徐志胜
- 作品数：45 被引量：136H指数：8
- 供职机构：南京农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”江苏省杰出青年基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 类胡萝卜素裂解双加氧酶基因AgCCD4调控芹菜不同组织的着色被引量：5
- 2021年
- 【目的】研究类胡萝卜素裂解双加氧酶基因AgCCD4在不同颜色芹菜中的基因型及相对表达量,结合类胡萝卜素含量测定,分析AgCCD4对芹菜组织中类胡萝卜素积累的影响,为进一步研究CCD亚家族基因在不同颜色芹菜组织着色中的作用奠定基础。【方法】采用同源比对法检索芹菜基因组中的CCD家族基因AgCCD4。从‘津南实芹’‘黄太极’‘紫杆一号’和‘赛雪’4种不同颜色芹菜中分别克隆获得芹菜类胡萝卜素裂解双加氧酶基因AgCCD4。对芹菜AgCCD4的蛋白氨基酸序列组成、蛋白质理化性质、亲缘关系、空间结构等进行分析,预测其保守结构域和二级结构以及建立三级结构模型。采用荧光定量PCR技术检测AgCCD4在不同颜色芹菜不同组织中的表达水平。采用超高效液相色谱(UPLC)对4种颜色芹菜的叶片、叶柄和根中叶黄素和β-胡萝卜素的含量进行测定。采用农杆菌介导的瞬时表达转化法,研究AgCCD4蛋白在烟草表皮细胞中的亚细胞定位。【结果】序列分析结果表明AgCCD4包含1个长度为1779 bp的开放阅读框(ORF),编码592个氨基酸。‘赛雪’中AgCCD4的核苷酸序列与其他品种相比存在18个碱基和9个氨基酸位点的差异,蛋白质相对分子质量分别为65.07 kD和65.12 kD,等电点分别为6.03和5.95。进化树分析表明,芹菜AgCCD4与菊科的向日葵和莴苣CCD4进化关系较近。AgCCD4蛋白的二级结构中包含多个α-螺旋和无规则卷曲,三级结构主要以β-折叠为主。亚细胞定位分析表明AgCCD4是一个定位在叶绿体上的蛋白。对4种颜色芹菜叶片、叶柄和根中叶黄素和β-胡萝卜素的含量进行测定,结果显示芹菜根中均未检测到叶黄素和β-胡萝卜素,叶片中叶黄素和β-胡萝卜素含量均以‘津南实芹’最高,分别为1102.58μg·g^(-1) DW和241.92μg·g^(-1)DW,‘紫杆一号’最低,分别为57.12μg·g^(-1) DW和45.65μg·g^(-1) DW。在叶柄中,仅在�
- 王昊尹莲刘洁霞贾丽丽丁旭沈迪冯凯徐志胜熊爱生
- 关键词：芹菜亚细胞定位基因表达类胡萝卜素
- 胡萝卜光合特性昼夜节律及生物钟基因DcRVEa和DcRVEb响应光周期分析
- 2023年
- 为了解胡萝卜生物钟相关基因REVEILLEs (RVEs)在昼夜节律中的分子调控机制,从胡萝卜基因组中检索获得DcRVEa和DcRVEb基因。对两个光周期不同时间点胡萝卜叶片进行光合参数测定,利用实时荧光定量PCR技术对DcRVEa和DcRVEb基因表达量进行检测与分析。结果显示:DcRVEa和DcRVEb分别含有304和307个氨基酸,均为亲水性蛋白;二级结构以α-螺旋和随机卷曲为主。胡萝卜RVE蛋白序列与其他物种同源性序列相似度为66.69%;DcRVEa与莲(Nelumbo nucifera)进化关系较近, DcRVEb与橡胶树(Hevea brasiliensis)进化关系较近。蛋白互作网络分析结果显示,胡萝卜DcRVEa和DcRVEb与LNK1、LNK2、CCA1、TOC1等生物钟核心元件具有较直接的作用。在两个光周期(48 h)中,胡萝卜叶片净光合速率(P_(n))、气孔导度(G_(s))和蒸腾速率(T_(r))在白天处于较高水平,胞间CO_(2)浓度(Ci)则相反。实时荧光定量PCR结果显示,在两个光周期(48 h)中, DcRVEa和DcRVEb的相对表达量均在黑暗条件下达到峰值。DcRVEa和DcRVEb的表达趋势相似,均响应昼夜节律的变化。本文研究结果为进一步研究胡萝卜生物钟基因DcRVEa和DcRVEb的分子机制提供参考。
- 张楠胡志航周建华刘慧王雅慧张雨晴王荟茹徐志胜熊爱生
- 关键词：胡萝卜生物钟光合特性
- 芹菜热激转录因子基因AgHSFB2的克隆及不同温度处理下的表达响应被引量：8
- 2015年
- [目的]热激转录因子HSF(heat shock transcription factor)在植物遭遇高温胁迫时起关键的调节作用,研究芹菜热激转录因子基因及相关蛋白的结构、功能对探究芹菜耐热机制、培育耐热新品种有重要作用。[方法]以‘六合黄心芹’‘津南实芹’和美国西芹‘文图拉’为试验材料,分离并克隆出Ag HSFB2基因,分析相关序列并采用实时定量荧光PCR技术检测该基因在不同温度(4、38和42℃)下的表达响应情况。[结果]研究发现该基因含有1个918 bp的开放阅读框,编码305个氨基酸。推测其蛋白质相对分子质量为34 048,理论等电点p I值为5.09。芹菜Ag HSFB2与拟南芥中HSF蛋白进行比对构建进化树,发现Ag HSFB2与拟南芥HSFB2a和HSFB2b进化距离最近,该基因属于HSFB2亚族。芹菜Ag HSFB2与茄科的番茄、马铃薯相应蛋白的亲缘关系较近。Ag HSFB2蛋白的高级结构主要由3个α螺旋和4个β折叠组成。Ag HSFB2基因主要在芹菜的叶中表达,具有组织、品种特异性,同时对4、38和42℃等多种温度信号有明显响应。该基因对温度胁迫的响应时间和强度有品种的差异:4和38℃处理下‘文图拉’均在2 h有明显上调表达;42℃处理下‘津南实芹’和‘文图拉’均在1 h有明显上调表达。[结论]高温胁迫下Ag HSFB2基因可诱导下游热激蛋白大量表达,帮助植物抵御高温胁迫所带来的伤害。
- 李岩徐志胜谭国飞贾晓玲王枫熊爱生
- 关键词：芹菜克隆温度处理
- 葡萄VvUGT72B1基因和杨树PtUGT72B1基因的合成与功能鉴定
- 一些酚类化合物(PhenolicCompounds，PCs)及3，4-二氯苯胺(Dichloroaniline，DCA)对生物体具有致癌性、致畸性和致突变性。这些物质中许多是农药、防腐剂、消毒剂和偶氮染料等合成和代谢的中...
- 徐志胜
- 关键词：葡萄杨树异源表达植物修复
- 文献传递
- 胡萝卜WRKY69基因(DcWRKY69)的克隆及其对不同植物生长调节剂的响应被引量：2
- 2019年
- 以胡萝卜品种‘黑田五寸’(Daucus carota var.sativa‘Heitian Wucun’)为研究对象,采用RT-PCR技术从叶片cDNA中克隆获得DcWRKY69基因片段,并对该基因及其编码的氨基酸序列进行生物信息学分析;同时,采用RT-qPCR技术比较了0.1 mmol·L^-1茉莉酸甲酯(MeJA)、1.0 mmol·L^-1水杨酸(SA)、0.1 mmol·L^-1赤霉素(GA3)和0.1 mmol·L^-1脱落酸(ABA)处理12 h内叶中DcWRKY69基因相对表达量的差异。结果表明:DcWRKY69基因包含1个长度为783 bp的开放阅读框(ORF),编码260个氨基酸;DcWRKY69转录因子氨基酸序列在第52至第110位含有1个WRKY结构域,其锌指结构类型为C2 H2型,理论相对分子质量为30030,理论等电点为pI 4.78;该转录因子含有34个磷酸化位点,无信号肽和跨膜结构,亲水性氨基酸较多,且酸性氨基酸比例最高(27%);该转录因子的二级结构由α-螺旋、β-折叠、延伸链和随机卷曲组成,比例分别为21.92%、4.23%、11.92%和61.92%。序列比对和系统进化树分析结果表明:WRKY转录因子在植物进化过程中具有高度的保守性。RT-qPCR分析结果表明:经MeJA、SA、GA3和ABA处理后,DcWRKY69基因相对表达量的变化趋势不同,分别在处理后8、12、1和4 h达到峰值,且显著高于对照(处理0 h)。研究结果显示:DcWRKY69转录因子属于Ⅱ类WRKY转录因子,为亲水性蛋白,且可能属于非分泌蛋白;DcWRKY69基因可能参与胡萝卜对不同植物生长调节剂的响应过程,但其对不同植物生长调节剂的响应模式存在差异。
- 张榕蓉王雅慧李彤丁旭徐志胜熊爱生
- 关键词：胡萝卜基因克隆植物生长调节剂
- 胡萝卜低温胁迫转录因子DcICE1基因克隆与非生物逆境响应分析被引量：7
- 2015年
- 植物ICE1基因是调控CBF基因表达的上游调控因子,在植物抵抗逆境胁迫中具有重要的作用。该实验以2个胡萝卜品种‘黑田五寸’和‘君川红’为实验材料,分别克隆出DcICE1转录因子基因,并通过荧光定量PCR方法测定了4种不同逆境胁迫下(4℃低温、38℃高温、0.2mol·L-1 NaCl及200g·L-1 PEG)DcICE1基因的表达情况,探讨DcICE1转录因子在植物抵抗非生物胁迫下的功能。序列分析显示,该基因全长1 458bp,编码485个氨基酸。2个胡萝卜品种的DcICE1基因在核苷酸水平上有2个位点的差异,分别为第139位的G/A和第475位的A/G,导致编码的氨基酸在第47位的E/K和第159位的N/D差异,该差异可能与DcICE1转录因子在2个不同品种应对逆境胁迫下的响应不同有关。胡萝卜DcICE1转录因子有一个保守的ICE1功能结构域。实时定量PCR检测DcICE1基因在不同逆境胁迫下的响应表明,低温(4℃)处理能明显地诱导DcICE1基因的表达,但盐(0.2mol·L-1 NaCl)和干旱(200g·L-1 PEG)处理下的诱导效果均不明显。
- 黄莹徐志胜王枫李梦瑶马静熊爱生
- 关键词：胡萝卜基因克隆非生物胁迫
- 一种与芹菜非生物胁迫相关的转录因子AgbZIP16基因序列及其应用
- bZIP转录因子家族属于转录因子家族中数目庞大的一种，并且十分保守，参与植物生长发育、代谢调节以及生物和非生物胁迫响应。本专利从两个芹菜品种‘六合黄心芹’和‘文图拉’中克隆了一个新的bZIP类转录因子基因AgbZIP16...
- 熊爱生沈迪徐志胜刘洁霞
- 文献传递
- 植物类胡萝卜素合成相关蛋白DcAPRR2及其编码基因与应用
- 本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种植物类胡萝卜素合成相关蛋白DcAPRR2及其编码基因与应用。本发明的蛋白质是如下任一种的蛋白质：A1)氨基酸序列如SEQ ID No .2所示的蛋白质；A2)将A1)的蛋白质经过氨基酸...
- 徐志胜张凯熊爱生王璐
- 一种与芹菜非生物胁迫响应相关的AgHAT4基因序列及其应用
- HD‑Zip是高等植物特有的一类转录因子，在植物应对环境胁迫中起着重要的调节作用，HAT4是该转录因子家族中的一员。本专利从芹菜中克隆得到AgHAT4基因。该基因开放阅读框长为900bp，编码299个氨基酸。AgHAT4...
- 熊爱生尹莲徐志胜冯凯刘洁霞
- 苏北地区冬季大棚胡萝卜栽培技术
- 2024年
- 胡萝卜(Daucus carota L.)是重要的根菜类蔬菜作物,喜温耐寒,适宜在土层深厚的砂壤土中生长。利用大棚栽培胡萝卜,在管理、产量、品质、效益等方面具有明显优势。综合利用提前播种、覆盖地膜和设施栽培等技术,可灵活调节温度、湿度、光照等环境因素,有效解决胡萝卜在冬季生产过程中遇到的困难。主要从播前准备、播期及播种方法、田间管理、病虫害防治和科学采收等方面对大棚胡萝卜的科学栽培进行总结,以期对苏北地区大棚胡萝卜栽培提供技术指导。
- 张旭王俐翔周建华梁毅王雅慧陈晨谭国飞徐志胜陈月珍王广龙束胜熊爱生
- 关键词：胡萝卜大棚栽培
