李渝萍
- 作品数：63 被引量：149H指数：7
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- ERR1突变体I240R对其转录活化功能的影响
- 2005年
- 目的 分析ERR1突变体I240R对ERR1转录活化功能的影响。方法 用重叠延伸PCR构建ERR1的缺失突 变体ERR1 I240R到真核表达质粒pSG5上,通过荧光素酶报告基因表达系统检测ERR1 I240R对ERR1转录活化功能的影 响。结果 测序证实成功构建了ERR1的突变体pSG5 ERR1 I240R。报告基因表达系统检测显示ERR1 I240R激活的荧光 素酶报告基因活性明显高于野生型的ERR1。结论 ERR1突变体ERR1 I240R转录活化功能明显高于野生型的ERR1,为 进一步研究ERR1的结构与功能打下了基础。
- 李强陈敏陈彬李渝萍陈健钟小林周度金
- 关键词：突变体转录活化
- 通过“研讨式”分子生物学实验课 培养八年制医学生科研素质被引量：5
- 2011年
- 八年制医学生的培养过程中,科研素质的全面培养亟待加强。通过探索分子生物学实验课的"研讨式"教学,充分利用现有的办学条件,取得了较好的教学效果。"研讨式"教学方法提高了八年制医学生的科研及创新能力,值得进一步的研究和推广。
- 李渝萍张艳彭家和赵力陈敏何凤田
- 关键词：八年制医学教育实验教学科研能力培养
- ERR1突变体K244A对其转录活化功能的影响
- 2006年
- 目的分析ERR1突变体K244A对ERR1转录活化功能的影响。方法用重叠延伸PCR构建ERR1的缺失突变体ERR1/K244A到表达质粒pSG5上,通过荧光素酶报告基因表达系统检测ERR1/K244A对ERR1转录活化功能的影响。结果测序证实成功构建了ERR1的突变体pSG5/ERR1/K244A。报告基因表达系统检测显示ERR1/K244A激活的荧光素酶报告基因活性明显低于野生型的ERR1。结论ERR1突变体ERR1/K244A转录活化功能明显低于野生型的ERR1,为进一步研究ERR1的结构与功能打下了基础。
- 李强陈敏陈彬李渝萍陈健周度金
- 关键词：突变体转录活化
- 基于PNRC的新型抗ras多肽治疗乳腺癌的实验研究
- 核受体介导的信号传导和生长因子/Grb2/Ras 信号传导是乳腺癌发生、发展的重要机制。PNRC (proline-rich nuclear receptor coregulatory protein)是我们克隆和鉴定的...
- 陈彬李渝萍娄桂予张艳周度金
- 文献传递
- DNA甲基化PCR引物的设计被引量：5
- 2008年
- 张艳陈彬陈敏李渝萍陈健娄桂予周度金
- 关键词：甲基化PCR
- PNRC多肽通过干扰核受体途径抑制BT474细胞的增殖被引量：1
- 2010年
- 目的:运用核受体辅活化子PNRC的抗RasPTD融合多肽(PTD-PARP)研究其在乳腺癌细胞BT474中的分布、对核受体信号传导途径的影响及其抗肿瘤细胞增殖活性。方法:用多肽合成仪合成PTD-PARP、单独的PARP和PTD多肽以及FITC标记的PTD-PARP、PARP。HPLC分析和纯化后,荧光显微镜结合流式细胞仪检测PTD-PARP、PARP在BT474细胞中的分布。虫荧光素酶报告基因检测PTD-PARP对野生型PNRC辅活化ER反式激活功能的影响。MTS、软琼脂克隆形成实验检测PTD-PARP对BT474细胞的抗增殖活性。结果:PTD-PARP能进入BT474细胞,抑制野生型PNRC辅活化ER的反式激活功能并抑制BT474细胞的增殖。结论:PNRC抗RasP DT融合多肽可通过干扰核受体途径抑制乳腺癌细胞的增殖。
- 胡晨王越陈彬姜晓梅李渝萍娄桂予张艳何凤田周度金
- 关键词：多肽核受体信号传导
- 将科学史教育融入医学生的生物化学教学中被引量：5
- 2004年
- 通过对科学史教育融入生物化学教学的探索，总结了采用的教学手段和达到的教学效果。有利于培养素质全面的军事医学科学人才。
- 李渝萍陈敏陈健陈彬李强李蓉芬周长保周度金
- 关键词：科学史素质教育医学生生物化学教学教学手段
- 肌钙蛋白I2辅助活化多种核受体的反式作用被引量：1
- 2005年
- 为深入研究乳腺癌中孤儿受体ERRα1参与基因表达调控的详细机理,特别是核受体辅激活蛋白在其中的作用,以ERRα1的LBD为诱饵,用酵母双杂交系统筛选人乳腺组织cDNA文库得到了与其有明显相互作用的快速骨骼肌型肌钙蛋白I(TNNI2).应用酵母双杂交技术研究表明,TNNI2与多种核受体存在相互作用,且这种作用依赖于功能性的核受体AF2结构域.在哺乳细胞瞬时共转染实验中,TNNI2显示了对多种核受体反式激活功能的辅助活化作用.研究证明,TNNI2与许多辅激活蛋白类似,以配体依赖(对类固醇激素受体而言)或非依赖(对孤儿受体而言)的方式与核受体功能性AF2结构域相互作用,并增强多种核受体介导的反式作用.
- 李渝萍陈彬陈敏陈健李强周度金
- 关键词：核受体
- 核定位信号分析示踪载体——pGST-EGFP的构建及功能鉴定被引量：1
- 2011年
- 目的 构建谷胱甘肽转硫酶（GST）与EGFP相融合的新型蛋白质示踪载体--pGST-EGFP,以用于蛋白质细胞亚定位信号序列的深入分析.方法 以质粒pEGFP-N1为骨架,融合从pGEX-2TK载体中扩增的GST编码序列,构建成pGST-EGFP融合表达质粒;再插入人工合成的已知核定位蛋白SV40的核定位序列（NLS）,构建成pGST-EGFP-SV40 NLS作为阳性对照;另外,构建小分子量蛋白TNNI2在pGST-EGFP的融合表达质粒.将对照pEGFP-N1和各重组质粒分别用脂质体介导,瞬时转染HeLa细胞,荧光显微镜下观察蛋白的核定位情况.结果 单独表达的EGFP呈全细胞分布,而GST-EGFP融合蛋白只存在于细胞浆;SV40 NLS能将GST-EGFP融合蛋白带进细胞核.虽然TNNI2-EGFP融合蛋白的细胞亚定位呈现核内丰度更高的特点,但TNNI2-GST-EGFP融合蛋白仅限定于胞浆分布,提示TNNI2不能主动定位到细胞核中.结论 成功构建了蛋白质细胞亚定位示踪载体--pGST-EGFP.作为核定位信号分析系统,其对小分子蛋白细胞亚定位的示踪效果优于传统的pEGFP载体,更适用于科研工作中小分子量蛋白质核定位信号序列的研究.
- 赵元茵柳鹏王元忠张艳娄桂予何凤田李渝萍
- 关键词：核蛋白核定位信号绿色荧光蛋白谷胱甘肽转硫酶
- Grb2在MCF-7乳腺癌细胞中的核定位研究被引量：1
- 2004年
- 目的 构建Grb2的红色荧光蛋白融合表达质粒pDsRed1 C/Grb2 ,并观察Grb2在MCF 7乳腺癌细胞的核定位情况。方法 用PCR方法扩增Grb2cDNA ,与红色荧光蛋白表达质粒pDsRed1 C重组构建融合蛋白表达质粒pDsRed1 C/Grb2 ,酶切、测序鉴定后 ,瞬时转染MCF 7乳腺癌细胞株 ,用荧光显微镜观察Grb2的核定位情况。结果 pDsRed1 C/Grb2质粒有正确的阅读框 ,融合表达蛋白DsRed1 C/Grb2可定位于MCF 7乳腺癌细胞核内。结论 成功构建了Grb2的红色荧光蛋白融合表达质粒pDsRed1 C/Grb2 ,在MCF 7乳腺癌细胞株中 ,Grb2除存在于胞浆外 ,也可定位于细胞核内 ,可能与其参与核内基因的转录调控有关。
- 陈敏陈彬李渝萍陈健李强钟小林周度金
- 关键词：乳腺癌细胞株胞浆红色荧光蛋白
