- 酶消化结合组织块培养法用于颞下颌关节盘组织工程细胞扩增的初步研究被引量：1
- 2010年
- 目的采用酶消化结合组织块培养法对山羊颞下颌关节(temporomandibular joint,TMJ)盘细胞进行体外培养和扩增,探索TMJ关节盘细胞体外培养及扩增的新方法。方法在无菌条件下,切取一月龄山羊TMJ关节盘,剪至1.0 mm^3的碎块,用0.25%胰酶、0.01%Ⅰ型胶原酶消化关节盘组织块,将消化好的组织块置入6孔板中培养。在倒置显微镜下连续观察细胞的形态变化及贴壁率,甲苯胺蓝染色、Ⅰ型胶原免疫组化染色进行细胞鉴定,测定其生长曲线。结果原代培养的关节盘纤维软骨细胞4天可观察到贴壁细胞,7天贴壁细胞逐渐增多,第10天时细胞彼此相连,铺满平底,细胞以梭形为主,部分多角形。传代后12小时贴壁率达90%,大部分为多角形,4～5天即可长满瓶底。甲苯胺蓝染色可见异染颗粒,胶原免疫组化染色胞浆内可见棕黄色颗粒。结论酶消化结合组织块培养法培养的山羊TMJ关节盘细胞具有较强的增殖能力,可作为TMJ关节盘组织工程中获取大量原代细胞的实用方法。
- 柯一凡康宏舒维娜苏雪莲李振强闭艳妲周烨
- 关键词：组织块培养法颞下颌关节盘
- 两种生长因子对颞下颌关节盘细胞自组装基体合成影响的动物实验被引量：2
- 2011年
- 目的研究转化生长因子β1（transforming growth factor，TGF-β1）及胰岛素样生长因子Ⅰ（insulin-like growthfactor-I，IGF-I）对颞下颌关节（TMJ）盘细胞自组装基体细胞外基质合成的影响。方法采用10、100μg／L的IGF-I（I10,I100组）及5、50μg/L的TGF-β1（T5、T50组）分别作用于TMJ盘细胞白组装基体，3、6周时观察自组装基体的大小、形态并测重；冰冻切片、天狼猩红（piero-siriusred）及免疫组化染色观察I型胶原的分布，番红-O-固绿染色观察I型胶原及糖胺聚糖分布。定量检测I型胶原、糖胺聚糖含量、测定细胞数量。结果3周时T5、I10组上调糖胺聚糖的分泌、细胞的增殖以及I型胶原的合成．3周时I10组I型胶原（109．16±5．12μg）的表达约是空向对照组（69．13±5．94μg）的近2倍；空白对照组和I10、I100、T5、T50组于第6周时分泌的基质含量及细胞的增殖数量均比第3周增多。结论IGF-I、TGF-β1作用时间的延长对基体的生化合成具有上调作用，10μg/L的IGF-I更适用于组织工程化TMJ盘细胞自组装基体的应用。
- 康宏闭艳妲李振强齐梦怡彭二梅
- 关键词：颞下颌关节转化生长因子胰岛素样生长因子
- 自组装山羊颞下颌关节盘组织工程纤维软骨模型的构建被引量：5
- 2011年
- 目的构建山羊颞下颌关节盘纤维软骨自组装模型,观察自组装组织工程纤维软骨的生物学特征,为颞下颌关节盘及其他组织工程纤维软骨的进一步研究创造条件。方法分离、培养山羊颞下颌关节盘细胞,按每井5.5×106个接种到预制的直径5 mm×深10 mm琼脂糖井内,每天换液,培养2周,观察和检测颞下颌关节盘形态和成分的变化。结果接种后1 d,山羊颞下颌关节盘细胞在琼脂糖井内聚集,开始自组装成一圆盘状基体,后来逐渐变成圆球形。培养2周时,苏木精-伊红染色可观察到纤维软骨细胞呈圆形,周围有基质包绕;Safranin-O/fast green染色显示自组装基体内纤维软骨细胞分泌细胞外基质氨基多糖;picro-sirius red染色可见自组装基体内有大量胶原纤维。Ⅰ型胶原免疫组织化学染色可见胞浆和细胞外有棕黄色颗粒,表明自组装纤维软骨可以产生与自然关节盘组织一致的Ⅰ型胶原成分。结论利用琼脂糖井构建的山羊颞下颌关节盘自组装组织工程模型,能产生与自然关节盘成分相似的细胞外基质,表明组织工程化颞下颌关节盘组织的途径是可行的。
- 康宏李振强闭艳妲
- 关键词：颞下颌关节盘纤维软骨
- 自组装颞下颌关节盘纤维软骨模型的构建及静水压对其基质合成的影响
- 目的 1.构建山羊颞下颌关节盘纤维软骨自组装模型,观察自组装组织工程纤维软骨的生物学特征,为颞下颌关节盘及其它纤维软骨组织工程的进一步研究创造条件。 2.评价动态静水压和静态静水压对自组装颞下颌关节盘纤维软骨基体细胞外基...
- 李振强
- 关键词：自组装颞下颌关节盘纤维软骨琼脂糖
- 文献传递
