敬凌霞
- 作品数：4 被引量：14H指数：2
- 供职机构：重庆医科大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 抗CP4-EPSPS单克隆抗体的制备和生物学特性的鉴定被引量：8
- 2007年
- 目的制备可用于胶体金快速检测试条的抗CP4-EPSPS(5-enolpyruvlshimimate-3-phosphate synthase)单克隆抗体(mAb),并鉴定其特性。方法以重组蛋白CP4-EPSPS免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗CP4-EPSPS的mAb,以间接ELISA法和Western blot进行mAb特异性鉴定;同时采用间接ELISA法鉴定mAb的Ig亚类,检测mAb的效价及相对亲和力,并进行mAb结合表位分析。结果获得2株可分泌特异性mAb的杂交瘤细胞(Ⅲ5A3,Ⅲ13A2)。其抗体亚类均为IgG1;腹水效价分别为1∶106和1∶108;相对亲和力Ⅲ5A3在105以上,Ⅲ13A2在106以上。ELISA相加实验结果显示2株mAb识别相同或相近的抗原表位。结论成功地制备出抗CP4-EPSPS的2株mAb,为建立快速特异检测转基因植物(GMO)的实验方法提供了有力的工具。
- 敬凌霞蔡雪飞慕生枝刘湘张君唐霓郑建黄爱龙
- 关键词：单克隆抗体生物学特性GMO
- 重组抗原CP_4-EPSPS的表达及免疫学活性研究被引量：4
- 2006年
- 目的:表达并纯化重组CP4-EPSP合成酶(CP4-EPSPS),研究重组CP4-EPSPS的免疫学活性;为进一步制备单克隆抗体和开发检测CP4-EPSPS的快速诊断试剂奠定基础。方法:诱导表达含转基因大豆CP4-EPSPS的重组载体pET-EPSPS,经Ni-NTA琼脂糖树脂亲和层析纯化,以ELISA、胶体金试条、W estern杂交鉴定其免疫活性。结果:重组CP4-EPSPS以包涵体表达为主,上清表达量极低,但胶体金试纸条检测发现上清中CP4-EPSPS抗原活性强;复性包涵体的抗原性与上清的抗原性明显不同。采用扩大培养量、缩小超声破碎重悬体积的方法,从上清中纯化CP4-EPSPS获得成功,ELISA检测此重组抗原免疫小鼠血清抗体滴度可达到1:625,000;W estern杂交证实重组抗原免疫血清与CP4-EPSPS标准品有较好的免疫反应性。结论:包涵体的简单复性方法难以恢复其关键的抗原决定簇的免疫原性;运用胶体金试纸条检测重组CP4-EPSPS活性,灵敏度高,简单快捷,对CP4-EPSPS特异检测相关的关键性抗原决定簇的甄别有重要作用,可指导重组抗原的纯化和在免疫学研究、特别是在单克隆抗体开发中的应用。
- 唐霓Yu XiangHelen KeZhihui Yao敬凌霞黄爱龙郑建
- 关键词：纯化
- 转基因植物及其产品检测技术研究进展
- 2006年
- 20世纪末,随着以基因工程为特征的现代生物技术的飞速发展,转基因技术在食品资源改造中得到广泛应用.目前转基因食品大多来源于转基因植物(genetically modified organisms GMO),对于转基因食品的检测主要有以针对插入的转基因DNA序列为目标的检测方法,和以外源蛋白为目标的检测方法.……
- 敬凌霞郑建黄爱龙
- 抗CP4-EPSPS单克隆抗体的制备和生物学特性的研究
- 目的：随着各种各样转基因食品通过贸易大量进入国际市场，转基因食品的安全性受到人们日益关注，世界各国对转基因食品的安全性存在着较大的争议，欧盟、日本等地区已经制定了相关法规对转基因食品进行了严格的管理。以孟山都(Monsa...
- 敬凌霞
- 关键词：单克隆抗体转基因植物食品安全
- 文献传递
