张彦斌
- 作品数:14 被引量:39H指数:3
- 供职机构:首都医科大学附属北京世纪坛医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家教育部博士点基金北京大学人民医院研究与发展基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 肌动蛋白结合蛋白transgelin-2在结直肠癌中的表达及其意义被引量:2
- 2012年
- 目的探讨结直肠癌组织中肌动蛋白结合蛋白transgelin-2的表达及其与临床病理因素的关系,评价transgelin-2在结直肠癌预后判断中的价值。方法应用组织芯片结合免疫组化方法,检测2002年9月至2004年4月120例手术切除的结直肠癌患者组织中transgelin-2的表达情况,男性74例,女性46例,年龄26—89岁,中位年龄64.5岁。采用x。检验其与临床病理因素的关系,Log-rank检测生存率差别,Cox比例风险模型分析多个变量对生存时间的影响。结果transgelin-2在结直肠癌组织中的阳性表达率为69.2%。transgelin-2的表达与分化程度(X。=5.420)、淋巴结转移(x2=45.577)、远处转移(x2=12.009)及TNM分期(x2=47.577)相关(P〈0.05)。transgelin-2阳性表达者术后生存时间(39±5)个月,阴性表达者为(59±3)个月,Kaplan—Meier生存分析显示,transgelin-2表达与生存时间密切相关(P=0.003)。Cox分析显示,远处转移(RR=8.318,95%CI:4.119~16.790)、淋巴结转移(RR=2.794,95%CI:1.246—6.263)和transgelin-2表达(RR=1.834,95%CI:1.118~2.793)是影响结直肠癌患者预后的独立因素(P〈0.05)。结论肌动蛋白结合蛋白transgelin-2的表达水平与结直肠癌临床病理因素及预后相关,可能成为判断结直肠癌转移和预后的潜在标志物。
- 禚洪庆张彦斌张辉郭鹏吕游董令仪姜可伟叶颖江王杉
- 关键词:结直肠肿瘤微丝蛋白质类免疫组织化学组织阵列分析
- Transgelin-2促进结肠癌细胞迁移侵袭的机制被引量:2
- 2016年
- 目的 探讨Transgelin-2过表达对结肠癌细胞侵袭转移的影响及其机制.方法 反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot技术检测5种结肠癌细胞株中Transgelin-2的mRNA和蛋白表达,筛选出Transgelin-2低表达细胞株SW480;以MegaTran 1.0试剂进行质粒转染,建立Transgelin-2过表达的结肠癌细胞模型;Transwell法检测Transgelin-2过表达对结肠癌细胞迁移侵袭能力的影响;激光共聚焦显微镜、透射电镜分别观察Transgelin-2过表达结肠癌细胞微丝的变化;纤维状肌动蛋白(F-actin)体外结合共沉淀实验验证Transgelin-2与F-actin的相互作用;激光共聚焦显微镜观察Transgelin-2与F-actin在细胞中的定位.结果 Transgelin-2过表达组的迁移细胞数在15 h[(207.27±62.26)个]、24 h[(179.00±32.08)个]均明显多于对照组[(114.13±29.17)个;(95.07±33.18)个;P<0.05]及转染空载体组[(120.33±26.40)个;(95.93±28.66)个;P<0.05];细胞中F-actin与单体球状肌动蛋白(G-actin)的相对含量发生明显变化,两者的荧光强度比值(18.7±8.6)较对照组(6.2±7.2)、空载体组均显著增加(8.8±4.0,P<0.05),提示发生微丝重塑;透射电镜观察发现过表达Transgelin-2的结肠癌细胞F-actin明显增多;F-actin体外结合共沉淀实验显示Transgelin-2与肌动蛋白存在体外的相互作用;激光共聚焦显微镜免疫荧光检测显示Transgelin-2与F-actin存在体内的共定位.结论 Transgelin-2可能通过参与调节微丝的重塑促进结肠癌细胞的迁移侵袭.
- 周静张彦斌张辉梁斌叶颖江王杉
- 关键词:结肠癌
- 差异蛋白transgelin-2过表达对结肠癌细胞生物学行为的影响
- 2016年
- 目的探讨差异蛋白transgelin-2过表达对结肠癌细胞增殖、凋亡和迁移侵袭能力等生物学行为的影响。方法通过RT.PCR和Westernblot技术检测5种结肠癌细胞系中transgelin-2的mRNA和蛋白表达情况.筛选transgelin-2低表达细胞系;以MegaTran1.0试剂进行质粒转染实验,建立transgelin-2过表达的结肠癌细胞模型:用CCK-8法、流式细胞术和Transwell法分别检测transgelin-2过表达对结肠癌细胞增殖、凋亡和迁移侵袭能力的影响。结果转染过表达transgelin-2质粒后,结肠癌细胞增殖和凋亡无明显变化:在无血清培养15h后,transgelin-2过表达组穿过Transwell小室基质胶的细胞数(207±62)多于空白对照组(114±29)和转染空载体组(120±26),差异有统计学意义(F=7.302,P〈0.05):培养24h后,transgelin-2过表达组穿过Transwell小室基质胶的细胞数(179±32)多于空白对照组(95±33)和转染空载体组(95±28),差异有统计学意义(F=10.960,P〈0.05)。结论transgelin.2过表达可促进结肠癌细胞的迁移侵袭。
- 周静张彦斌张辉梁斌叶颖江王杉
- 关键词:结肠肿瘤肿瘤侵润
- 复杂直肠阴道(尿道)瘘修补新技术前瞻性研究
- 直肠阴道瘘系直肠阴道间出现窦道,被覆上皮,这种瘘占所有肛直肠瘘的5%。直肠尿道瘘则是直肠和尿道之间出现窦道,尿道和直肠相通的一种状态。直肠阴道瘘与直肠尿道瘘均有先天性及后天性病因。先天性瘘包括肛门闭锁及不通,后天病因包括...
- 罗成华陈小兵李兵廖代祥张彦斌杨盈赤于军辉郝玉娟
- 文献传递
- BAP31在结直肠癌中的表达及临床意义被引量:1
- 2011年
- 采用组织芯片技术和免疫组织化学染色法检测B细胞受体相关蛋白31(B cell receptor associated protein31,BAP31)在120例结直肠癌组织及其配对远端正常组织中的表达情况,并分析其与临床病理特征之间的关系.结果显示,BAP31主要定位于胞浆,正常黏膜上皮呈阴性或弱阳性表达.在结直肠癌组织中阳性表达率为64.17%,明显高于正常黏膜上皮中的6.67%,差异具有统计学意义(P=0.000).BAP31阴性表达与结直肠癌的低分化程度(P=0.001)及远处转移相关(P=0.036).BAP31阴性患者总体生存率明显低于阳性患者(P=0.003).因此,BAP31可能是判断结直肠癌预后的潜在指标,并与肿瘤的侵袭性行为有关.
- 董令仪姜可伟张彦斌张辉禚洪庆崔志荣叶颖江王杉
- 关键词:结直肠癌组织芯片免疫组化
- 靶向敲低核蛋白1抑制HepG2肝癌细胞的增殖及迁移被引量:5
- 2015年
- 目的观察应激相关核蛋白1(Nupr1)在不同肝癌细胞系中的表达,通过靶向敲低Hep G2肝癌细胞Nupr1,观察其对肝癌细胞增殖及迁移的影响。方法通过实时定量PCR检测BEL-7402、QSG-7703、SMMC-7721、Hep G2肝癌细胞中Nupr1的表达。采用RNA干扰技术敲低Hep G2细胞中Nupr1的表达,通过MTT法及集落形成实验比较细胞的增殖能力的变化,用流式细胞术进行细胞周期分析,利用TranswellTM实验观察Nupr1对细胞迁移能力的影响。结果 Hep G2人肝癌细胞中Nupr1的表达显著高于其他肝癌细胞系。靶向Nupr1的2个短发夹RNA(shRNA)均能有效敲低Hep G2肝癌细胞中Nupr1的表达,抑制效率分别为72.25%和84.25%。Nupr1表达降低能够抑制细胞增殖,导致细胞周期发生G1期阻滞。Nupr1敲低显著降低细胞的迁移能力及集落形成能力。Western blot结果显示Nupr-1表达降低能够上调细胞周期负性调控因子p21和p27的表达水平。结论靶向敲低Nupr1抑制Hep G2肝癌细胞的增殖及迁移。
- 黄红艳张彦斌王小利周心娜李莎王嫚娜任军
- 关键词:肝癌增殖迁移细胞周期
- 联合应用激光捕获显微切割技术及乙酰化稳定同位素标记定量技术在结直肠癌蛋白质组学研究中的价值
- 2012年
- 目的应用蛋白质组学技术,建立结直肠癌蛋白质组差异表达谱,筛选结直肠癌发生发展相关差异蛋白质。方法应用激光捕获显微切割技术,获取20例结直肠腺癌及配对的正常黏膜、20例绒毛状腺瘤、8例结直肠癌肝转移灶的靶细胞;然后应用基于乙酰化稳定同位素标记的定量蛋白质组学策略寻找差异蛋白。结果获得具有定量信息的高可信度蛋白873个。其中腺癌与正常黏膜、腺瘤及肝转移灶之间差异显著的蛋白质(定量比值≥2或≤0.5)分别为137、119和77个。结直肠癌与正常黏膜之间的差异蛋白在定位上几乎分布于细胞的各个部位。结论联合应用激光捕获显微切割技术及乙酰化稳定同位素标记定量技术进行结直肠癌蛋白质组学研究,发现的差异蛋白功能上参与多种生物学过程,表明本研究所采取的技术策略有很好的蛋白鉴定覆盖率,可成为研究肿瘤蛋白质组学的有效策略。
- 吕亮张彦斌禚洪庆张辉姜可伟叶颖江王杉
- 关键词:结直肠肿瘤蛋白质组学激光捕获显微切割技术
- 两种方法分离免疫细胞用于高通量测序TCR组库分析的比较被引量:1
- 2015年
- 目的探讨两种方法分离免疫细胞进行高通量T细胞表面的T细胞变体(TCR),组库分析的区别及可行性。方法分别采用免疫磁珠分选纯化CD3阳性T细胞和Ficoll-Paque梯度离心法分离外周血淋巴细胞的方法制备TCR测序所需样品各1例,提取DNA后多重聚合酶链式反应(PCR)扩增CDR3区域,将扩增得到的PCR产物纯化后构建免疫组库,进行高通量测序及生物信息学分析。结果两种方法获得的免疫细胞提取DNA后均能够满足TCR免疫组库建库需要,高通量测序结果显示互补决定簇3(CDR3)区域长度呈高斯分布,来自健康志愿者的TCR具有丰富多样性,肿瘤患者TCR多样性呈寡克隆分布。结论纯化的T细胞或者直接分离得到的淋巴细胞均可用于免疫组库构建及后续TCR CDR3受体库高通量测序分析,TCR CDR3多样性可能直接反应机体免疫状态。
- 黄红艳王小利周心娜张彦斌李莎任军
- 关键词:T细胞受体高通量测序
- 肌动蛋白结合蛋白transgelin-2在结直肠癌中的表达及其临床意义
- 目的探讨结直肠癌组织中肌动蛋白结合蛋白transgelin-2的表达及其与临床病理因素的关系,评价transgelin-2在结直肠癌预后判断中的价值。方法应用组织芯片结合免疫组织化学法,检测2002年9月到2004年4月...
- 周静禚洪庆张彦斌张辉叶颖江王杉
- 文献传递
- 复杂直肠阴道(尿道)瘘修补新技术前瞻性研究
- 肛直肠及前列腺肿瘤行盆部或会阴部放疗是引起直肠尿道瘘的最常见原因.由于直肠阴道瘘及直肠尿道瘘处理困难,复发率高,所以成为临床上的难症,我科近年处理的复杂直肠阴道瘘及直肠尿道瘘经验,总结为修补前行结肠造口较重要,本组22例...
- 罗成华陈小兵李兵廖代祥张彦斌杨盈赤于军辉郝玉娟
- 关键词:直肠阴道瘘直肠尿道瘘修补术
- 文献传递