可见炎细胞浸润;ALI+Pue组肺组织水肿及肺泡间质炎性细胞浸润程度均较ALI组减轻。Th1细胞在ALI组的比例低于Con组、Pue组(P<0.05);Th1细胞在ALI+Pue组的比例高于ALI组(P<0.05)。Th2细胞在ALI组的比例高于Con组、Pue组(P<0.05);Th2细胞在ALI+Pue组的比例低于ALI组(P<0.05)。Th17细胞在ALI组的比例高于Con组、Pue组(P<0.05);Th17细胞在ALI+Pue组的比例低于ALI组(P<0.05)。结论葛�
- 张帆张帆李绵洋李绵洋兰亚婷陈运霞
- 关键词：烟雾吸入性肺损伤黑火药葛根素TH17TH1/TH2
