李治学
- 作品数：14 被引量：29H指数：2
- 供职机构：扬州大学动物科学与技术学院更多>>
- 发文基金：博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 鸡PTH基因克隆、序列测定及其真核表达质粒的构建被引量：2
- 2008年
- 采集200日龄产蛋期新扬州鸡甲状旁腺组织,提取RNA并进行反转录聚合酶链反应(RT-PCR),扩增产物进行T-A克隆、测序。序列测定结果表明:PTH cDNA核苷酸长度为360bp。与GenBank上发表的鸡序列比较,核苷酸同源性为99.6%,在第159位处存在C→A的有意义突变。与从GenBank下载读取的牛、马、人、狗、猫、食蟹猴PTH基因序列进行比较分析,同源性分别为51.4%、50.8%、50.6%、50.3%、50.3%和46.9%。将该基因片段克隆到真核表达载体pCEP4,构建重组质粒pCEP4-PTH,所获重组质粒经过酶切、测序鉴定,证实含有目的片段,且连接、构建正确,为利用pCEP4-PTH调控机体钙代谢、改善蛋鸡生产性能和蛋壳质量的研究应用奠定了基础。
- 章世元俞路王雅倩刘波李治学周联高严桂芹汪益峰林显华
- 关键词：PTH基因克隆
- 真核表达载体pcDNA3-CaBP-D28k的构建及其在COS-1细胞表达被引量：1
- 2008年
- 通过酶切方法从克隆质粒pGEM-T-CaBP-D28 k中扩增CaBP-D28k基因,并将其克隆到真核表达载体pcDNA3中。阳性克隆鉴定后,在PEI作用下转染COS-1细胞,通过间接免疫荧光试验(IFA)检测到了CaBP-D28k在COS-1中的表达。
- 俞路章世元王雅倩李燕舞李治学严桂芹周联高
- 关键词：钙结合蛋白转染IFA
- pCDNA3-PTH真核表达载体构建及其在细胞内表达
- 2008年
- 以鸡甲状旁腺组织中总RNA为模板,采用RT-PCR法获得甲状旁腺素(PTH)cDNA。将该基因克隆至pCDNA3载体中,构建真核细胞表达载体pCDNA3-PTH,DNA测序证明获得了PTH基因,其序列与GenBank报道序列比较,核苷酸同源性为99.4%,在第159位处存在C→A的有意义突变。将测序正确的PTH基因在多聚乙肽亚胺(PEI)介导下转染COS-1细胞,通过间接免疫荧光试验(IFA)检测到了PTH在COS-1中的表达。PTH基因克隆和表达均获得成功,为进一步探讨该基因在改善蛋壳质量中的应用奠定了基础。
- 俞路章世元王雅倩刘波李治学周联高严桂芹汪益峰林显华
- 鸡降钙素基因克隆及其真核表达质粒的构建被引量：1
- 2008年
- 采集200日龄新扬州产蛋鸡腮后腺组织,直接提取总RNA,进行反转录-聚合酶链反应(RT-PCR),扩增产物进行克隆、测序,获得新扬州鸡降钙素(CT)基因序列。测序表明,CT基因核苷酸长度为417bp,编码139个氨基酸。与GenBank上发表序列相比较,核苷酸同源性为99.8%,在第135位处存在G→C的有义突变。与从GenBank下载读取的红点鲑、大马哈鱼、河豚、斑马鱼、人、家鼠、绵羊、犬8个物种序列进行比较分析,核苷酸同源性分别为74.0%、63.3%、59.5%、55.6%、52.8%、50.6%、48%及42.2%。将该基因片段克隆到真核表达载体pCEP4,构建重组质粒pCEP4-CT,所获重组质粒经过酶切、测序鉴定,证实含有目的片段且连接、构建正确,为利用pCEP4-CT调控机体骨钙代谢、防治蛋鸡骨质疏松症的研究和应用奠定了基础。
- 俞路王雅倩章世元卜祥斌李治学
- 关键词：降钙素基因克隆
- 二氢吡啶对雄鼠生长性能及生殖激素分泌水平的影响被引量：1
- 2006年
- 将40只4周龄雄性Wistar小鼠随机分成4组。其中,对照组饲喂基础日粮,试验组分别在基础日粮中添加100 mg/kg、150 mg/kg、200 mg/kg二氢吡啶,探讨二氢吡啶对雄鼠生长性能及生殖激素分泌水平的影响。结果表明,试验组小鼠平均体增重、血清FSH、LH和T的水平均显著高于对照组。
- 魏丽娜李治学丁家桐
- 关键词：二氢吡啶小鼠生殖激素
- 鸡CaBP-D28k基因克隆、序列测定及其真核表达质粒的构建
- 2008年
- 采集200日龄产蛋新扬州鸡小肠组织直接提取总RNA进行反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增,扩增产物进行克隆、测序,获得了新扬州鸡CaBP-D28k基因序列。序列测定表明,CaBP-D28k基因核苷酸长度为789bp,编码262个氨基酸。与GenBank上发表序列(NM_205513.1)比较,核苷酸同源性为99.9%,在760 bp处存在G→T的错义突变。与从GenBank下载的马、人、小家鼠、蟾蜍序列进行比较分析,核苷酸同源性分别为79.3%、79.1%、77.4%、77.3%。将该基因片段克隆到真核表达载体pCEP4,构建重组质粒pCEP4-CaBP-D28k,所获重组质粒经过酶切、测序鉴定,证实含有目的片段,且连接、构建正确,为利用pCEP4-CaBP-D28k调控蛋禽钙代谢、改善蛋壳质量的研究应用奠定了基础。
- 俞路王雅倩章世元孙怀昌王志跃孙龙生李燕舞李治学周联高严桂芹
- 关键词：基因克隆真核表达载体
- pCDNA3-CT真核表达质粒的构建及其在COS-1细胞中的表达
- 2008年
- 通过酶切方法自含鸡甲状旁腺素(CT)基因的克隆质粒pGEM-T-CT中扩增CT基因,并将其克隆到真核表达载体pCDNA3中,阳性克隆鉴定后,在PEI作用下转染COS-1细胞,通过间接免疫荧光试验(IFA)检测到了CT在COS-1中的表达。
- 俞路王雅倩章世元卜祥斌李治学
- 关键词：甲状旁腺素转染IFA
- 鸡降钙素基因克隆及其在COS-1细胞中的表达
- 2008年
- 采集新扬州产蛋鸡的腮后腺组织直接提取总RNA进行反转录聚合酶链式反应(RT-PCR),扩增产物进行克隆、测序,获得新扬州鸡降钙素(CT)基因序列。测序表明,CT基因核苷酸长度为417bp,编码139个氨基酸。与GenBank上发表序列相比较,核苷酸相似性为99.8%,在第135位处存在G→C的有益突变。与从GenBank下载读取的红点鲑、大马哈鱼、河豚、斑马鱼、人、家鼠、绵羊、犬8个物种序列进行比较分析,核苷酸相似性分别为:74.0%、63.3%、59.5%、55.6%、52.8%、50.6%、48%和42.2%。将该基因片段克隆进真核表达载体pCEP4,构建重组质粒pCEP4-CT,所获重组质粒经过酶切、测序鉴定,在PEI作用下转染CT细胞,通过间接免疫荧光试验(IFA)检测到了CT在COS-1中的表达。本研究为利用pCEP4-CT调控机体骨钙代谢、防治蛋鸡骨质疏松症奠定了基础。
- 俞路王雅倩章世元李治学卜祥斌
- 关键词：降钙素基因克隆IFA
- 鸡降钙素真核表达质粒pCEP4-CT的构建及细胞表达
- 2010年
- 构建重组鸡降钙素真核表达载体pCEP4-CT,转染非洲绿猴肾细胞(COS-1)并检测其表达。通过酶切方法自含鸡降钙素(CT)基因的克隆质粒pGEM-T-CT中扩增CT基因,并将其克隆到真核表达载体pCEP4中。阳性克隆鉴定后,在PEI介导下转染非洲绿猴转化肾细胞(COS-1),通过间接免疫荧光试验(IFA)检测CT在COS-1中的表达状况。结果表明,所获重组质粒经过酶切、测序鉴定,证实含有目的片段,且连接、构建正确;在COS-1细胞中检测到了CT的表达,为进一步探讨该基因在动物机体中调控钙代谢奠定了基础。
- 全丽萍章世元张杰周光玉薛永峰徐建超俞路卜祥斌李治学
- 关键词：降钙素真核表达载体转染IFA
- DNA改组的发展及应用被引量：1
- 2008年
- DNA改组自1994年首次提出至今,逐渐成为基因和蛋白质体外定向进化的高效方法,总结了DNA改组的技术路线、特点及发展,并对其应用作简要综述。
- 俞路王雅倩张莹章世元李治学
- 关键词：定向进化DNA改组分子育种
