张英波
- 作品数：8 被引量：24H指数：3
- 供职机构：吉林大学人兽共患病研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 凋亡素原核表达及纯化
- 2007年
- 为进一步研究凋亡素结构与功能和制备凋亡素单克隆抗体,本试验构建了凋亡素的原核表达载体pET-28a-VP3,并将该质粒转化到大肠杆菌E.coliBL21中,以IPTG对其进行诱导表达,聚丙烯酰胺凝胶电泳分析蛋白。结果证明在E.coliBL21中正确表达了凋亡素,同时对表达蛋白进行纯化,SDS-PAGE显示在1.4 kD处出现目的蛋白带与预期相符。
- 郝军元胡薇张英波艾永兴张玉静
- 关键词：凋亡素原核表达载体纯化
- 奶牛皱胃变位发病机理研究进展被引量：8
- 2005年
- 近20年来,我国奶牛集约化饲养的规模在大中城市近郊地区迅速扩大,其皱胃变位的发病率也有明显增加。调查发现,平均有3.3%的奶牛会发生皱胃变位,产前3周到产后4周的围产期是发生此病的危险期。其中有85%表现为左方变位(left displace,LD),15%表现右方变位(right displace,RD)。文章从皱胃弛缓、机械性因素、胃壁损伤、某些营养物质缺乏、有毒物质慢性中毒、遗传因素及饲养管理等方面阐述了皱胃变位的可能发病原因及可能的发病机理,从而对该病的实验室检验指标进行描述和分析,以便建立系统的诊断思路。
- 潘志忠周昌芳谢光洪崔国祯张英波
- 关键词：皱胃变位发病机理
- 凋亡素融合基因原核表达载体的构建及可溶性表达被引量：2
- 2007年
- 在获得凋亡蛋白融合基因的基础上,成功地构建了重组表达质粒PET-22b-SPA,将阳性重组质粒转化表达受体菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达,表达产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,凋亡蛋白融合基因获得高效表达。软件分析结果表明表达蛋白占菌体蛋白的20%,上清表达量约为10%。上清蛋白经纯化后,Western blot结果显示,利用凋亡蛋白单克隆抗体可以很好地与所表达的蛋白带特异性结合。
- 王春艳郝军元张英波王诺张玉静
- 关键词：凋亡蛋白融合基因可溶性表达
- 新城疫与人类健康被引量：3
- 2006年
- 毕玉海徐明李志杰聂代邦张英波李茂张嵘丁壮
- 关键词：鸡新城疫接触性传染病呼吸道症状神经症状疫苗预防
- 牛场布氏杆菌病的净化被引量：4
- 2005年
- 奶牛布氏杆菌病是由布氏杆菌引起的一种人畜共患传染病,属于我国规定的二类动物疫病.布氏杆菌病严重危害着奶牛业的发展,其中奶牛是布氏杆菌病最易感动物,一旦在牛群中发生常引起奶牛场毁灭性打击.近年来随着奶牛业在全国各地的迅猛发展以及奶牛流通的增加,原在牧区流行的布氏杆菌病在内地也悄然上升.由于该病直接影响奶牛生产效益并危害人类健康,所以,有效地对该病进行防治和净化极为必要.现将奶牛场进行布氏杆菌病的防治与净化关键性措施概括如下,供广大同行参考.
- 崔国祯黄旭东潘志忠张英波
- 关键词：牛布氏杆菌病人畜共患传染病奶牛业易感动物
- 人血管内皮生长因子和端粒酶催化亚基复合调控序列的构建及转录活性的研究被引量：5
- 2006年
- 以人肝癌细胞基因组DNA为模板,应用PCR方法扩增VEGF增强子和hTERT核心启动子序列,该序列与NCBI数据库参考序列相比,同源性达到99%以上。将VEGF增强子和hTERT核心启动子定向克隆到pBluescriptⅡSK载体中,构建VEGF增强子和hTERT核心启动子复合调控序列。酶切去除表达载体pECFP-C1的启动子CMV,并将所制备的复合调控序列连接到CMV位置,构建含该复合调控序列并可表达绿色荧光蛋白报告基因的重组质粒,转染人肺癌细胞和正常人肝细胞。结果显示,在人肺癌细胞中观察到绿色荧光,而在人肝细胞中没有检测到。由此说明,具有肿瘤特异性的VEGF增强子和hTERT核心启动子复合转录调控序列可以驱动绿色荧光蛋白基因在人肺癌细胞中表达,但不能驱动该蛋白在正常人肝细胞中表达。
- 胡薇郝军元艾永兴张英波张玉静
- 关键词：绿色荧光蛋白
- 鸡p15^(INK4B)基因的克隆表达及纯化被引量：1
- 2006年
- 为研究鸡p15INK4B蛋白的功能及为制备此蛋白的单克隆抗体提供材料,应用引物搭桥法合成p15INK4B基因,应用基因工程的手段构建p15INK4B基因的原核表达载体,在E.coliRosetta(DE3)菌进行融合表达,并对表达产物进行亲和层析纯化。结果成功地构建了p15INK4B基因原核表达载体,经亲和层析制备了较高纯度的目的表达产物。
- 艾永兴张玉静胡薇郝军元邹亚学张英波
- 关键词：P15^INK4B细胞周期原核表达
- 凋亡素融合蛋白的可溶性表达及活性分析被引量：1
- 2006年
- 目的:构建PET-28a-SPA原核表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中实现其高效可溶性表达,测定对肿瘤细胞的凋亡效果。方法:本实验在获得凋亡蛋白融合基因的基础上,成功地构建了重组表达质粒PET-28a-SPA,将阳性重组质粒转化表达受体菌BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导表达,表达产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳检测和Western blot检测,并采用MTT法检测其对肿瘤细胞的增殖抑制。结果:表达产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,凋亡蛋白融合基因获得高效表达,软件分析表明表达蛋白占菌体蛋白20%左右。上清表达量约为10%。上清蛋白经纯化后,Western blot结果显示,利用凋亡蛋白单克隆抗体可以很好地和所表达的蛋白带特异性结合,并且对A549肺癌细胞及Hela细胞具有一定的凋亡作用。结论:所获凋亡蛋白以高效胞质可溶形式表达,为其研制有效的肿瘤免疫治疗靶向药物提供一定的基础。
- 张英波王春艳郝军元张玉静
- 关键词：凋亡蛋白融合基因可溶性表达
