张永云
- 作品数：138 被引量：259H指数：9
- 供职机构：云南农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金云南省应用基础研究基金云南省应用基础研究计划面上项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>
- 一种适用于散养的环保鸡舍
- 本实用新型涉及一种适用于散养的环保鸡舍，属于鸡养殖设施技术领域，本实用新型包括鸡舍本体、发酵室、地网、翻动装置、刮料装置、饮水装置、电动卷帘、产蛋箱、储料池，鸡舍本体包括活动区、休息区，活动区的屋顶横梁上设有电动卷帘，其...
- 苗永旺张永云滕晓红袁峰葛长荣哈福
- 文献传递
- 火焰原子吸收光谱法测定水牛和荷斯坦牛乳中锌、铁、铜含量被引量：6
- 2011年
- 研究采用火焰原子吸收分光光度法（FAAS法）测定水牛和荷斯坦牛乳中锌、铁、铜含量。结果表明,锌、铁、铜含量在水牛乳中分别为15.520μg/mL、4.267μg/mL、0.586μg/mL,在荷斯坦牛乳中分别为4.374μg/mL、2.756μg/mL、0.866μg/mL。水牛乳中锌、铁含量极显著高于荷斯坦牛乳（P〈0.01）,铜含量极显著低于荷斯坦牛乳（P〈0.01）。三种元素的回收率范围为96.000%~104.333%,相对标准偏差为2.467%~7.857%。该方法精密度和准确度高,可适用于批量牛乳样品中微量矿物元素的分析。
- 张永云李国治杨忠苗永旺汤守锟田建云王兴茂徐绍宏李卫真
- 关键词：水牛荷斯坦奶牛火焰原子吸收分光光度法
- 成人骨髓间充质干细胞体外培养方法的建立及生长特性分析被引量：3
- 2006年
- 目的建立成人骨髓间充质干细胞(marrowmesenchymalstemcells,MMSCs)体外分离培养和扩增方法,观察MMSCs在体外培养的生物学特性,为MMSCs的临床应用奠定技术基础。方法采集成人骨髓,密度梯度法分离单个核细胞,利用DMEM/F12培养基添加自体血清进行黏附培养和扩增MMSCs,光镜观察MMSCs生长和形态变化,计数和MTT法观察原代和传代培养的增殖及生长特征,免疫组化法分析MMSCs纯度。结果MMSCs贴壁生长,呈典型MMSCs形态和生长特征,原代及传代5代内的MMSCs均有活跃的增殖能力,其中CD105阳性细胞>98%。结论密度梯度离心结合贴壁培养法可获得高纯度和高增殖活性的MMSCs,成人MMSCs至少在传代培养5代内生长旺盛并维持其生物特性,可满足临床治疗和人体生物组织研究要求。
- 庞荣清周平尹波李雪梅张永云杨勇琴曲璐潘兴华
- 关键词：骨髓间充质干细胞体外培养
- 水牛初乳和常乳中五种酶活性的动态变化被引量：1
- 2011年
- 对摩本杂水牛(摩拉水牛×德宏水牛)初乳和常乳中AMS、γ-GT、NAGase、ALP以及LP的活性进行测定。结果表明,初乳中5种酶的活性大多显著或极显著高于常乳(P<0.05或P<0.01),而常乳之间差异均不显著(P>0.05)。初乳中AMS活性第1、2、3天差异不显著(P>0.05),第1、2天极显著高于第5、7天(P<0.01)。γ-GT活性第1天显著高于第7天(P<0.05),但与第2、3、5天相比差异不显著(P>0.05)。NAGase活性第1、2天极显著高于第3、5、7天(P<0.01)。ALP活性第1、2、3、5天之间差异不显著(P>0.05),但第1天极显著高于第7天(P<0.01)。LP活性第1、2天之间差异显著(P<0.05),且均极显著高于第3、5、7天(P<0.01)。
- 李卫真张永云苗永旺杨忠汤守锟田建云王强赵爽范路军张颖王兴茂徐绍宏牛自兵
- 关键词：水牛初乳常乳酶活性
- 一种奶水牛舍用刮粪车
- 本实用新型涉及一种奶水牛舍用刮粪车，属于奶水牛养殖领域，所述的奶水牛舍用刮粪车包括动力装置、车轮、底座、连杆安装板、连杆、阻尼套筒、安装板、推粪板、加强筋、荆轮、角度调节板、刮粪板、滑块、滑轨、摇柄、角度调节孔、螺钉、阻...
- 苗永旺王金梅张永云哈福
- 文献传递
- 德宏水牛乳和荷斯坦牛乳中上皮粘蛋白的遗传多态性
- 2011年
- 本文采用SDS-PAGE对56头云南德宏水牛和47头中国荷斯坦牛的乳上皮粘蛋白MUC1进行了基因分型。结果表明:德宏水牛乳和荷斯坦牛乳中的MUC1均呈现多态性。德宏水牛乳中共发现3种分子量分别为208,185,168 kD的电泳谱带,命名为A,B和C等位基因;荷斯坦牛乳中共发现5种分子量分别为196,191,188,176,159 kD的电泳谱带,命名为D,E,F,G和H等位基因。德宏水牛乳MUC1基因座A,B,C3个等位基因频率分别为0.223 2,0.330 4和0.446 4,群体期望杂合度为0.647 5;荷斯坦牛乳MUC1基因座D,E,F,G,H 5个等位基因频率分别为0.468 1,0.010 6,0.212 8,0.255 3和0.053 2,群体期望杂合度为0.674 7。结果揭示德宏水牛乳MUC1蛋白与荷斯坦牛乳MUC1蛋白遗传组成存在显著差异,该座位遗传多态性较丰富。
- 李卫真张永云杨忠汤守锟田建云王兴茂徐绍宏牛自兵王强李乖李洁玉朱仁英苗永旺
- 关键词：水牛荷斯坦牛
- 槟榔江水牛OXCT1基因的分子特征及组织表达谱分析
- 2019年
- 本研究对槟榔江水牛3-酮酸辅酶A转移酶1(3-oxoacid CoA-transferase 1,OXCT1)基因的完整CDS区进行了PCR扩增,并对其功能生物信息学和多组织差异表达进行了分析。以普通牛OXCT1基因序列(GenBank登录号:XM006076397)为参考序列,采用Primer Premier 5.0软件设计引物序列,以提取的槟榔江水牛基因组DNA为模板,PCR扩增获得槟榔江水牛OXCT1基因mRNA序列,扩增产物经测序后利用ORF Finder软件进行开放阅读框识别,获得水牛OXCT1基因CDS区全序列,并对其进行生物信息学分析。结果显示,槟榔江水牛OXCT1基因CDS序列全长1 563 bp,编码520个氨基酸,蛋白分子式为C2509H4041N687O746S23,分子质量为56.50 ku,理论等电点(pI)为8.69,不稳定系数为27.49,平均疏水性(GRAVY)为-0.097,该蛋白属弱亲水性蛋白。OXCT1蛋白无信号肽和跨膜结构,属于线粒体膜蛋白;包含pcaJscoBfam和AtoD 2个保守结构域,且具有5个功能活性位点。槟榔江水牛与普通牛、藏羚羊等5个物种的OXCT1氨基酸序列同源性≥97%。对槟榔江水牛13个组织进行表达谱分析表明,在泌乳期,OXCT1基因在乳腺中表达量最高,在肾脏、垂体、脂肪、大脑、皮肤和肌肉中不表达;在非泌乳期,OXCT1基因在除脂肪以外的其他12个组织中都有表达。OXCT1基因在槟榔江水牛泌乳期乳腺组织中表达量最高,推测其可能参与了水牛的乳脂合成调控事件。本研究结果可为深入了解乳脂合成代谢及其调控机制提供依据。
- 何情刘琴刘琴哈福张永云
- 关键词：槟榔江水牛生物信息学组织表达谱
- 猪新基因PFN3电子克隆、RT-PCR验证和组织表达分析被引量：1
- 2014年
- 通过NCBI下载猪近缘物种的PFN3基因序列,在线BLAST比对获得猪EST序列,利用Lasergene软件电子克隆猪PFN3基因编码区序列及部分侧翼序列。针对编码区设计特异引物并以滇南小耳猪为研究材料进行实验验证,同时应用半定量RT-PCR技术对30个组织进行了表达分析。研究获得了猪PFN3 414 bp的编码区序列(GenBank登录号:JX457348,对应的氨基酸登录号:AFU74013)。生物信息学分析表明,该基因编码137个氨基酸,预测的蛋白质分子量(Mw)为14.73 ku,等电点(pI)为9.30。蛋白质结构分析显示,PFN3存在1个保守域,无信号肽;疏水性分析表明其N端和C端均具有亲水性;亚细胞定位显示,该蛋白位于细胞质的概率是94.1%。系统进化分析表明,猪与牛亲缘关系最近。组织表达分析表明,PFN3基因在30个被检组织中均有表达,在睾丸、肝、肾、结肠、盲肠、直肠及食管中高表达,在胸腺、甲状腺、附睾、淋巴结、十二指肠、空肠、回肠、胃、皮肤、大脑、小脑、垂体及下丘脑中中度表达,在颌下腺、肺、心、脾、肾上腺、肌肉、胰脏、脑干、舌下腺及脊髓中低表达。研究结果将为该基因在猪中的进一步功能研究奠定基础。
- 张永云赵跃王锐秦彩艳王配王淑燕李福泉刘丽仙霍海龙李卫真卢健霍金龙
- 关键词：电子克隆
- 绿色荧光蛋白基因原核表达质粒pET32a-AcGFP1的构建及其在大肠杆菌中的高效表达被引量：2
- 2012年
- 为了构建绿色荧光蛋白AcGFP1基因的原核表达载体pET32a-AcGFP1,并诱导使其在大肠杆菌中高效表达,本研究以pIRES-AcGFP1质粒为模板,采用PCR技术特异性扩增绿色荧光蛋白AcGFP1基因,通过酶切和连接使其与原核表达载体pET32a(+)构成重组子,经PCR、酶切和测序鉴定后,重组质粒转化大肠杆菌Rosetta(DE3),用不同浓度的异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达绿色荧光蛋白,经15%SDS-PAGE鉴定,结果显示:重组质粒pET32a-AcGFP1中的AcGFP1序列与Clontech公司的pIRES-AcGFP1质粒的AcGFP1序列完全一致,表明本实验已成功构建了含有绿色荧光蛋白基因AcGFP1的原核表达质粒。此外,pET32a-AcGFP1转化Rosetta(DE3),经不同浓度的IPTG诱导,SDS-PAGE检测均获得高效表达,为今后构建pET32a(+)-TAT-AcGFP1融合表达载体以及深入研究TAT的细胞膜穿透作用的机制奠定基础。
- 霍海龙赵跃王锐侯慧芳李卫真张永云刘丽仙王配霍金龙
- 关键词：绿色荧光蛋白基因克隆报告基因原核表达
- 日粮不同能量和蛋白质水平对乌金猪肌肉组织能量代谢的影响被引量：3
- 2012年
- 为研究日粮不同能量和蛋白质水平对乌金猪肌肉组织能量代谢的影响,试验选取体重约15 kg的乌金猪108头,随机分为6组,下设3个重复,每个重复6头,在15～30,>30～60,>60～100 kg体重阶段分别饲喂不同能量和蛋白质水平日粮,能量水平为:高消化能(HE,14.22 MJ/kg)、中消化能(ME,12.89 MJ/kg)和低消化能(LE,11.74 MJ/kg),蛋白水平为:高蛋白质(HP,18%,16%,14%)、中蛋白质(MP,16%,14%,12%)和低蛋白质(LP,14%,12%和10%),在体重30,60,100 kg体重时分批屠宰,取血液、肝脏及肌肉组织样品,测定血糖、肝糖原、肌糖原和肌肉中乳酸的含量及肌肉中乳酸脱氢酶、钠钾ATP酶(Na+K+-ATP酶)和钙镁ATP酶(Ca2+Mg2+-ATP酶)的活性。结果表明,乌金猪血糖、肝糖原、肌糖原和肌肉中乳酸的含量及肌肉中乳酸脱氢酶、Na+K+-ATP酶和Ca2+Mg2+-ATP酶的活性随日粮能量和蛋白质水平的升高而升高;在60 kg体重时,高能量和高蛋白质日粮组乌金猪上述各项指标均明显升高(P<0.05),在100 kg体重时,高能量和高蛋白质日粮组乌金猪血糖、肝糖原和肌糖原的含量及Na+K+-ATP酶和Ca2+Mg2+-ATP酶的活性明显高于低能量和低蛋白质组(P<0.05)。本次试验结果表明高能量和高蛋白质日粮(HE,14.22 MJ/kg和HP,18%)可促进乌金猪肝糖原和肌糖原的合成,肌肉组织中糖酵解途径供能增加,能量代谢加强。研究结果对阐明日粮不同营养水平对猪肌肉组织能量代谢的影响机制具有重要科学意义。
- 潘洪彬李长强黄英张永云赵素梅葛长荣张曦高士争
- 关键词：乌金猪日粮能量水平日粮蛋白水平肌肉组织能量代谢
