张金龙
- 作品数：9 被引量：26H指数：3
- 供职机构：中国人民解放军更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金兰州市科技发展计划项目博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 以双质粒逆病毒载体系统快速建立梯度过表达hMTA1稳转单克隆细胞系的方法被引量：1
- 2012年
- 目的利用逆病毒表达载体快速构建梯度过表达人MTA1稳转单克隆细胞系。方法利用噬菌斑原位杂交筛选人肺噬菌体文库,以阳性克隆为模板,RT-PCR获得人MTA1完整CDS序列。以逆病毒表达载体pMX为基础,经过多次酶切连接,构建逆病毒表达载体pMX-MTA1-flag-IRES-EGFP。将构建好的逆病毒载体系统,转染293-gag/pol细胞,包装出含该表达载体的逆病毒颗粒。以含病毒上清多次感染HCT116细胞,获得稳定转染MTA1的HCT116多克隆细胞系。将该多克隆细胞系按合适比例稀释后接种至10cm大皿,获得大量单克隆细胞系,以GFP为筛选标志,筛选不同荧光强度的单细胞克隆进行扩增并分析MTA1与GFP表达水平的线性关系。结果测序结果显示成功克隆出人MTA1表达序列。免疫荧光、Western Blot结果证实成功构建出梯度过表达MTA1的稳转细胞系。相关性验证结果显示构建的非融合载体MTA1与GFP的表达呈明显的线性相关,相关系数r=0.932,P<0.01。结论利用逆病毒表达系统,快速成功构建并筛选出MTA1与GFP非融合梯度过表达稳转单克隆细胞系,为MTA1基因功能研究提供了良好模型。该逆转录病毒平台可用于快速建立其他基因的稳转单克隆细胞系。
- 刘健王海娟张金龙常亚楠孟希亭张雪燕梁肖付明赵玫林晨黄常志钱海利
- 关键词：MTA1GFP单克隆
- 结肠癌组织中MTA1的表达水平及定位与患者预后的相关性研究被引量：8
- 2012年
- 目的研究结肠癌组织中MTA1的表达水平及在细胞核、细胞质内的定位情况,分析其与结肠癌预后的相关性,并探讨其可能的机制。方法采用免疫组织化学染色方法在结肠癌组织芯片(30例肠癌组织、10例转移组织、8例正常组织)中检测MTA1与Sox2蛋白的表达水平及定位情况,统计分析二者与临床病理资料及预后的相关性;并初步探讨Sox2与MTA1表达的相关性。结果①肠癌组织及转移组织中MTA1细胞质染色强度均显著高于正常组织(P<0.05),而肠癌组织与转移组织间MTA1表达差异不显著(P>0.05);②MTA1在细胞质的表达强度与临床分期呈正相关(P=0.03),生存时间<5年的肠癌患者的肿瘤组织细胞质内MTA1的表达强度显著高于生存时间≥5年的患者组织(P=0.007);③Sox2在肠癌组织细胞核及细胞质内的表达均与MTA1细胞质表达具有显著的相关性(P<0.01)。结论 MTA1细胞质过表达提示结肠癌预后不良,这可能与Sox2的过表达相关。
- 张金龙王海娟刘健李玉孟希亭陆中林晨李贵新钱海利
- 关键词：结肠癌MTA1SOX2肿瘤干细胞
- CD133和Oct4在喉癌中的表达及临床意义被引量：3
- 2011年
- 目的:探讨CD133和Oct4在喉癌中的表达及与喉癌临床病理学特征之间的关系。方法:利用免疫组织化学方法检测56例喉癌组织及10例癌旁正常组织中CD133和Oct4的表达,比较二者的表达与临床病理参数之间的相关性。结果:CD133和Oct4在喉癌组织内表达阳性率分别为69.6%、25.0%,均明显高于正常组织;CD133与Oct4在中、低分化喉癌组织内表达均高于高分化者(P<0.05);CD133的表达与喉癌的TNM分期和淋巴结转移具有相关性(P<0.05),而与患者的年龄、性别和肿瘤生长部位无相关性,Oct4的表达与以上因素均无相关性;二者在喉癌组织中的表达呈正相关。结论:CD133和Oct4可共同作为喉癌的肿瘤干细胞标志物,作为喉癌恶性程度的判断指标;CD133的表达在喉癌发生、发展及转移中发挥重要作用,为喉癌的诊断和治疗提供依据;Oct4与喉癌的关系有待进一步研究证明。
- 王孝田军张金龙刘守洲
- 关键词：喉癌肿瘤干细胞CD133OCT4免疫组化
- 临床诊断肺毛细血管瘤病一例报道并文献复习
- 2017年
- 肺毛细血管瘤病(PCH)是一种罕见的肺组织内血管增生性疾病,主要病理表现为大量薄壁毛细血管增生并浸润肺泡壁、气道、血管甚至胸膜,偶可侵及纵隔及心包,且增生的毛细血管常沿肺泡壁排列并包绕甚至压迫肺血管,可导致肺小静脉内膜增厚和肺小动脉血管重塑等,患者预后多不良。本文报道了1例PCH患者并复习相关文献以分析其可能的发病机制及诊治要点,以提高临床对该病的认识,减少误诊、漏诊。
- 张琪李玲义张金龙薛庆亮
- 关键词：肺疾病历史文献
- 脐血DC与CIK共培养对白血病K562细胞杀伤活性的影响被引量：2
- 2010年
- 目的观察细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)与同源树突状细胞(DC)共培养后DC-CIK细胞的增殖活性、表型的变化及其对白血病K562细胞杀伤活性的影响。方法采集健康产妇分娩正常足月胎儿脐血50 ml,密度梯度离心法分离出脐血单个核细胞培养。收集非贴壁细胞用于诱导培养CIK,贴壁细胞诱导分化出成熟DC;将成熟DC和CIK按1∶5的比例混合培养3 d,用MTT法检测DC-CIK共培养细胞对白血病K562细胞杀伤活性。结果DC与CIK共培养后,DC-CIK细胞群的增殖活性和杀伤活性明显高于单纯CIK。结论DC-CIK共培养可明显提高CIK增殖活性和细胞毒作用。
- 李鹏鑫李贵新路中张金龙张敏
- 关键词：胎血过继免疫治疗过继
- 脐血DC-CIK共培养体外抗肿瘤效应及趋化性的实验研究被引量：1
- 2010年
- 目的探讨细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)与同源树突状细胞(DC)共培养后对人白血病K562细胞、人淋巴瘤raji细胞、人乳腺癌MCF-7细胞的杀伤作用及CIK细胞的趋化性。方法采集健康产妇分娩的正常足月胎儿脐血,分离单个核细胞,诱导培养CIK、DC细胞。将成熟DC和CIK混合培养3d,用MTT法检测CIK、DC-CIK对K562、raji、MCF-7细胞的杀伤活性;趋化试验检测CIK细胞的趋化性。结果 CIK、DC-CIK细胞对K562、raji、MCF-7细胞均具有较强的杀伤作用,DC-CIK杀伤活性明显高于CIK。趋化试验显示,IL-8、MCP-1作用后穿过微孔滤膜的细胞数明显高于阴性对照。结论 DC-CIK共培养可明显提高CIK对K562、raji、MCF-7细胞的杀伤作用,IL-8、MCP-1对CIK细胞存在趋化性。
- 李贵新李鹏鑫郭璐路中张金龙张敏
- 关键词：脐血过继免疫治疗趋化性
- 肿瘤干细胞靶向治疗研究进展被引量：5
- 2010年
- 肿瘤干细胞（cancer stem cell,CSC）是存在于肿瘤组织中的一小部分具有干细胞性质的细胞群体,它具有自我更新的能力,是形成不同分化程度肿瘤细胞和肿瘤不断扩大的源泉。现有治疗肿瘤的方法主要是针对肿瘤组织内的大多数细胞,而不是肿瘤干细胞。即使99.99%的肿瘤细胞被杀死,但只要有0.01%的肿瘤干细胞存在,
- 张金龙钱海利林晨李贵新
- 关键词：肿瘤干细胞靶向治疗肿瘤组织CELL细胞群体自我更新
- Oct4在多种人腺癌组织中表达水平的研究被引量：3
- 2011年
- 目的:研究5种人腺癌中Oct4的表达情况,为进一步探索其在肿瘤发生中的机制提供基础。方法:应用乳腺癌、胃癌、胰腺癌、肠癌、子宫内膜癌5种腺癌的组织芯片,通过免疫组织化学染色研究Oct4蛋白在组织中的表达情况,并与癌旁正常组织进行比较。结果:Oct4在5种腺癌肿瘤组织内均有表达,胃癌组织内Oct4的表达高于癌旁正常组织(P<0.05),其他腺癌组织中Oct4的表达与癌旁组织差异无统计学意义;在乳腺癌和肠癌中,无淋巴结转移患者的肿瘤组织中Oct4表达高于淋巴结转移患者的肿瘤组织(P<0.05),而在胃癌、胰腺癌及子宫内膜癌患者中未观察到这种差异;5种腺癌的肿瘤组织内,未发现Oct4的表达与临床分期有关。Oct4在癌旁正常组织中(子宫内膜癌除外)主要定位于细胞浆,而在腺癌组织中既表达于细胞核,也表达于细胞浆。结论:Oct4的表达可能是肿瘤发生过程中的早期事件,不同腺癌组织中Oct4的表达情况不完全相同,Oct4的核/浆表达模式可能与其在肿瘤发生中的作用有关。
- 张金龙王海娟路中刘健林晨钱海利李贵新
- 关键词：OCT4腺癌组织芯片免疫组织化学
- 雄激素不敏感综合征的MRI表现被引量：3
- 2019年
- 目的探讨雄激素不敏感综合征的 MRI 表现及临床特征。资料与方法回顾性分析经腹腔镜手术和临床综合诊断的 10 例雄激素不敏感综合征患者的 MRI 特征和临床资料。结果 10 例患者均经腹腔镜手术和染色体核型检查,并结合临床最终诊断为雄激素不敏感综合征,且均为完全型。10 例均为社会女性表现,染色体核型均为 46,XY。MRI 表现为双侧腹股沟区椭圆形、条索状、结节状异常信号影,边界清,T1WI 呈等信号,T2WI 及 T2WI 压脂序列呈稍低及稍高信号,DWI 序列扩散受限。患者乳房发育正常,无月经来潮,术中均未见子宫及附件。性腺位于盆腔、腹股沟区。所有患者均行腹腔镜下睾丸切除术,其中 2 例同时行腹股沟疝修补术。术后性腺病理结果为睾丸组织。结论雄激素不敏感综合征的临床诊断需结合症状、体征、性激素水平、影像学资料及染色体核型等综合考虑。MRI 可以更好地显示性腺及内生殖器的位置及发育情况,帮助临床评估疾病类型。
- 徐生芳钱吉芳张金龙岳松虹杨磊朱大林杨来虎
- 关键词：磁共振成像
