张遵真
- 作品数:160 被引量:819H指数:16
- 供职机构:四川大学华西公共卫生学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金成都市科技局项目国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学环境科学与工程农业科学更多>>
- 阿司匹林增加人肝癌细胞对三氧化二砷敏感性的实验研究及机制探讨被引量:6
- 2016年
- 目的研究阿司匹林能否增加肝癌细胞对三氧化二砷(As_2O_3)的敏感性,并从氧化应激角度探索其增敏的机制。方法采用10μmol/L As_2O_3和不同浓度的阿司匹林联合处理人肝癌细胞HepG2 24h后,采用MTT比色法测定细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞内活性氧(ROS)水平,Western blot检测总蛋白中血红素氧合酶1(HO-1)和核蛋白中核转录因子Nrf2的表达水平。结果与空白对照相比,10μmol/L As_2O_3可引起肝癌细胞存活率降低,凋亡率、ROS水平、HO-1和Nrf2表达升高;不同浓度(0.1、1.0、2.5、5.0mmol/L)的阿司匹林与10μmol/L As_2O_3联合处理时,HepG2细胞存活率、总蛋白HO-1以及核内Nrf2的表达均随着阿司匹林浓度的增加呈现先升高后降低的趋势,而细胞凋亡率和细胞内ROS水平则表现为先降低后升高。结论阿司匹林对As_2O_3的增敏作用有限,只有在较高浓度(5 mmol/L)时表现出一定的增敏作用,其增敏机制可能是通过抑制Nrf2-HO-1途径从而导致ROS蓄积,增强As_2O_3对HepG2的凋亡诱导能力,进而增加HepG2对As_2O_3的敏感性。
- 胡亚男谷仕艳张遵真
- 关键词:三氧化二砷阿司匹林凋亡血红素氧合酶1
- HOGG1特异性锤头状核酶真核表达载体的构建及鉴定被引量:1
- 2005年
- 目的 设计并合成人8 羟基鸟嘌呤 DNA糖苷酶(HOGG1)特异性的锤头状核酶(hammerheadribozyme)基因并构建其真核表达载体。鉴定含有核酶靶基因HOGG1cDNA保守序列的真核表达载体。方法 运用计算机软件人工设计并合成核酶基因(RZ) ,将核酶基因克隆到真核表达载体pcDNA 3 1中,重组子由BamHI和EcoRI酶切,琼脂糖凝胶电泳鉴定及DNA测序证实。含有HOGG1基因cDNA保守序列的真核表达载体经BamHI和EcoRI酶切电泳鉴定。结果 RZ人工合成后与pcDNA 3 1连接,酶切电泳及DNA测序证实合成的核酶基因序列正确并已被准确克隆入pcDNA 3 1的BamHI和EcoRI位点之间,命名为pcDNA 3 1 RZ。1 3kb的HOGG1基因cDNA保守序列准确克隆于pcDNA 3 1的BamHI和EcoRI酶切位点之间,命名为pcDNA 3 1 HOGG1。结论 成功合成HOGG1特异性的锤头状核酶基因并构建了该基因的真核表达载体,以及核酶靶基因的真核表达载体。
- 张勤张遵真衡正昌
- 关键词:真核表达载体PCDNA3.1HOGG1基因CDNA8-羟基鸟嘌呤重组子
- 五种氯化有机物对V_(79)细胞DNA损伤作用的研究被引量:14
- 1999年
- 本文采用近年来发展的单细胞凝胶电泳试验检测了二氯甲烷、三氯甲烷、四氯化碳及一氯乙酸和三氯乙酸对V79细胞的DNA损伤作用。结果显示:五种受试物均可引起体外培养的V79细胞DNA损伤,但其作用强度差异很大。其顺序为四氯化碳>三氯甲烷>二氯甲烷>一氯乙酸>三氯乙酸。该结果还提示:五种氯化有机物对V79细胞的毒性及DNA损伤作用的大小顺序是一致的,氯化烷基类化合物的细胞毒性及DNA损伤作用均大于氯乙酸类,在氯化烷基类化合物中。
- 张遵真衡正昌李南拉巴卓玛
- 关键词:氯化有机物单细胞凝胶电泳DNA损伤V79细胞
- 细胞冻存条件对单细胞凝胶电泳试验结果的影响被引量:2
- 1998年
- 将未处理的(对照)和重铬酸钾处理的V79细胞贮存于4℃、-20℃、-80℃和-196℃,于保存后的0,4,24,48,168h取出进行单细胞凝胶电泳(SCGE)试验。结果显示各温度保存24h的细胞DNA迁移长度与新鲜细胞无差异;更长时间(48和168h)的保存细胞DNA迁移长度明显增加;同时各温度保存的细胞存活率均随贮存时间的延长而下降。因此,24h内细胞保存以4℃为好。
- 张遵真李蕊谭宗庆衡正昌
- 关键词:单细胞凝胶电泳重铬酸钾细胞冻存
- 彗星试验检测细胞凋亡的研究被引量:31
- 1999年
- 彗星试验是近十年发展起来的在单细胞水平上检测DNA断裂的方法,理论上可检测含有大量DNA碎片的凋亡细胞。本文在建立地塞米松诱导小鼠胸腺细胞凋亡模型的基础上,探索了彗星试验检测凋亡的实验方法,并与Giemsa染色、琼脂糖凝胶电泳、TUNEL法等几种常用的检测凋亡细胞的方法进行了比较研究。结果表明:凋亡细胞在彗星试验中呈现特征性的彗星形态,很小的彗星头,大而圆的彗星尾;以彗星试验检测细胞凋亡的最适电泳条件为20V,15min;其检测灵敏度与Giemsa染色法和TUNEL法相当。因此彗星试验是一种灵敏、准确、简便、既可定性又可定量检测细胞凋亡的新方法。
- 李蕊衡正昌张遵真
- 关键词:彗星试验细胞凋亡
- 体外代谢活化对香烟烟雾诱导的细胞氧化损伤的影响
- 2009年
- 目的探讨香烟烟雾对A549细胞的氧化损伤作用以及体外代谢活化对细胞氧化损伤效应的影响。方法香烟烟雾染毒A549细胞,在加与不加S9的条件下测定细胞活性氧(ROS)含量,检测细胞染色体、DNA损伤及抗氧化酶活性。结果随着香烟烟雾浓度的增加,加与不加S9细胞的ROS含量、DNA损伤、染色体损伤均增加,SOD和GSH-Px活性均降低。相同染毒剂量下,加S9细胞ROS含量高于不加S9细胞;加S9细胞微核率、拖尾率、LTail、OTM值均大于不加S9细胞;加S9细胞抗氧化酶活性的降低趋势较不加S9细胞更为显著。结论香烟烟雾对A549细胞具有氧化损伤作用,体外代谢活化可以增加细胞的氧化应激,从而加剧香烟烟雾对细胞的遗传毒性。
- 王玲罗擎英张栗吴媚张遵真
- 关键词:代谢活化
- 体内彗星试验多种器官细胞分离条件研究被引量:3
- 2001年
- 李爱武衡正昌刘科亮张遵真
- 关键词:彗星试验细胞分离致癌剂
- 一种更新的检测DNA交联的尝试被引量:8
- 2001年
- 张遵真衡正昌
- 关键词:彗星试验
- 深圳市新疆哈萨克族移民DNA氧化损伤的分子流行病学研究
- 2008年
- 目的 研究来深圳市不同年份的新疆哈萨克族居民的DNA氧化损伤作用,探讨移民对DNA氧化损伤的影响。方法 选取60名来深圳市的新疆哈萨克族居民,按移民不同时间分为3组(每组20人),调查其移民后主要生活方式的变化情况,采静脉血做彗星试验,收集24h尿测定8-羟基脱氧鸟苷(8-OH-dG)。结果 彗星试验显示,来深圳市〉3年组DNA损伤程度比〈1年组均显著降低(P〈0.05);移民1~3年组的8-OH-dG水平低于〈1年组(P〈0.05),移民〉3年组的8-OH—dG水平明显低于〈1年组(P〈0.01)。结论 移民的相关生活方式变化可能具有降低哈萨克族居民的DNA氧化损伤的作用。
- 柯跃斌程锦泉帅志红张仁利江高峰谭春荣张遵真
- 关键词:移民彗星试验8-羟基脱氧鸟苷哈萨克族
- 建立非放射性连接介导PCR技术检测p53基因链断裂被引量:7
- 2001年
- 张治位谢方莉衡正昌张遵真
- 关键词:P53基因DNA链断裂地高辛标记探针