朱晓钰
- 作品数：12 被引量：38H指数：3
- 供职机构：大连市中心医院更多>>
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- PTEN基因的克隆及其在HepG2细胞中的表达被引量：2
- 2006年
- 目的克隆人抑癌基因PTEN全长cDNA,构建其真核表达载体并检测其在人肝癌细胞HepG2中的表达。方法采用RT-PCR法从人正常肝组织中扩增PTEN全长cDNA,将之与pMD18-T Simple Vector连接、测序,获得PTEN基因。将该基因与pcDNA3·1(+)载体连接,构建pcDNA3.1-PTEN真核表达载体。用该载体转染HepG2细胞,RT-PCR检测PTEN的表达。结果酶切和测序证实PTEN基因克隆和真核表达载体构建成功。HepG2-PTEN细胞中PTEN mRNA的表达显著高于未转染的HepG2细胞。结论人抑癌基因PTEN在人肝癌细胞系HepG2细胞中能够高效、稳定地表达,为其在肝癌基因治疗研究中的应用奠定了基础。
- 吴园园张利肖继贤朱晓钰纪军孙喜琢张众
- 关键词：肿瘤抑制基因PTEN基因分子克隆真核表达载体
- 反义c-met基因对人卵巢癌细胞血管生成因子的影响被引量：1
- 2009年
- 目的:用构建的c-met反义质粒阻断肝细胞生长因子(HGF)/c-met信号传导,探讨c-met信号传导阻滞对卵巢癌细胞血管内皮生长因子(VEGF)的影响。方法:将c-met基因反向克隆入真核表达载体PcDNA3.1中,酶切鉴定结果。用脂质体法将c-met反义基因转染人卵巢癌SKOV3细胞获得阳性克隆,RT-PCR检测转染前后SKOV3细胞中c-met、VEGF mR-NA的表达,蛋白印迹方法检测转染前后SKOV3细胞中VEGF蛋白的变化。结果:获得反向构建的c-met真核表达载体,c-met反义RNA转染卵巢癌细胞后,c-met和VEGF mRNA表达显著降低,VEGF蛋白表达量显著减少。结论:阻断c-met的信号传导可以明显抑制卵巢癌细胞VEGF的分泌,降低肿瘤生长转移的能力,为卵巢癌的基因治疗提供了一定的实验依据。
- 王化丽战芳朱晓钰
- 关键词：C-MET真核表达载体
- 一氧化碳中毒诱导迟发记忆障碍小鼠白细胞表面黏附分子CD_(11)b/CD_(18)表达的研究被引量：2
- 2011年
- 目的通过对一氧化碳(CO)中毒诱导迟发记忆障碍小鼠白细胞表面黏附分子CD11b/CD18表达,探索CO中毒诱发的迟发脑病发病机制。方法筛选出急性CO中毒后诱发的迟发记忆障碍小鼠,测其血白细胞表面黏附分子CD11b/CD18表达情况。结果迟发记忆障碍小鼠白细胞表面黏附分子CD11b/CD18的表达量明显高于对照组。结论 CD11b/CD18高表达可能是迟发脑病的发病机制之一。
- 彭道勇王苏平李迪张志清朱晓钰
- 关键词：一氧化碳中毒炎性反应
- Doranidazole对结肠癌细胞的放射增敏作用
- 2007年
- 目的观察放射增敏剂-Doranidazole对结肠癌细胞的放射增敏作用。方法对5种人结肠癌细胞系施行2～50Gy不同剂量放射线照射，照射后1—5d检测细胞生长及死亡率，通过克隆形成实验绘制细胞存活曲线。从时间、剂量相关性、凋亡诱导等方面评价增敏效果。结果Doranidazole对照射后细胞的生长起到显著的抑制作用，其放射增感比为1．79；5种结肠癌细胞经30Gy放射线照射后分别引起的18．7％、21．9％、16．7％、15．7％、19．5％的细胞死亡率，因Doranidazole的添加而增高至36．4％、33．8％、28．9％、22．2％、27．0％，并诱导了细胞的凋亡。这种增敏作用具有显著的时间和剂量相关性。结论Doranidazole对人结肠癌细胞系具有明确的放射增敏效果。
- 张利宫爱民纪军吴园园朱晓钰孙喜琢
- 关键词：结肠肿瘤照射脱噬作用
- 反义c-met基因对人卵巢癌SKOV3细胞增殖侵袭的影响被引量：2
- 2006年
- 目的:用构建的c-met反义质粒阻断肝细胞生长因子(hepatocytegrowthfactor,HGF)/c-met信号传导,探讨c-met信号传导阻滞对卵巢癌细胞增殖和侵袭的影响及其机制。方法:将c-met基因反向克隆入真核表达载体pcDNA3·1中,酶切鉴定结果。用脂质体法将c-met反义基因转染人卵巢癌SKOV3细胞,G418筛选获得阳性克隆,RT-PCR检测转染前后SKOV3细胞中c-met、基质金属蛋白酶-9(matrixmetalloproteinase-9,MMP-9)mRNA的表达,流式细胞仪检测转染前后SKOV3细胞中c-met和MMP-9蛋白阳性细胞数,应用细胞生长曲线和Boyden小室观察转染前后细胞的增殖和侵袭作用。结果:获得反向构建的c-met真核表达载体,c-met反义RNA转染卵巢癌细胞后,c-met和MMP-9mRNA分别减少0·24±0·03倍(P=0·001)和0·70±0·03倍(P=0·002);c-met和MMP-9蛋白阳性细胞率分别为(27·17±1·23)%和(17·32±0·46)%,较对照组(98·92±0·62)%和(36·47±2·94)%显著降低(P=0·000、0·007);卵巢癌细胞侵入基底膜的细胞数为4·5±1·5,较对照组(17±2·0)明显减少(P=0·000),细胞的增殖明显减慢。结论:c-met受体基因表达在卵巢癌生长和转移中起重要作用,阻断c-met的信号传导可以明显抑制卵巢癌细胞的增殖,降低肿瘤生长转移的能力,为卵巢癌的基因治疗提供了一定的实验依据。
- 王化丽张淑兰鲁艳明姜继勇朱晓钰
- 肝细胞生长因子对卵巢癌细胞侵袭的促进作用及信号转导途径被引量：5
- 2006年
- 背景与目的:肝细胞生长因子(hepatocytegrowthfactor,HGF)与其受体c-met特异性结合,激活多条信号转导通路,在调节肿瘤侵袭、转移和血管形成中起重要作用。HGF和c-met在卵巢癌组织中异常表达。本研究拟探讨HGF在卵巢癌的侵袭中的作用、可能机制及其信号转导途径。方法:Boyden小室体外侵袭实验检测HGF对卵巢癌SKOV3细胞穿透人工重组基底膜能力的影响;应用荧光实时定量逆转录聚合酶链反应(real-timereversetranscriptionpolymerasechainreaction,realtimeRT-PCR)、Westernblot和流式细胞术检测HGF和核转录因子(nuclearfactorκB,NFκB)抑制剂吡咯醛二硫氨基甲酸(pyrrolidinedithiocarbamate,PDTC)作用前后SKOV3细胞c-met、明胶酶B(gelatinaseB,MMP-9)mRNA和蛋白表达的变化;采用免疫细胞化学方法和Westernblot检测HGF对SKOV3细胞核NF&B蛋白的影响。结果(:1)HGF作用后,SKOV3细胞侵入基底膜的细胞数为343±13,较对照组(167±11)明显升高(P<0.01),而PDTC可以减弱HGF的促进作用(241±10,P<0.01)。(2)HGF作用后,SKOV3细胞MMP-9mRNA水平升高(5.66±0.10)倍(P<0.01),而经PDTC处理后只升高(2.75±0.80)倍(P<0.01),c-metmRNA无变化。(3)HGF作用后,SKOV3细胞c-met、MMP-9蛋白阳性率为(96.6±2.0)%和(74.6±4.4)%,较对照组(73.3±2.4)%和(16.0±2.9)%显著增高(P<0.01),c-met、MMP-9蛋白表达强度分别为2.84±0.18和2.94±0.13,较对照组1.65±0.19和0.54±0.18显著增高(P<0.01)。(4)PDTC可显著抑制HGF对SKOV3细胞蛋白表达的促进作用,MMP-9蛋白阳性率和蛋白表达强度分别为(25.8±3.7)%和0.87±0.14,与对照组和HGF组的差异有显著性(P<0.05);对c-met蛋白表达无影响(P>0.05)。(5)HGF作用后细胞核NF&B蛋白表达随时间延长而增加,于1h达高峰,表达强度为1.16±0.21,较无HGF作用的0.42±0.11明显升高(P<0.01),PDTC可显著抑制HGF对NF&B的活化作用,使NF&B的表达强度降为0.38±0.12(P<0.01)。结论:HGF促进SKOV3细胞的侵袭作用,其机制可能为HGF通过c-met调�
- 王化丽张淑兰鲁艳明姜继勇朱晓钰
- 关键词：SKOV3细胞肝细胞生长因子明胶酶B核转录因子信号转导
- Doranidazole对胰腺癌、结直肠癌细胞放射增敏的实验研究
- 张利纪军吴园园于环朱晓钰孙喜琢宫爱民母义明韩英
- 该研究利用实体肿瘤细胞放射生物学的基本原理（细胞的生长、增殖特性，细胞死亡诱导以及肿瘤细胞游走、浸润和转移特点），在不同供氧环境下对放射增敏剂-Doranidazole对胰腺和结直肠癌细胞的单次大剂量照射的增敏作用进行了...
- 关键词：
- 关键词：胰腺癌结直肠癌
- 肝细胞生长因子对卵巢癌血管生成因子的影响及信号传导途径被引量：2
- 2005年
- 目的研究肝细胞生长因子(HGF)对人卵巢癌SKOV3细胞血管内皮生长因子的影响及其信号传导机制。方法将不同浓度、不同作用时间的HGF和核转录因子(NFkB)抑制剂PDTC刺激培养的SKOV3细胞;应用逆转录-聚合酶链反应技术(RT-PCR)检测卵巢癌细胞血管内皮生长因子(VEGF)mRNA的变化;采用蛋白印迹方法检测卵巢癌细胞VEGF蛋白和核蛋白NFkB的变化。结果HGF促进卵巢癌细胞VEGF mRNA和蛋白的表达,且随时间和浓度增加作用增强,PDTC可以抑制HGF的刺激作用;HGF促进细胞核NFkB蛋白的活化,且随时间延长作用增强,于刺激1 h达高峰,PDTC可以抑制HGF对NFkB的活化作用。结论HGF通过NFkB途径在核酸和蛋白水平调节卵巢癌细胞分泌VEGF。
- 王化丽张淑兰鲁艳明姜继勇朱晓钰曾伟利
- 关键词：卵巢肿瘤肝细胞生长因子
- 银杏叶提取物对酒精所致大鼠骨骼肌损伤的保护和治疗的作用被引量：6
- 2010年
- 目的探讨银杏叶提取物(EGB761)对酒精所致大鼠骨骼肌损伤的保护及治疗作用。方法SD大鼠70只共分四组:对照组10只,酒精组20只,EGB20只,EGB预防+治疗组20只。流式细胞计数仪检测各组大鼠跖肌的细胞凋亡率,分光光度法检测丙二醛(MDA)含量,超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性的变化。结果与对照组相比,酒精组的细胞凋亡率、跖肌的MDA含量和iNOS活性升高,SOD和GSH-Px活性下降。EGB干预后,细胞凋亡率较酒精组下降,跖肌的MDA含量和iNOS活性降低下降,SOD、GSH-Px活性升高。EGB761预防配合治疗的效果优于单纯治疗的效果。结论EGB761对酒精所致大鼠骨骼肌损伤的保护及治疗作用的机制可能与其对骨骼肌细胞凋亡率,MDA,SOD,GSH-Px和iNOS的调节有关。
- 初海鹰王昊王剑锋张利纪军朱晓钰金伟
- 关键词：慢性酒精中毒性肌病细胞凋亡银杏叶提取物
- 一氧化碳中毒迟发记忆障碍小鼠海马神经细胞凋亡的初步研究被引量：18
- 2006年
- [目的]通过对一氧化碳中毒迟发记忆障碍小鼠海马神经细胞凋亡的研究,探索一氧化碳中毒迟发脑病的发病机制。[方法]筛选出急性中毒记忆受损恢复后又再一次出现记忆保持能力下降的迟发记忆障碍小鼠,测其海马神经细胞凋亡及其调控基因Bax、Bcl-2表达。[结果]急性一氧化碳中毒小鼠中有10%出现迟发记忆障碍,迟发记忆障碍小鼠血浆碳氧血红蛋白正常;其海马神经细胞凋亡显著增加(P<0.01);凋亡调控基因Bax/Bcl-2值增加(P<0.05)。[结论]一氧化碳中毒小鼠迟发记忆障碍与其海马神经细胞凋亡具有相关性,神经细胞凋亡在迟发性脑病的发病机制中起着重要的作用。
- 彭道勇王苏平张志清李迪朱晓钰
- 关键词：一氧化碳中毒海马神经细胞凋亡凋亡调控基因
