李令媛
- 作品数：58 被引量：509H指数：14
- 供职机构：北京大学生命科学学院蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生环境科学与工程化学工程更多>>
- 金属硫蛋白清除自由基及其对自由基引起的核酸损伤保护作用的研究被引量：38
- 1995年
- 通过化学反应体系产生ＯＨ－和Ｏ自由基，采用荧光和化学发光检测体系，比较研究了不同亚型及不同结合金属的金属硫蛋白（ＭＴ）清除自由基能力的大小。结果表明，对于同一亚型，Ｚｎ结合ＭＴ清除自由基的能力大于Ｃｄ结合ＭＴ同一结合金属的ＭＴ，ＭＴ１清除自由基的能力大于ＭＴ２。通过比较ＺｎＭＴ１与谷胱甘肽（ＧＳＨ）及超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）清除自由基的能力大小发现，ＺｎＭＴ１清除ＯＨ的能力是ＧＳＨ的１００倍，清除Ｏ自由基的能力分别是ＧＳＨ和ＳＯＤ的２５和０．０１倍。即ＭＴ是一种很好的ＯＨ自由基清除剂。以ＯＨ对核酸（ＤＮＡ）的损伤为例，研究了ＭＴ对核酸损伤的保护作用，其变化规律与上述结果相一致。
- 帖建科李令媛茹炳根慈云祥
- 关键词：金属硫蛋白自由基
- 小肠三叶因子对盐酸诱导的大鼠胃溃疡的预防和治疗作用被引量：6
- 2000年
- 目的 探讨克隆表达的rh ITF在模拟胃肠道条件下的稳定性和抗胃溃疡的作用机制。方法 采用质谱法及盐酸诱导的大鼠胃溃疡模型 ,测定rh ITF在模拟胃肠道条件下的结构稳定性和大鼠腺胃粘膜损伤级别 ,损伤指数及胃酸度 ,胃蛋白酶活性及胃排空能力。结果 酸对rh ITF相对分子量没有影响 ,胃蛋白酶仅从N端切除 6个氨基酸残基。rh ITF可明显降低大鼠腺胃粘膜损伤级别和损伤指数 ,但对胃酸分泌 ,胃蛋白酶活性及胃排空能力没有影响。结论 rh ITF在体外对酸和胃蛋白酶有一定的抗性 ,其对胃溃疡的治疗和预防作用不是通过降低攻击因子 (酸和蛋白酶 )和影响胃的自主运动实现的。
- 口如琴王蔚李令媛茹炳根
- 关键词：胃溃疡
- 改变毕赤酵母信号肽对人三叶因子3表达的影响被引量：8
- 2002年
- 为了表达具有天然N 末端的人三叶因子 3,构建了含两种信号肽序列的毕赤酵母表达载体 ,其中一种表达载体在分泌信号肽序列α factor后保留STE13信号肽切割序列 ,另一种表达载体去除了该序列。将 2种表达载体分别转化到毕赤酵母GS115中进行表达。经甲醇诱导后目的蛋白分泌到发酵液上清中 ,SDS PAGE和Western印迹证明 2种重组蛋白均以二体的形式分泌表达 ,分子质量约为 13ku ,都能被TFF3抗体所识别。N 端氨基酸测序证明其中一个重组蛋白具有天然人TFF3的N端 ,质谱检测分子质量与天然蛋白一致 ;另一重组蛋白N 端则带有 2个未切割完全的信号肽序列GluAla ,质谱检测该蛋白中还含有部分切割完全的蛋白。
- 王艳茹安琳李令媛茹炳根
- 关键词：毕赤酵母信号肽三叶因子3甲醇酵母分泌
- 北京地区家蝇(Musca domestica L.)乙酰胆碱酯酶(AChE)动力学性质研究被引量：1
- 1991年
- 实验结果表明,在北京地区家蝇种群以及实验室敏感系和用残杀威选育的抗性种群中,其乙酰胆碱酯酶(AChE)对乙酰硫代胆碱的米氏常数(K_m)值最大相差4倍,最大反应速度(V_(max))相差近8倍。敌百虫与家蝇AChE的双分子速率常数(Ki)值,农大敏感品系(SA)为7.41×10~4(L/mol,分^(-1)),而北京宜武种群AChE的Ki值仅为5.13×10~2,相差达144倍,崇文、密云和回龙观种群AChE的Ki值和SA品系相比,差异也在10倍以上,说明北京地区家蝇AChE对敌百虫的敏感度明显降低了。这些家蝇种群的AChE对敌百虫的亲合力(解离常数Kd)和SA品系相比,宜武种群相差近2890倍,其它种群也相差50倍以上,而磷酸化速率常数(k_2)则相差不大,说明北京地区家蝇对敌百虫的敏感度降低是由于解离常数—Kd值的改变造成的。
- 杨俭美李松岗李令媛
- 关键词：家蝇乙酰胆碱酯酶敌百虫抗性
- 北京地区家蝇抗药性与酶活性的关系被引量：6
- 1994年
- 试验结果表明，不同抗性水平种群的羧酸酯酶活性与其对拟除虫菊酯的抗性程度明显相关．北京崇文区、宣武区和密云等地区的家蝇种群以及用残杀威选育的种群和用残杀威、７５０４、溴氰菊酯选育后合并的种群，多功能氧化酶（ＭＦＯ）活性明显高于农大敏感品系（ＳＡ），最多相差近１０倍，但是用溴氰菊酯选有的种群和用残杀威选育后加敏感品系稀释的种群，ＭＦＯ活性没有明显的提高。说明ＭＦＯ活性的提高与家蝇对残杀威的抗性有密切关系，而与对溴氰菊酯的抗性关系次之。抗性家蝇种群的乙酰胆碱酯酶（ＡｃｈＥ）对敌百虫的敏感度明显低于ＳＡ品系的ＡｃｈＥ，说明ＡｃｈＥ的敏感度降低是家蝇对有机磷杀虫剂的抗性机制之一。酸性磷酸酯酶、碱性磷酸酯酶以及谷胱甘肽－Ｓ－转移酶（ＧＳＴ）活性在不同家蝇种群中没有明显差异，说明这三个酶系可能与家蝇的抗药性无关。
- 杨俭美李令媛
- 关键词：家蝇抗药性多功能氧化酶谷胱甘肽转移酶羧酸酯酶磷酸酯酶
- 单扫极谱法在金属硫蛋白研究中的应用被引量：2
- 1993年
- 本文将络合物吸附波测锌和镉用于金属硫蛋白(MT)的研究。在含α、α′-联吡啶介质中对经硝酸酸化后的MT样品中的锌含量进行测定,并将此法用于具有药用价值的Zn-MT的分离纯化及鉴定。在pH2的HCl-KI介质中,将单扫极谱法测镉用于镉-血红蛋白饱和法测定正常或金属诱导动物组织中的MT含量,检测量可达5μgMT/g组织,回收率为90～110％。
- 铁锋王文清潘爱华茹炳根李令媛
- 关键词：单扫极谱法金属硫蛋白锌镉
- 重组人三叶因子3对细胞的增殖及迁移的影响被引量：3
- 2002年
- 将重组人三叶因子 3(Trefoilfactor 3,TFF3)作用于人结肠肿瘤细胞 ,研究重组蛋白对细胞增殖的影响 ,结果发现该蛋白在较低的浓度 (10～ 5 0mg L)下对细胞的增殖基本没有影响 ,在 10 0～2 0 0mg L浓度下该蛋白对细胞仅有微弱的刺激作用 ,提高浓度对细胞增殖作用没有改变。同时研究了TFF3对损伤的单层结肠肿瘤细胞迁移的影响 。
- 王艳茹方敏安琳乔玮李令媛茹炳根
- 关键词：三叶因子3增殖迁移
- 金属螯合亲和层析纯化金属硫蛋白被引量：19
- 1994年
- 将二价铜离子螯合在ＣｈｅｌａｔｉｎｇＳｅｐｈａｒｏｓｅＦａｓｔＦｌｏｗ凝胶上制成亲和层析柱，锌诱导兔肝和镉诱导小鼠肝经匀浆、乙醇处理后上柱，用ｐＨ４．０的醋酸盐缓冲液平衡，再用ｐＨ５．２不同浓度的醋酸盐缓冲液分别洗脱，可得两个金属硫蛋白（ＭＴ）洗脱峰，经确定先后为ＭＴ－２和ＭＴ－１．分离方法比传统的凝胶过滤－离子交换法简单、省时，适于实验室规模分离纯化．
- 铁锋茹刚李令媛刘德富茹炳根
- 关键词：金属硫蛋白提纯
- 基因重组小肠三叶因子预防和治疗大鼠胃溃疡的研究被引量：4
- 2000年
- 实验制备重组人小肠三叶因子 (rhITF) ,用乙醇诱发大鼠胃溃疡模型研究该蛋白在体内的预防和治疗效果。先用 90 %的乙醇 1ml诱发溃疡 ,然后分不同的时间和不同的剂量尾静脉注射rhITF ,以牛血清白蛋白作对照。结果发现在胃溃疡发生 1h前注射 0 2～ 1mg的rhITF有明显的预防保护作用 ;而溃疡发生后 0 5～5h ,静脉注射 0 2～
- 苏云鹏李令媛俞梅敏茹炳根
- 关键词：胃溃疡基因重组
- 鲫鱼金属硫蛋白的提纯及性质研究被引量：14
- 1993年
- 用氯化镉诱导鲫鱼(Carassius aurattus),应用层析介质 Sephacryl S 体系从鱼肝脏中提取金属硫蛋白(MT),并对其性质进行研究.实验表明鲫鱼 MT 的性质与哺乳动物 MT 的性质十分相似.分子量约10 000,含丰富的半胱氨酸,较多的赖氨酸,不含芳香族氨基酸.紫外250nm 处强吸收,280nm 处几乎没有吸收。鱼 MT 含7个金属每分子,并含有20个巯基.测得鲫鱼 MT 等电点 pI 在5.6左右.
- 任宏伟王文清茹炳根李令媛潘爱华王英彦
- 关键词：金属硫蛋白提纯
