李博韬
- 作品数：8 被引量：23H指数：2
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 传染性法氏囊病毒感染SPF雏鸡哈德尔腺和盲肠扁桃体TGF-β1 mRNA表达变化被引量：2
- 2013年
- 为探索鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)感染对SPF雏鸡消化道和呼吸道局部黏膜免疫组织转化生长因子-β1(TGF-β1)mRNA表达的影响,以21日龄SPF雏鸡为研究对象,应用荧光定量PCR方法,对SPF雏鸡感染IBDV后,其哈德尔腺和盲肠扁桃体中TGF-β1 mRNA表达的动态变化进行检测。结果发现,21日龄SPF雏鸡感染IBDV强毒后1～28d,其上述局部黏膜免疫组织中TGF-β1mRNA表达均不同程度的高于对照雏鸡,其中哈德尔腺TGF-β1 mRNA表达于病毒感染后3～28d极显著高于对照雏鸡(P<0.01);而盲肠扁桃体的上述被检指标于病毒感染后3～14d极显著高于对照雏鸡(P<0.01)。表明IBDV感染所致的雏鸡免疫抑制与雏鸡消化道和呼吸道局部黏膜免疫组织TGF-β1 mRNA表达增加密切相关。本研究为进一步阐明IBDV的免疫致病机制提供了重要的参考依据。
- 张蕊高雪丽李博韬郑世民
- 关键词：传染性法氏囊病毒SPF雏鸡盲肠扁桃体转化生长因子-Β1
- 传染性囊病病毒感染对SPF雏鸡免疫器官免疫功能的影响被引量：1
- 2013年
- 以21日龄SPF雏鸡为研究对象,应用细胞培养和MTT及免疫组织化学方法分别检测了免疫器官中T、B淋巴细胞增殖功能和IgG、IgA、IgM生成细胞数量的动态变化,旨在揭示传染性囊病病毒(IBDV)感染对雏鸡免疫器官细胞免疫和体液免疫功能的影响。结果显示,IBDV感染雏鸡免疫器官中T、B淋巴细胞增殖功能和腔上囊、脾脏中IgG、IgA、IgM生成细胞数量不同程度的低于对照雏鸡,并且在感染后期逐渐恢复。表明雏鸡感染IBDV后的早期,机体免疫器官的细胞免疫和体液免疫功能均受抑制,可能是病毒感染早期导致雏鸡死亡的一个主要因素。
- 王灵娟高雪丽隋欣于志强李博韬郑世民
- 关键词：IBDV免疫器官细胞免疫体液免疫
- 犬瘟热病毒血凝蛋白在昆虫细胞中的表达与抗原性分析被引量：1
- 2014年
- 为获得具有天然构象及良好抗原性的犬瘟热病毒(CDV)血凝蛋白(H),本研究以HLJ2-07毒株为模板,利用RTPCR方法扩增出H基因,将其克隆到pFastBacTMHTA载体中,利用大肠杆菌DH10BacTM同源重组构建穿梭质粒reBACmidrH,将重组穿梭质粒转染Sf9昆虫细胞,进行杆状病毒表达。利用Western blotting对获得的重组蛋白进行鉴定及抗原性分析。同时,利用在线网站与软件对CDV H蛋白进行B细胞表位分析预测。结果显示,在杆状病毒系统中表达的H蛋白能与His-tag单克隆抗体及CDV阳性血清发生特异性反应,表明该蛋白成功表达,且具有良好的反应原性;用Swiss-model同源建模软件及B细胞表位预测软件,预测H蛋白可能具有的B细胞表位有5处,分别是175—195、240—250、365—380、480—508及526—555。本研究获得了具有天然构象及良好抗原性的CDV重组H蛋白,可为诊断试剂开发、单克隆抗体制备及表位筛选等工作奠定基础。
- 全传松姜骞于作李博韬李连峰曲连东
- 关键词：犬瘟热病毒B细胞表位
- 犬瘟热病毒F蛋白融合信号肽单克隆抗体的制备及其表位的鉴定被引量：1
- 2023年
- 为制备犬瘟热病毒(CDV)F蛋白融合信号肽(FSP)的单克隆抗体(MAb),本研究通过原核表达系统表达CDV HLJ1-13株重组FSP蛋白(rFSP)。将其免疫BALB/c小鼠,通过间接ELISA方法筛选到1株能够稳定分泌抗FSP蛋白MAb的杂交瘤细胞株G8D6E3E5,亚类鉴定结果显示该株MAb重链为Ig G2a型,轻链为κ型。构建一系列表达部分重叠的重组FSP片段,经western blot鉴定该株MAb识别的抗原区域为aa1~aa55,通过合成一系列重叠多肽,经ELISA进一步鉴定该株MAb识别的抗原表位为^(21)QQHSTRSTET^(30)。采用western blot检测该株MAb与r FSP的反应原性;采用间接免疫荧光试验(IFA)检测该株MAb与天然FSP的反应原性。Western blot结果显示,CDV Snyder Hill和HLJ1-13株r FSP蛋白样品在34 ku左右均出现特异性条带;IFA结果显示,感染CDV Snyder Hill株48 h后的vero细胞出现红色荧光。以上结果表明,该株MAb既能够与原核表达的CDV Snyder Hill和HLJ1-13株的r FSP蛋白反应,也能够与天然表达的CDV Snyder Hill株FSP蛋白反应。上述研究结果为CDV的检测以及FSP生物学功能的研究奠定了坚实基础。
- 崔赛赛李博韬刘家森康洪涛杨鸣发姜骞曲连东
- 关键词：犬瘟热病毒单克隆抗体
- 犬瘟热病毒RT--PCR检测方法的建立及其应用
- 李博韬
- 传染性法氏囊病病毒对雏鸡机体氧化-抗氧化能力的影响被引量：2
- 2013年
- 60只21日龄SPF混合雏鸡随机分为病毒感染组（I）和对照组（c）。I组雏鸡经眼、鼻途径感染传染性法氏囊病毒（IBDV），C组不做任何处理。两组雏鸡分别于病毒感染后的1、3、5、7、14、28d，每组随机抽取5只，心脏采血，分离血清，检测总超氧化物歧化酶（T—SOD）、谷胱甘肽过氧化酶（GSH—Px）、丙二醛（MDA）及一氧化氮（NO）含量。结果发现：21日龄sPF雏鸡感染IBDV后，其血清T—SOD和GSH—Px活性均于感染后5～7d显著或极显著低于对照雏鸡（P〈0．05或P〈0．01）；而MDA和NO含量分别于感染后5～7d和5d显著或极显著升高（P〈0．05或P〈0．01）。结果表明传染性法氏囊病病毒能够降低雏鸡血液抗氧化酶活性，促进自由基生成，从而影响雏鸡氧化一抗氧化能力。
- 李贺高雪丽李博韬郑世民
- 关键词：传染性法氏囊病病毒SPF雏鸡血清氧化-抗氧化
- 传染性法氏囊病毒对SPF雏鸡免疫器官细胞凋亡及bcl-2mRNA表达的影响被引量：5
- 2013年
- 为证实传染性法氏囊病毒(IBDV)感染SPF雏鸡后,其免疫器官细胞凋亡与bcl-2mRNA动态表达的关系,应用TUNEL和实时荧光定量PCR方法分别对雏鸡免疫器官细胞凋亡数量和bcl-2mRNA表达的动态变化进行了检测,结果发现,IBDV感染雏鸡后3～7d,法氏囊、胸腺和脾脏中凋亡细胞数量显著或极显著高于相应对照雏鸡(P<0.01或P<0.05);同时在上述3种免疫器官中bcl-2mRNA的表达均不同程度增加,并于病毒感染后3～7d差异显著或极显著(P<0.01或P<0.05)。表明IBDV可增加感染雏鸡免疫器官的细胞凋亡数量和bcl-2mR-NA的表达。
- 佟美姣高雪丽李博韬郑世民
- 关键词：雏鸡免疫器官细胞凋亡BCL-2MRNA表达
- 犬瘟热病毒TaqMan实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用被引量：11
- 2014年
- 为建立快速检测犬瘟热病毒的诊断方法,根据GenBank中犬瘟热病毒核衣壳蛋白(NP)基因的保守序列设计1对特异性引物和1条特异性探针,通过对反应体系和反应条件的优化,建立了TaqMan实时荧光定量RT-PCR检测方法。结果显示,该方法对犬瘟热病毒最低检出量为80copies/μL,是常规RT-PCR的100倍;与其他犬类病毒不发生交叉反应;组内、组间变异系数均小于5%。对收集的67份临床样品进行检测,阳性检出率为64.2%,而常规RT-PCR的阳性检出率为44.8%。研究结果表明,建立的TaqMan实时荧光定量RT-PCR具有良好的敏感性、特异性和稳定性,为犬瘟热的早期诊断提供了技术手段。
- 全传松李博韬姜骞李连峰于作曲连东
- 关键词：犬瘟热病毒TAQMAN实时荧光定量RT-PCR
