张江巍
- 作品数：3 被引量：17H指数：2
- 供职机构：中国农业大学食品科学与营养工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 拟南芥WUSCHEL蛋白的原核表达、亲和纯化和多克隆抗体制备被引量：13
- 2009年
- 本研究构建了带有His标签的拟南芥(Arabidopsis thaliana)WUSCHEL基因原核表达载体pET-31b(+)-WUS-His(6),优化了大肠杆菌(Escherichia coli)诱导表达体系,将亲和层析纯化后的WUS融合蛋白,经尿素梯度透析复性溶解,免疫新西兰大白兔,成功制备了WUS蛋白多克隆抗体。通过琼脂糖免疫扩散检测确定了抗血清效价和特异性,并以斑点杂交和Western blotting检验其灵敏性。结果表明,成功构建的拟南芥WUS原核表达载体,在E.coli中以0.5mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)28°C诱导表达10h后,融合蛋白得到高水平表达,亲和纯化后目标蛋白纯度达96%以上,所制备的多克隆抗体具有较高特异性和灵敏性,可用来检测纳克级蛋白抗原。
- 王增代茹张江巍陈尚武张文马会勤
- 关键词：拟南芥WUSCHEL蛋白质抗体
- 植物膜蛋白质组学研究技术被引量：3
- 2007年
- 植物膜蛋白质组学是当前植物科学研究的热点领域,蛋白质组学是植物生理学的重要内容。概论了双向电泳前膜蛋白样品的制备、膜蛋白质的鉴定方法以及植物质膜、液泡膜和其他膜蛋白组分的蛋白质组学研究进展,并介绍了植物膜蛋白质组学相关的数据库,最后对其发展作了展望。
- 张江巍陈尚武马会勤
- 关键词：蛋白质组学双向电泳质谱
- 长双歧杆菌BBMN68可溶性蛋白质图谱的建立被引量：1
- 2011年
- 为了建立长双歧杆菌BBMN68蛋白质图谱,采用双向电泳的方法建立了2-D参考图谱,通过MALDI-TOF/MS质谱鉴定和数据库搜索,鉴定到206个蛋白质(占长双歧杆菌BBMN68基因预测总蛋白的11.4%)。通过2-D胶分析,共有800±15(对数期)和800±20(稳定期)个蛋白质,其中282个蛋白点成功鉴定,代表206个不同的蛋白质。另外,分析了实验鉴定蛋白质的等电点和分子量,蛋白功能,密码子偏好性,蛋白质疏水性以及蛋白质细胞定位的分析。研究结果为长双歧杆菌的比较蛋白质组学研究提供了参考图谱和蛋白质基础信息数据。
- 肖满徐攀赵建云马会勤张江巍陈尚武
- 关键词：蛋白质组双向电泳蛋白质图谱
