曾超
- 作品数：6 被引量：11H指数：2
- 供职机构：天津医科大学更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金国家自然科学基金天津市卫生局科技基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- SHR大鼠心肌组织AngⅡ和TGF-β/Smads变化与心室重构的关系及依那普利干预效果
- 研究目的：本研究选用自发性高血压大鼠(SHR)为研究对象，并构建心室重构大鼠模型，运用依那普利行降压治疗，探究依那普利改善心室重构与心肌组织中AngII和TGF-β/Smads相关蛋白变化的关系。 研究内容和方法：(1...
- 曾超
- 关键词：心室重构SMADS蛋白依那普利干预效果
- PKH26标记结合活体荧光成像技术在椎间盘组织工程研究中的应用被引量：1
- 2013年
- 目的体外评估PKH26标记对山羊髓核细胞生物学功能的影响,并结合活体荧光成像系统评价种子细胞在裸鼠体内的生物学行为。方法取1岁龄山羊椎间盘分离髓核组织,通过酶消化法获取原代细胞,倒置相差显微镜下观察,传代获取第1代髓核细胞,行PKH26荧光标记,荧光显微镜下观察标记后的细胞荧光强度,并行甲苯胺蓝和Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色观察,锥虫蓝染色比较标记前后细胞活性,MTT法检测标记前后细胞增殖特性,实时荧光定量PCR检测细胞Ⅰ、Ⅱ型胶原及蛋白聚糖基因表达。将标记后的髓核细胞接种至一体化纤维化-髓核支架的髓核部分,纤维环部分作为阴性对照,体外培养3 d后植入5只6周龄雄性裸鼠体内,培养6周后活体成像技术检测髓核细胞-支架复合物在体内的荧光强度及范围。结果倒置相差显微镜观察示原代髓核细胞簇状生长,呈卵圆形,第1代髓核细胞呈类软骨样细胞形态;标记后的第1代髓核细胞甲苯胺蓝染色和Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色均呈阳性;标记后荧光强度均匀,标记前后细胞活性均在95%以上;标记前后细胞生长曲线比较差异无统计学意义(P>0.05);实时荧光定量PCR检测示标记前后细胞Ⅰ、Ⅱ型胶原和蛋白聚糖基因相对表达量差异均无统计学意义(P>0.05)。活体成像技术显示体内髓核支架有强烈荧光,纤维环支架未见荧光。结论 PKH26标记对髓核细胞的活性、增殖及细胞表型的表达无明显影响,结合体内活体荧光成像系统可以追踪细胞在体内的生物学行为。
- 伍耀宏徐宝山杨强李秀兰张杨马信龙夏群张春秋许海委曾超
- 关键词：山羊
- 新型丝素蛋白多孔支架复合兔髓核细胞体外构建组织工程化髓核的实验研究被引量：1
- 2014年
- [目的]观察以新型丝素蛋白多孔支架复合兔髓核细胞体外构建组织工程化髓核的可行性。[方法]分离培养兔髓核细胞,与丝素蛋白多孔支架在体外复合培养,建立组织工程化髓核模型,通过扫描电镜、HE染色、甲苯胺蓝染色、Ⅱ型胶原免疫组化以及酶联免疫吸附测定观察细胞在支架上1周和3周的生长及增殖情况。[结果]培养1周后,扫描电镜显示细胞呈球状均匀地贴附在支架内部。细胞-支架复合体HE染色可见支架内部有大量髓核细胞,甲苯胺兰染色阳性,Ⅱ型胶原免疫组化染色阳性。培养3周后,扫描电镜显示细胞成层黏附于支架表面,细胞重叠生长,分泌大量细胞外基质,HE染色可见支架内部有大量髓核细胞填满支架孔隙并分泌大量细胞外基质,甲苯胺兰染色阳性,Ⅱ型胶原免疫组化染色阳性。酶联免疫吸附测定:3周组蛋白多糖含量(52.4±4.5)ng/ml明显高于1周组(29.3±3.6)ng/ml,P<0.05,3周组的II型胶原含量(24.3±1.8)ng/ml明显高于1周组(15.16±1.5)ng/ml,P<0.05。[结论]新型丝素蛋白多孔支架复合兔髓核细胞体外培养生长良好,分泌大量类似髓核样细胞外基质,可以用于体外构建组织工程化髓核。
- 曾超朱美峰徐宝山杨强王连永李秀兰张杨马信龙夏群杜立龙丁晓明刘英
- 关键词：丝素蛋白髓核细胞
- 新型丝素蛋白支架复合兔髓核细胞体内初步构建组织工程髓核的研究被引量：1
- 2014年
- 目的探讨新型丝素蛋白多孔支架复合经PKH26标记的兔髓核细胞初步构建组织工程髓核的可行性。方法消化分离兔髓核细胞,培养获取P1代细胞,对P1代髓核细胞行番红O以及Ⅱ型胶原免疫组织化学染色;PKH26标记兔髓核细胞,MTT法检测标记前后髓核细胞增殖情况,将标记后的细胞接种支架,体外培养4 d后,将细胞-支架复合物植入裸鼠皮下,体内培养12周后,进行活体荧光成像技术检测、HE染色、甲苯胺蓝染色、番红O染色和Ⅱ型胶原免疫组化染色。结果 P1代髓核细胞番红O染色阳性,Ⅱ型胶原免疫组织化学染色阳性;标记后细胞荧光强度分布均匀,标记前后髓核细胞光密度(OD)值比较差异无统计学意义(P>0.05);活体成像技术显示裸鼠皮下植入的细胞-支架复合体呈现强烈荧光;HE染色见多孔支架内壁有大量髓核细胞填满并分泌大量细胞外基质;甲苯胺蓝染色、番红O染色及Ⅱ型胶原免疫组化染色均呈阳性,细胞周围大量细胞外基质分泌。结论以新型丝素蛋白多孔支架复合兔髓核细胞经体内培养形成的类髓核样组织,可用于组织工程化髓核的构建。
- 赵家宁徐宝山曾超杨强马信龙张春秋李秀兰张扬
- 关键词：丝素蛋白免疫组织化学髓核PKH26
- 丝素蛋白多孔支架与兔髓核细胞生物相容性研究被引量：4
- 2013年
- [目的]以丝素蛋白为原料制备三维多孔髓核支架,并探讨其与兔髓核细胞的生物相容性。[方法]以丝素蛋白为原料,采用蜡球致孔结合相分离技术制成三维多孔支架;从兔椎间盘中分离出髓核细胞,培养后获取P1代细胞;四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测支架浸提液毒性;将髓核细胞以1×107/ml密度接种在丝素支架上体外培养48 h,通过HE染色、死活细胞染色(LIVE/DEAD染色)、扫描电镜观察细胞在支架上的粘附及活性。[结果]丝素蛋白多孔支架在敷水状态下呈光滑乳白色,分离的髓核细胞呈典型的软骨细胞样形态;经MTT检测支架浸提液对髓核细胞增殖无影响;HE染色和扫描电镜可见髓核细胞呈球状或短梭形均匀地贴附在支架内部。LIVE/DEAD染色显示全部为绿色荧光(活细胞),未见红色荧光(死细胞)。[结论]丝素蛋白多孔支架与兔髓核细胞具有良好的生物相容性,可以作为髓核组织工程的支架材料。
- 曾超朱美峰徐宝山杨强王连永李秀兰张杨夏群许海委许海委
- 关键词：丝素蛋白髓核细胞生物相容性
- 不同脱细胞方法对猪尾纤维环生物力学特性及组织结构的影响被引量：2
- 2013年
- 目的探讨不同脱细胞处理方法对猪尾椎间盘纤维环生物力学特性及组织结构的影响,为构建组织工程纤维环提供实验依据。方法取新鲜猪尾纤维环60个,随机分为4组,每组15个。Triton X-100组(A组):先将纤维环放入Tris-HCl低渗缓冲液中振荡48 h,再用TritonX-100、DNaseⅠ和RNase A对纤维环脱细胞处理;SDS组(B组):将纤维环冻融3次,接着用SDS、DNaseⅠ和RNase A对纤维环脱细胞处理;胰蛋白酶组(C组):用含胰蛋白酶、DNaseⅠ和RNase A的Tris缓冲液对纤维环脱细胞处理;对照组(D组):纤维环不做任何处理。采用HE染色与扫描电镜方法,观察各组脱细胞情况以及纤维环超微结构的变化;采用生物化学和生物力学方法检测各组纤维环的胶原含量、氨基葡聚糖(GAG)含量及力学参数。结果与对照组比较,HE染色及扫描电镜可见A、B、C 3组均无细胞残留;A组纤维环超微结构未见破坏,C组纤维环超微结构可见轻度破坏,B组纤维环超微结构可见明显破坏。A、B、C 3组纤维环胶原含量与对照组比较无统计学差异(P>0.05),但GAG含量均明显低于对照组(P<0.05)。A、C两组的力学参数(极限载荷、极限应力、韧度、弹性模量、断裂功耗)与对照组无统计学差异(P>0.05),B组上述力学参数均低于对照组(P<0.05)。结论 Triton X-100组处理后的猪尾椎间盘纤维环无细胞残留,结构无破坏,基质成分及力学性能保存良好,适合于构建组织工程纤维环。
- 许海委徐宝山杨强李秀兰马信龙夏群张春秋伍耀宏曾超
- 关键词：脱细胞纤维环力学特性生物力学
