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三疣梭子蟹高产抗病品系选育: 王春琳母昌考金珊崔朝霞吴丹华郑萍萍张樱陈寅儿张得水韩昌茂伊祥华; 三疣梭子蟹是一种大型海产经济蟹类,具有食用价值高、生长快的特点,在该省水产经济中占有重要的地位.近年来,三疣梭子蟹养殖面积不断扩大,产量与产值不断增长,仅浙江省每年的产量就达2.4万吨,年产值超过16亿元.由于养殖规模的...; 关键词：; 关键词：三疣梭子蟹品种选育病害防治

三疣梭子蟹脂多糖-β-1,3-葡聚糖结合蛋白基因的克隆及表达模式分析被引量：2: 2010年; 脂多糖-β-1,3-葡聚糖结合蛋白(LGBP)作为一种模式识别受体在甲壳动物的先天免疫中占有重要地位。利用SMART RACE技术,从三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)血细胞中克隆得到一条LGBP基因。该基因cDNA序列全长为1378bp,包括1095bp的开放阅读框(ORF),共编码365个氨基酸,在基因的5'端还含有138bp的非编码区(UTR),3'端含有144bp的UTR。预测的成熟肽相对分子质量为39825.24k,等电点为4.49。同时,用生物信息学方法对该基因的序列和二级结构进行了初步分析。RT-PCR结果显示:LGBP基因在被检测的组织,包括血细胞、肝胰腺、心脏、鳃和肌肉中都有表达。用金黄色葡萄球菌(Staphyloccocus aureus)和溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)刺激三疣梭子蟹后,发现在实验48h内,混合细菌刺激组血细胞中LGBP基因的表达量明显高于生理盐水对照组,推测该基因在抵抗细菌感染的免疫过程中发挥着积极的作用。; 张樱金珊赵青松王国良余开王春琳; 关键词：三疣梭子蟹 RT-PCR

三疣梭子蟹LGBP基因的重组表达及微生物结合实验被引量：1: 2011年; 将扩增得到的三疣梭子蟹LGBP基因开放阅读框与表达载体pET-22b(+)连接,转化E.coil BL21(DE3)plysE后IPTG诱导表达。经SDS-PAGE检测,发现诱导组比空载体和未诱导组多出一条分子量约为41 ku的表达产物,与预测的重组蛋白分子量大小基本一致。重组质粒在不同IPTG浓度和不同温度条件下诱导表达产物的SDS-PAGE分析结果显示,低浓度0.4 mmol/L IPTG和30℃诱导能有效减少菌体蛋白的本底表达。用纯化的重组蛋白连续免疫小鼠,4周后得到抗血清,经Western-blotting检测,其具有很好的特异性。微生物结合实验表明,重组表达的pET-LGBP具有较强的生物活性,其与丹麦啤酒酵母、巨大芽孢杆菌、副溶血弧菌、溶藻弧菌、大肠杆菌等均有结合能力。; 陈寅儿金珊张樱赵青松王国良王春琳; 关键词：三疣梭子蟹抗血清

三疣梭子蟹LGBP基因的克隆与表达研究: 脂多糖-β-1，3-葡聚糖结合蛋白(LGBP)作为一种模式识别受体在甲壳动物的先天免疫中占有重要地位。本文以三疣梭子蟹为研究对象，采用分子克隆和重组表达技术，对三疣梭子蟹的LGBP进行了基因克隆、表达模式、体外重组表达以...; 张樱; 关键词：三疣梭子蟹 RACE RT-PCR 抗血清制备溶藻弧菌; 文献传递

三疣梭子蟹溶藻弧菌疾病模型的构建被引量：2: 2010年; 采用溶藻弧菌(107 CFU.mL-1)对三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)进行人工感染试验,于感染后0、24、48和72h分别观察蟹体的行动、体表及内部器官组织的病理变化,测定血细胞密度(THCs)及血淋巴、肌肉、肝胰腺3种主要组织中的碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)、过氧化物酶(POD)活性和总抗氧化能力(T-AOC)水平.结果表明:三疣梭子蟹感染溶藻弧菌24h后其行动、体表及内部器官组织等病理症状逐渐明显,肝胰腺、血淋巴、肌肉等3种主要组织中的AKP、ACP、POD活性和T-AOC水平及THCs变化显著,可作为疾病模型构建的指标.由于药物防治主要针对早期发病群体,因此,疾病模型构建的时间选择病原菌感染后24h.采用上述方法构建的三疣梭子蟹溶藻弧菌疾病模型在相同条件下可重复性较强,并便于观测感染前后蟹体的变化情况.; 张樱赵青松秦方锦沈理金珊; 关键词：三疣梭子蟹溶藻弧菌疾病模型

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张樱