李永畅
- 作品数：42 被引量：87H指数：6
- 供职机构：新疆农业大学动物医学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划博士后科研启动基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生文化科学环境科学与工程更多>>
- 马泰勒虫二温式PCR检测方法的建立及应用被引量：4
- 2014年
- 为给马泰勒虫提供特异、快速、敏感的检测方法,根据马泰勒虫18S rRNA保守基因序列,设计了一对特异性引物,建立马泰勒虫二温式PCR检测方法。扩增出的目的片段大小为139 bp,经克隆、测序分析,与GenBank上登录的序列相似性为100%。该方法与其他虫种无交叉反应,具有一定的灵敏性和特异性。应用所建立的方法对采集的30份疑似病例全血样品进行检测,阳性率为33.3%,相比之下相同样品的血液涂片检查的阳性率为13.3%。与三温PCR方法比较减少了反应时间的消耗,提高了检测效率,该方法对马泰勒虫病的早期(潜伏感染期)检测、诊断具有实际应用价值。
- 李佳李永畅王振宝张杨巴音查汗
- 关键词：RRNA二温式PCR
- 新疆部分地区牛和骆驼常见蜱传原虫病流行病学调查
- 2024年
- 研究旨在调查新疆阿克苏地区、阿勒泰地区、昌吉州、哈密市、和田地区、伊犁州等地方的部分试验区域牛和骆驼蜱携带病原情况。通过PCR方法对所采集的507份牛和骆驼血样进行病原检测(巴贝斯虫、环形泰勒虫、立克次体、无浆体),并采用MAGA11.0软件进行系统进化分析。结果显示,3个地区(阿克苏地区、阿勒泰地区、哈密市)的环形泰勒虫病总阳性率为9.86%(50/507),其中牛的阳性率为7.81%(19/243),骆驼的阳性率为11.74%(31/264);巴贝斯虫、立克次体和无形体未检出。进化树显示,骆驼环形泰勒虫的阳性样本与中国株亲缘关系较近(登录号:OM140998),相似性为99.31%;牛环形泰勒虫与沙特阿拉伯株亲缘关系较近(登录号:OM273908),相似性为99.60%。试验对新疆6个地区牛和骆驼的蜱传疾病的感染情况进行了调查,并首次在骆驼体内检出环形泰勒虫,结果可为新疆牛和骆驼蜱传疾病的综合防控提供技术支撑。
- 金依璇刘诗语甘露巴音查汗·盖力克俞进段真真李佳李永畅
- 关键词：环形泰勒虫流行病学调查
- 亚洲璃眼蜱和小亚璃眼蜱新疆地理株各发育阶段生物学特性的比较分析被引量：2
- 2022年
- 目的分析比较亚洲璃眼蜱(Hyalomma asiaticum)和小亚璃眼蜱(H.anatolicum)新疆地理株不同发育阶段生物学特性和形态差异。方法2019年4—5月,于新疆奇台和吐鲁番2个蜱流行地采集硬蜱,利用形态学特征鉴定蜱种,提取全蜱总DNA,PCR扩增蜱虫线粒体细胞色素氧化酶亚基1(CO1)基因保守片段,使用pEASY R-T1载体系统对目的基因进行克隆,挑取单菌落无菌扩大培养,培养后的菌液进行测序。采用NCBI中Blast在线分析软件,对测序后的靶基因序列与其他序列的同源性进行比对,分析CO1基因序列并进行系统进化树分析。将12只新西兰大白兔随机均分为2组,每组6只,分别供血饲喂不同发育阶段的亚洲璃眼蜱和小亚璃眼蜱,分别为幼蜱(200只)、若蜱(150只)和成蜱(50只),每个发育期分别取2只大白兔进行供血饲喂。采用饲蜱装置将蜱接种于兔子耳部饲血,每天对吸血蜱进行观察,直至各发育期蜱饱血脱落,记录各个阶段的发育时间,观察各蜱种不同发育期的生物学特性。结果于奇台和吐鲁番两地共采集317和291只硬蜱,分别为亚洲璃眼蜱(317只)和小亚璃眼蜱(291只)。经生物学特性的比较发现,亚洲璃眼蜱和小亚璃眼蜱完成一个生活史分别平均需要131.5和112.5 d。在卵期,亚洲璃眼蜱的产卵和卵孵化周期(27.5 d和31.5 d)长于小亚璃眼蜱(12.0 d和20.5 d);在幼蜱期,亚洲璃眼蜱和小亚璃眼蜱吸血、蜕皮分别需要5.5、18.5 d和9、18.5 d;在若蜱期,亚洲璃眼蜱和小亚璃眼蜱吸血、蜕皮分别需要10.5、19.0 d和4.5、30.0 d;在成蜱期,亚洲璃眼蜱和小亚璃眼蜱雌蜱吸血、产卵前期分别需要8.5、10.5 d和13.0、5.0 d。经形态学比较发现,除亚洲璃眼蜱卵期出现“卵斑”(后期发育成肛门)的时间(19 d)晚于小亚璃眼蜱(14 d),两蜱种间幼蜱和若蜱的差异不明显;成蜱间差异主要体现在颈沟(亚洲璃眼蜱雄蜱:长且深,向后延伸超出盾板中部;小亚璃�
- 宋瑞其翟雪洁李才善葛婷甘露张梦圆樊新丽李永畅张杨巴音查汗
- 关键词：生物学特性
- 新源县孕马蠕虫体内滞留情况调查被引量：15
- 2013年
- 【目的】调查新疆新源县驱虫后的孕马体内蠕虫滞留情况。【方法】采集样品253份,采用虫卵漂浮法和EPG检查法。【结果】孕马总感染率为98.8%,主要感染的虫体有马圆线虫、马副蛔虫、球虫、类圆线虫,感染率分别为90.9%、66.4%、83.4%、20.6%。感染强度(EPG)的检查圆线虫平均466个/g;马副蛔虫平均255个/g,球虫平均312个/g,类圆线虫平均94个/g。【结论】调查数据可为地方孕马寄生虫病的防治及马产业的健康发展提供参考。
- 李佳李永畅冉多良王伟巴音查汗
- 关键词：孕马蠕虫粪检
- 兽医寄生虫学新型教学概述被引量：2
- 2022年
- 兽医寄生虫学是畜牧兽医专业中的主要课程,也是和兽医临床联系紧密的重要专业课程之一。随着信息时代的快速发展,当代年轻人的生活学习方式也发生了改变,对传统兽医寄生虫学进行改革创新以应对当前快节奏的学习方式,一直以来是所有兽医寄生虫学教学工作者共同探讨的话题。近年,也出现了很多成功的教学改革案例,现将目前新型寄生虫学教学手段进行概述,以期对兽医寄生虫学教育工作者在进行教学实践时能够提供一些思路和建议。
- 张杨德力拜尔·木拉提李永畅
- 关键词：兽医寄生虫学创新教学
- 乌鲁木齐市3例疑似犬巴贝斯虫病的诊断及病原体的分子鉴定
- 2024年
- 犬巴贝斯虫病是一种由犬巴贝斯虫引起的、能够造成寄主出现包括消瘦、贫血、黄疸、发热甚至死亡等一系列临床症状的血液原虫传染病。乌鲁木齐市3例疑似犬巴贝斯虫病患犬通过临床检查、血常规、血涂片镜检、血清生化检查、分子生物学检查(PCR)进行诊断,并选择3例患犬中强阳性的病例进行测序分型。结果显示,3例患犬血小板数目均不同程度地减少,其中两例患犬的红细胞数目和血红蛋白也有所减少。血涂片镜检发现,患犬红细胞内疑似存在犬巴贝斯虫虫体。3例患犬犬巴贝斯虫特异性引物核酸检测结果均呈阳性,病原体经分子生物学分析及测序鉴定为犬巴贝斯虫。
- 刘礼瑞李佳欣李永畅卢亚宾胡嘉莘杨昭然李建龙郭庆勇
- 关键词：病原体检测分子生物学检测
- 伊犁尼勒克县与新源县马泰勒虫抗体检测被引量：3
- 2016年
- 马泰勒虫病是一种经蜱传播的急性、季节性血液原虫病,在我国主要流行于新疆、内蒙古等地。为了解伊犁地区尼勒克县、新源县放牧马感染马泰勒虫的情况,本试验用马泰勒虫竞争性ELISA(cELISA)检测试剂盒,对尼勒克县、新源县放牧马(n=315)进行马泰勒虫抗体阳性率的检测。结果显示,两个县均不同程度地感染了马泰勒虫,其中尼勒克县马泰勒虫阳性率为29.82%(51/171),新源县马泰勒阳性率为53.33%(77/144),新源县阳性率较高。经统计分析发现,台努尔哈拉牧场、马场牛队马泰勒虫感染存在明显差异,与尼勒克乡、乌赞乡、那拉提镇、阿勒托别乡不同年龄段马泰勒虫感染无明显差异。此外,不同地区感染程度不同。试验数据可为当地的马泰勒虫防控提参考。
- 刘世芳王冰洁李永畅瓦热斯.吐尔松朱玉涛图尔荪.萨迪尔巴音查汗
- 关键词：抗体阳性率CELISA
- 驽巴贝虫metacaspase基因的克隆、表达、反应原性鉴定和生物信息分析
- 2024年
- 目的 克隆、表达驽巴贝虫精氨酸/赖氨酸特异性半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(BcMC),鉴定其反应原性并分析其生物学信息。方法 根据驽巴贝虫部分基因序列设计并合成Bcmc基因扩增引物,采用PCR扩增Bcmc基因并克隆至原核表达载体pET-28a,提取质粒pET-28a-Bcmc进行双酶切、PCR和测序鉴定,将重组质粒转入感受态细胞大肠埃希菌BL21 (DE3),优化诱导条件后,选择最适异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)浓度、诱导温度和时间诱导,采用12%十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析重组蛋白的表达情况。用His标签蛋白纯化试剂盒纯化重组蛋白后,以驽巴贝虫感染阳性马血清为一抗,Western blotting分析重组蛋白的反应原性。采用ProtParam等生物信息学在线软件预测Bcmc基因的理化性质、磷酸化位点、亚细胞定位、抗原表位、二级和三级结构、蛋白互作网络,对比BcMC与疟原虫属MC-1 (PsMC-1)和泰氏锥虫MC (TtMC)的三级结构。Bcmc序列在NCBI上进行BLAST比对,使用Mega 7.0软件,采用邻接法构建基于mc基因序列的系统进化树。结果Bcmc基因PCR扩增产物约为996 bp,与预期片段一致。重组质粒pET-28a-Bcmc经双酶切、PCR和测序鉴定表明插入的目的基因正确。诱导条件优化结果显示,BcMC重组蛋白在IPTG终浓度为0.8 mmol/L、37℃培养5 h时的表达量最高。SDS-PAGE结果显示,重组蛋白以包涵体的形式表达,相对分子质量(Mr)约为36 000。Western blotting结果表明,纯化后的BcMC可与驽巴贝虫感染阳性马血清发生特异性反应。生物信息学分析结果显示,BcMC的Mr为36 956.72;具有25个磷酸化点位;亚细胞定位预测位于线粒体的比例为10%;B细胞抗原表位分析发现该蛋白含有12个潜在抗原表位;BcMC蛋白的二级结构中,无规则卷曲占50.30%、α-螺旋占23.19%;BcMC的三级结构与PsMC-1和TtMC相似;蛋白互作网络预测结果显示,与BcMC相互作用的蛋白及BcMC参与的
- 任冀超甘露郑会珍冯秀娟崔泽云李佳欣金依璇张伟郭庆勇巴音查汗·盖力克李永畅
- 关键词：反应原性生物信息分析
- 伊犁昭苏县马新孢子虫病诊断报告被引量：2
- 2013年
- 新孢子虫感染马的报道甚少。为了解新疆马匹主要产地昭苏县马匹新孢子虫病感染情况,随机采集了24份马匹样品,用PCR诊断方法进行了新孢子虫病检测。结果表明,所检样品新孢子虫阳性率为8.3%(2/24),说明该县马匹存在新孢子虫病感染。该结果为昭苏县乃至新疆马匹新孢子虫病防控提供了资料。
- 索意利.李吉李佳李永畅张杨巴音查汗
- 关键词：新孢子虫PCR驱虫
- 一种蜱虫样品扫描电镜固定配方及方法
- 本发明属于寄生虫扫描电镜样品固定方法技术领域，涉及一种蜱虫样品扫描电镜固定配方及方法，该固定配方由PBS缓冲溶液、聚山梨酯及戊二醛制作成戊二醛固定液。方法包括步骤（一）观察蜱虫样品假头基内是否有残留的宿主组织，若有则去除...
- 巴音查汗·盖力克吴辉张扬翟少华郭庆勇陈千林明·乌尔娜李永畅伊春阳朱玉涛史亚明
- 文献传递
