彭玮丹
- 作品数：20 被引量：139H指数：7
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 紫杉醇诱导食管癌细胞的细胞周期阻断与细胞凋亡被引量：20
- 1998年
- 目的研究紫杉醇对食管癌细胞的细胞周期阻断及诱导凋亡的作用。方法应用形态学观察、琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术等方法对紫杉醇诱导的食管癌细胞系Eca109进行了检测和观察。结果紫杉醇可将食管癌细胞阻断于G0／G1期及G2／M期并诱导其凋亡，凋亡细胞具有典型的凋亡形态特征，流式细胞仪检测有凋亡峰出现，琼脂糖凝胶电泳显示3nmol·L-1紫杉醇作用72h便可见明显的DNA梯带。100nmol·L-1和1000nmol·L-1浓度的紫杉醇作用于细胞，在形态变化与细胞周期变化上有很大差别。紫杉醇作用短时间（＜2h）去除后再培养比持续性作用更早促使细胞凋亡。结论紫杉醇不仅可以阻断食管癌细胞的分裂，而且对于间期细胞也有很大作用。细胞周期阻断并不直接诱导细胞凋亡，甚至可能抑制细胞凋亡的进程。食管癌细胞中存在多条凋亡途径。
- 彭玮丹张杰曹云新惠宏襄金明王成济
- 关键词：紫杉醇细胞凋亡食管癌细胞
- bcl-2核酶(Ribozyme)促进紫杉醇诱导的细胞凋亡被引量：7
- 2000年
- 用核酶技术阻断或降低抗凋亡蛋白 Bcl- 2的表达以促进化疗药物紫杉醇诱导的食管癌细胞凋亡 ,探索克服耐药、提高紫杉醇疗效的新途径 .将特异性切割 Bcl- 2 m RNA的核酶克隆至含MTII启动子并可为 Zn SO4 诱导表达的真核表达载体中 ,通过脂质体转入食管癌鳞状上皮细胞系Eca 1 0 9中 ,经 G41 8筛选得到稳定抗性细胞株 X1 0 9R,挑取单细胞株扩大培养 ,1 40μmol/L Zn SO4诱导 3d,用 Northern- blot、免疫荧光、流式细胞仪鉴定核酶及 Bcl- 2蛋白表达情况 ,用 TUNEL标记及流式细胞术检测凋亡细胞的比例 .bcl- 2核酶在不同单细胞株中有不同程度的表达 ,其中一株X1 0 9R1 4表达最高 .测定其中 Bcl- 2蛋白含量 ,发现 Bcl- 2蛋白表达大为降低 .加入紫杉醇后 ,TUNEL标记及凋亡峰测定结果都表明同一条件下凋亡率升高 .结果提示 ,转入特异性切割 bcl- 2m RNA的核酶可有效地阻断 Bcl- 2蛋白合成 .Bcl- 2蛋白表达降低可明显促进紫杉醇诱导的细胞凋亡 .说明 Bcl-
- 彭玮丹张杰赵永同惠宏襄朱峰杨安钢王成济
- 关键词：紫杉醇肿瘤抗药性细胞凋亡
- bcl-2核酶对SMMC7721细胞端粒酶活性的影响作用被引量：11
- 2001年
- 目的 观察 bcl- 2核酶对 SMMC- 772 1细胞的作用 ,探讨 bcl- 2表达水平的改变对细胞端粒酶活性的影响 .方法 经脂质体介导的方法将 PMTr- neo(正向 bcl- 2核酶真核表达载体 )导入 SMMC772 1细胞中 ,细胞克隆转移扩大培养后 ,采用 TU NEL,TRAP- PCR- EL ISA,免疫组化技术结合图像分析技术检测 SMMC772 1/ PMTr- neo细胞凋亡、细胞端粒酶活性及 P16 ,P2 1的改变 .结果 较对照组 SMMC772 1/PMTr- neo细胞 Bcl- 2表达水平显著下降 ,伴有显著细胞凋亡现象 ;同时端粒酶活性下降 ,P16 ,P2 1表达水平显著增加 .结论 bcl- 2核酶可促进 SMMC772 1细胞发生凋亡 ,并降低细胞端粒酶活性 ,提示 Bcl- 2表达水平的改变对细胞端粒酶活性有一定的影响 .
- 张传山王文亮彭玮丹胡沛臻柴玉波张衍国
- 关键词：肝肿瘤脱噬作用SMMC7721细胞端粒酶基因治疗
- 可诱导型真核表达载体的构建及其表达效率的测定
- 1999年
- 目的：利用ＭＴ－Ｉ启动子的Ｚｎ２＋诱导表达特性，构建含多克隆位点的可诱导型真核表达载体ｐＭＤＮＡ３－ｎｅｏ，并用荧光素酶报告基因（ｌｕｃ）检测其表达效率．方法：用分子克隆方法构建载体，并将ｌｕｃ基因克隆到其多克隆位点内，转染胃癌细胞ＳＧＣ７９０１，Ｇ４１８筛选出稳定克隆，分别在不同浓度ＺｎＳＯ４及不同诱导时间下进行诱导表达和测定，并检测不同单细胞株的表达效率．结果：采用１６０μｍｏｌ／ＬＺｎＳＯ４诱导２４ｈ可达到最高表达量，比基准值高２～７倍（Ｐ＜０．０１）．结论：真核表达载体ｐＭＤＮＡ３－ｎｅｏ具有良好的诱导表达能力．
- 张杰彭玮丹王多宁王刚惠宏襄王成济
- 关键词：基因载体基因治疗
- 紫杉醇对人粘液表皮样癌细胞系的细胞毒研究被引量：12
- 2001年
- 目的 :研究紫杉醇对人粘液表皮样癌细胞系 MEC- 1的细胞毒作用 ,为临床应用选择最佳给药方案提供依据。方法 :应用细胞计数法研究不同药物浓度及不同作用时间细胞毒作用的特点。结果 :紫杉醇对 MEC-1的最大抑制率为 5 0 %～ 90 % ,当药物浓度为 10 nmol/ L 时抑制率已接近最大 ,增加药物浓度 10～ 10 0倍并不能增加抑制效应。但延长药物暴露时间大于 12 h能明显增强抑制效应。即使作用 72 h时 ,10～ 10 0 0 nmol/L 的抑制率分别为 6 4%、5 8%、5 6 %、44 %和 49%。结论 :紫杉醇对人粘液表皮样癌细胞系 MEC- 1有明显的细胞毒作用 ,能明显抑制其生长 ,但抑制作用并不完全。此细胞毒作用的时间依赖性明显大于剂量依赖性。提示临床应用应以延长药物作用时间为目的 。
- 王江华司徒镇强吴军正刘斌彭玮丹
- 关键词：紫杉醇粘液表皮样癌细胞毒性抗癌药
- bcl-2核酶与Bax在诱导食管癌细胞凋亡中的协同作用被引量：13
- 2000年
- 为了同时调节二种凋亡相关蛋白的表达诱导肿瘤细胞凋亡 ,探索肿瘤基因治疗的可能性 ,同时转入可诱导表达的特异性切割 bcl- 2的核酶基因及 bax基因 ,间接免疫荧光标记法检测 Bcl- 2及Bax蛋白的表达量 ,用 TUNEL、流式细胞术及琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡 .共转染后 Bcl- 2蛋白表达下降 ,同时 Bax蛋白表达升高 ,导致 30 %左右细胞凋亡 ,并可使细胞对紫杉醇的敏感度增加近4倍 ,使紫杉醇有效作用时间缩短近一倍 .同时调节二个凋亡相关基因可导致细胞凋亡 ,并能有效促进化疗药物诱导的凋亡 .同时校正多个基因的异常表达 ,比仅仅改变单个基因可更有效地达到治疗肿瘤的目的 .
- 彭玮丹张杰惠宏襄许彦鸣杨安钢王成济
- 关键词：BCL-2BAX凋亡基因治疗食管癌细胞
- 紫杉醇作用的分子机制研究进展被引量：5
- 1999年
- 彭玮丹王成济杨安钢
- 关键词：紫杉醇信号转导抗肿瘤药物细胞学效应
- 含多克隆位点的可诱导型真核表达载体的构建被引量：6
- 1998年
- 我们利用MT-Ⅱ启动子的特性,构建了含多克隆位点的可诱导型真核表达载体pMDNA3-neo.
- 张杰彭玮丹惠宏襄金明王成济
- 关键词：基因载体基因治疗多克隆位点
- Bc-l2核酶诱导SMMC7721细胞凋亡与p16,p21蛋白表达的关系研究被引量：2
- 2000年
- 目的 观察bcl 2核酶对人肝癌细胞株SMMC 772 1细胞的作用 ,并检测 p16和 p2 1的表达情况。探讨bcl 2核酶在肝癌治疗中的意义。方法 经脂质体介导的方法 ,将PMTr neo (正向bcl 2核酶真核表达载体 )导入SMMC772 1细胞中。细胞克隆转移扩大培养后 ,采用TUNEL法、免疫组化技术结合图像分析 ,在检测SMMC772 1/PMTr neo细胞凋亡的同时 ,检测 p16 ,p2 1的表达。结果 与对照组相比较 ,在bcl 2核酶诱发SMMC772 1细胞发生凋亡的同时 ,p16和 p2 1基因的表达水平显著增高。结论 bcl 2核酶通过封闭bcl 2的表达可促进SMMC772 1细胞凋亡 ,同时伴发 p2 1和
- 张传山王文亮彭玮丹胡沛臻柴玉波赵一岭
- 关键词：核酶P16P21
- 人c-myc反义真核表达载体的构建及其对BT325细胞c-Myc蛋白表达的抑制作用被引量：6
- 1999年
- 目的：构建人c-myc第三外显子及3’非翻译区反义真核表达载体，用脂质体介导法转染人胶质瘤BT325细胞，以期降低其c-Myc表达水平．方法：采用基因重组方法构建真核表达载体;用G418筛选抗性细胞克隆;用免疫细胞化学ABC法检测细胞蛋白质的表达;用MTT法测定顺铂作用下，未转染及转染组细胞的存活率．结果：c-myc反义真核表达载体在BT325细胞中稳定表达，转染细胞c-Myc表达水平显著降低;c-Myc表达减弱细胞对顺铂诱导凋亡的敏感性．结论：抑制c-mycDNA第三外显子及其3’端非翻译区反义表达载体能够显著抑制。c-myc基因的表达;c-Myc在化疗药物诱导肿瘤细胞凋亡的过程中有重要作用．
- 张浩彭玮丹
- 关键词：C-MYC免疫细胞化学肿瘤细胞凋亡
