曾宪芳
- 作品数：167 被引量：600H指数：17
- 供职机构：中南大学更多>>
- 发文基金：World Health Organization国家自然科学基金湖南省科技厅资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学建筑科学更多>>
- 佐剂FCA与Quil A对rGST-Sj32的免疫增强作用的比较被引量：11
- 2001年
- 目的 比较弗氏完全佐剂 (FCA)与皂素的纯化物 Quil A的免疫增强作用 ,进一步提高重组抗原 r GST- Sj32的免疫效果。 方法 r GST- Sj32 +FCA或 Quil A免疫 NIH小鼠 3次 ,EL ISA法检测抗体水平 ,用减虫率及减卵率表示保护效果。 结果 与 PBS对照组比较 ,r GST- Sj32 +FCA免疫小鼠减虫率为 42 .9% ,每克肝卵 (L EPG)减少率 5 1.0 % ,每雌肝卵 (L EPF)减少率为 2 3.9% ,抗体滴度达 1∶ 2 5 6 0 0。r GST- Sj32 +Quil A免疫小鼠减虫率为 46 .0 % ,L EPG减少率39.4% ,L EPF减少率为 8.5 % ,抗体滴度达 1∶ 5 12 0 0。 结论 FCA和 Quil A均可增强 r GST- Sj32免疫小鼠的抗感染保护性免疫力 ;FCA亦可增强 r GST- Sj32诱导小鼠抗生殖免疫 ,Quil A无增强抗生殖免疫的作用。
- 田明礼易新元曾宪芳彭先楚曾庆仁Larry McReynolds
- 关键词：日本血吸虫弗氏完全佐剂重组抗原
- 日本血吸虫成虫表膜抗原的诊断效果及疗效考核价值被引量：17
- 2000年
- [目的 ]探讨日本血吸虫成虫表膜抗原 (Sj MAg)检测日本血吸虫病患者的特异性和敏感性及考核疗效价值。 [方法 ]采用 Sj MAg- EL ISA检测治疗前、后不同时期血吸虫病患者血清中特异性 Ig G、 Ig G4及健康人、并殖吸虫、华支睾吸虫及囊尾蚴病患者血清中的交叉抗体。 [结果 ]Sj MAg的敏感性和特异性与可溶性虫卵抗原(Sj SEA)比较 ,无显著性差异 (P>0 .0 5 ) ;用 Sj MAg- EL ISA检测治疗后 12个月患者血清中 Ig G的阴转率为80 .0 % ,显著高于 SEA- EL ISA的 43.3% ,而检测 Ig G4的阴转率为 93.3% ,显著高于 Sj SEA- EL ISA的 6 0 % ,检测治疗后 2 4个月患者血清中 Ig G和 Ig G4的阴转率分别达 92 .9%和 97.6 %。 [结论 ]Sj MAg- EL ISA检测日本血吸虫病具有与 Sj SEA- EL ISA相同的诊断价值和较高的考核疗效价值。
- 张顺科易新元舒新华李忠杰曾庆仁周金春曾宪芳
- 关键词：日本血吸虫病
- ELISA检测特异性IgG4诊断肺吸虫病的效果观察被引量：11
- 2001年
- 目的 探讨用酶联免疫吸附试验 (EL ISA)检测特异性 Ig G4诊断肺吸虫病的效果。 方法 采用 EL ISA法检测了肺吸虫病病人血清中的特异性 Ig G和 Ig G4抗体及肝吸虫、囊虫、旋毛虫、日本血吸虫病病人和正常人血清中的交叉抗体。 结果 检测肺吸虫病病人血清中 Ig G4的敏感性为 95 .35 % ,检测正常人血清的特异性为 10 0 % ,与常规使用的酶联葡萄球菌 A蛋白 (HRP- SPA)检测结果及检测 Ig G结果比较差异无显著性 (P均 >0 .0 5 ) ;与其他寄生虫病病人血清中的交叉反应率 ,Ig G4显著低于用常规 HRP- SPA检测结果。 结论 EL ISA法检测肺吸虫病病人血清中特异性 Ig G4具有较高的诊断应用价值。
- 张顺科曾宪芳易新元李忠杰
- 关键词：肺吸虫病酶联免疫吸附测定IGG4血清学诊断
- 日本血吸虫新抗原基因的筛选、克隆、表达和免疫效果研究被引量：7
- 2005年
- 为了寻找日本血吸虫(Schistosomajaponicum,Sj) 新的疫苗候选基因并进行免疫效果研究,用Sj雌虫抗原免疫家兔制备血清,对Sj成虫cDNA文库进行免疫筛选,将获得的新基因(命名为Sj-F1,GenBank登录号为AY261995) 克隆入原核表达载体pTWIN1和真核表达载体pcDNA3,经PCR、限制性酶切筛选和鉴定阳性重组子. 将pTWIN1/Sj-F1质粒转化大肠杆菌ER2566,在低温和低IPTG浓度下诱导表达可溶性重组融合蛋白(rSj-F1/intein2),并经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹(Western blot)分析鉴定. 将pcDNA3/Sj-F1质粒转化大肠杆菌ER2502,大量制备DNA疫苗. 用重组融合蛋白和DNA疫苗免疫小鼠,末次免疫后2周用Sj尾蚴进行攻击感染. 感染后42天剖杀冲虫,计算减虫率和减卵率. 感染前采血用ELISA法检测抗体. 免疫保护效果测定显示:重组蛋白疫苗以FCA作佐剂经皮下免疫和以壳聚糖作佐剂经粘膜免疫分别获得了28.07%、24.69%的减虫率和48.30%、46.38%的减卵率;DNA疫苗(pcDNA3/Sj-F1)单独免疫获得了18.47%的减虫率和35.06%的减卵率;用DNA疫苗启动免疫后用重组蛋白疫苗经皮下加强免疫,减虫率和减卵率分别提高到了40.42%和56.17%;用DNA疫苗启动免疫后用重组蛋白疫苗经黏膜加强免疫,减虫率和减卵率增高更明显,分别提高到了42.38%和62.
- 陈利玉易新元曾宪芳蔡春L.McREYNOLDS
- 关键词：日本血吸虫免疫筛选雌虫免疫
- 日本血吸虫铁蛋白基因的筛选、克隆与表达被引量：21
- 1998年
- 采用Ｓｊ未成熟虫卵抗原超免疫兔血清（ＲＡＳｊＩＥＡ）对Ｓｊ成虫ｃＤＮＡ文库进行筛选，并对可能具有抗日本血吸虫生殖／卵胚发育潜能的抗原分子进行克隆、表达。常规法免疫筛选Ｓｊ成虫文库，获得单个阳性克隆，ＰＣＲ扩增后琼脂糖电泳测定基因大小，ＤＮＡ测序，基因库搜索，找出同源基因。共鉴定出６个不同的基因克隆。选择其中的铁蛋白（ＳｊＦｅｒ）基因亚克隆于ｐＧＭＣ载体。重组蛋白以ＧＭＣＳＦ（粒细胞巨噬细胞集落刺激因子）－ＳｊＦｅｒ融合蛋白的形式在细菌中高效表达。表达产物仅溶于８Ｍ尿素溶液中，分子量为４０ｋＤ。
- 易新元曾宪芳周金春蔡春舒新华
- 关键词：日本血吸虫铁蛋白基因克隆基因表达
- DNA杂交鉴定血吸虫种株的研究被引量：6
- 1993年
- 曼氏血吸虫及日本血吸虫成虫基因组DNA经内切酶BglII、BamHI、XbaI、或EcoRI消化后,与^(32)P标记的pSM889探针杂交,或经EcoRI消化后与pSM389探针杂交。上述两种情况下的杂交带型在两种血吸虫之间均有明显区别。日本血吸虫湖北、湖南、江西、浙江及云南隔离群成虫基因组DNA经EcoRI消化后与探针pSM389的杂交带型显示各隔离群间主带相同,而次要带则有不同程度的区别。其中湖南、湖北及浙江隔离群的次要带型互相接近,而江西及云南隔离群的次要带型与前3个隔离群有明显区别,它们二者之间亦显著不同。本工作表明非主要杂交带型可作为日本血吸虫种下分类的依据。
- 曾宪芳David RollinsonTina K Walker易新元
- 关键词：血吸虫曼氏血吸虫DNA杂交
- 日本血吸虫在大鼠体内的发育及其引起的病理变化被引量：7
- 2002年
- 目的 观察日本血吸虫 (Schistosomajaponicum ,Sj)在大鼠体内的发育及其引起的病理变化。方法 以小鼠为对照 ,光镜下比较感染后第 4d、7d、14d大鼠与小鼠体内童虫的形态学及第 4 5d虫卵肉芽肿反应 ,用电镜观察两种鼠系肺内 4d龄童虫的体表特征。结果 感染后 4～ 7d ,大鼠肺期童虫周围出现严重的炎症反应 ,虫体体壁可见不同程度的损伤 ;感染后第14d ,大鼠体内童虫的形态及大小与小鼠体内的童虫相似 ,炎症反应减轻。感染后第 4 5d大鼠体内的雌虫比雄虫小 ,但雌雄虫均显著小于相应小鼠体内的成虫 (P <0 0 0 1)。经测定 ,大鼠肝内单个虫卵引起的肉芽肿平均直径明显小于小鼠肝内的相应病变 (P <0 0 1)。结论 Sj在大鼠体内发育差 ,引起的病理损害较小 ,这些特征可能与大鼠先天抗血吸虫感染免疫有关。
- 周东明易新元曾宪芳王敏黄复深
- 关键词：日本血吸虫发育病理变化动物实验宿主
- 宿主抗感染相关基因研究进展
- 2002年
- 王庆林曾宪芳易新元
- 关键词：动物模型宿主
- 日本血吸虫尾蚴细胞对小鼠免疫保护性的初步研究被引量：2
- 2004年
- 王敏曾宪芳李先平章洁张顺科周东明易新元
- 关键词：日本血吸虫免疫保护力体外培养小鼠
- 日本血吸虫CAI基因的亚克隆表达与免疫保护效果研究
- 2003年
- 目的 克隆和表达日本血吸虫 (Schistosomajaponicum ,Sj)CAI基因 ,并对表达产物进行免疫保护效果测定 ,评价其作为血吸虫疫苗候选分子的潜能。 方法 将SjCAI基因亚克隆至pGEX 5X 3载体 ,转化入感受态大肠杆菌ER2 56 6 ,在异丙基 β D 硫代半乳糖苷 (IPTG)诱导下进行表达 ,用表达产物免疫小鼠 ,并设分别注射等体积的弗氏完全佐剂和PBS的两组对照组 ,观察免疫保护效果。 结果 在IPTG诱导下 ,表达载体中的SjGST基因与重组的SjCAI基因在大肠杆菌中获得了高效融合表达 ,将其免疫小鼠 ,诱导产生了 2 9.87%的减虫率和 6 3.71 %的减卵率。 结论 SjCAI基因亚克隆至pGEX 5X 3载体后可在大肠杆菌中高效表达 。
- 罗秀菊袁仕善易新元曾宪芳张顺科唐连飞蔡春章洁Larry McReynolds
- 关键词：日本血吸虫免疫保护基因表达亚克隆
