张家豪
- 作品数：7 被引量：35H指数：3
- 供职机构：扬州大学园艺与植物保护学院更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金江苏省农业科技自主创新基金转基因生物新品种培育专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 油菜Bnpgip2-1基因的克隆表达与生物信息学分析被引量：1
- 2014年
- 据GenBank及相关文献提供的序列设计引物,从油菜基因组DNA中扩增出Bnpgip2-1基因完整开放阅读框。该基因全长1 068bp,与已发表的Bnpgip2基因序列(登录号:AF529694)有98%的相似性。RT-PCR分析表明,该基因(已申请序列号为KJ820998)具一个72bp的内含子(544-615),编码区为996bp,含4个限制性内切酶酶切位点(AvaⅠ,185;HindⅢ,536;EcoRⅠ,929;Apa LⅠ,972)。原核表达该基因,表达产物能显著抑制油菜菌核病菌多聚半乳糖醛酸酶(PG)活性,抑制率达52.96%。生物信息学分析表明,表达产物Bn PGIP2-1有331个氨基酸,理论分子量为36.99k Da,p I为8.35,具强疏水性,主要存在于细胞壁。信号肽切点位于第22和23位氨基酸之间(SFS-KNL),N端和C端各存在5个和3个半胱氨酸残基,可形成3个二硫键;二级结构以α-螺旋(31.12%)、β折叠(16.01%)和无规则线圈(52.87%)为结构元件,具典型的LRR结构;三级结构为10个LRR按右手螺旋规则形成的一个开放裂隙区,可能负责其与病菌PG的互作。该基因的表达受病原菌侵染的强烈诱导,但对水杨酸(SA)处理不敏感,茉莉酸(JA)处理反而使其下调表达。
- 陈夕军张磊陈羽张家豪童蕴慧徐敬友
- 关键词：多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白原核表达生物信息学分析核盘菌
- 抗白粉病黄瓜品种的叶片组织结构及其生理生化被引量：14
- 2015年
- 为明确不同黄瓜品种对白粉病的抗性机制,采用组织切片和田间接种的方法,从近130份种质中筛选出高抗(GY14A、GY4)、中抗(津春4号、津优30号)、中感(W12757、仪黄)、高感(DE843、平望乳瓜)黄瓜品种各2份,并对8份黄瓜品种的形态结构与抗性生理生化进行研究。结果表明,高抗品种叶片组织结构紧凑,栅栏组织排列整齐、紧密,且细胞壁较厚;而高感品种则细胞壁较薄,叶片组织间出现大量空隙;中抗和中感品种虽具清晰的栅栏组织,但空隙较大,说明叶片组织细胞的排列整齐和紧密度以及细胞壁的厚度与黄瓜品种对白粉病的抗性密切相关。病原菌接种后,抗性品种体内防御酶活性上升速度与幅度都明显高于感病品种,且过氧化物酶(POD)同功酶谱带较深,H2O2积累较慢。另外,抗性品种叶片中可溶性蛋白质含量明显高于感病品种,而可溶性糖含量则明显低于感病品种,还原糖含量无明显差异。
- 陈夕军朱键鑫陈羽张青张家豪张孝然黄奔立
- 关键词：生理生化机制白粉病抗病性黄瓜
- 水稻纹枯病菌RsPG基因的克隆表达及致病性分析
- 多聚半乳糖醛酸酶是植物病原真菌重要的致病因子,也是病原菌接触寄主后产生的第一类水解酶.为明确多聚半乳糖醛酸酶在水稻纹枯病菌致病过程中的作用,以水稻纹枯病强致病菌株YN-7为研究对象,采用PCR、RT-PCR和RACE等方...
- 陈夕军张家豪张云张璐徐斌
- 关键词：真核表达水稻纹枯病菌
- 不同种植方式对水稻纹枯病发生的影响被引量：10
- 2013年
- 为了解不同种植方式条件下水稻纹枯病的发生与危害,进行多年连续调查。结果表明,在抛秧、移栽、机插和直播田块中,前期抛秧田病害发生最重,直播田最轻。随着时间的推移,除直播田外,各田块病害扩展迅速,但不同种植方式间发病率无明显差异。直播田从水稻分蘖盛期开始,病害扩展呈快速上升趋势,成为不同种植方式中病害最严重的田块,出现大面积的枯死、倒伏。不同种植方式下病害造成的损失率与发病严重程度呈正相关。
- 陈银凤张家豪张孝然徐蕾陈夕军
- 关键词：水稻纹枯病
- 水稻纹枯病菌Rspg1基因的克隆、表达及其编码产物生物信息学分析被引量：1
- 2014年
- 【目的】为克隆、表达水稻纹枯病菌Rspg1基因,明确其编码产物的生物学特性,为研究该基因在病菌致病过程及与寄主互作中的作用提供理论依据。【方法】据GenBank提供的相关序列设计特异引物扩增目的基因,并对之进行原核表达和生物信息学分析。【结果】从水稻纹枯病菌基因组DNA中扩增出一1395 bp的目的片段。RT-PCR分析表明,该片段为Rspg1基因的完整开放阅读框,含有5个内含子(278-334,57 bp;545-601,57 bp;657-715,59 bp;1090-1155,66 bp;1244-1304,61 bp),编码区为1 095 bp,编码一含有364个氨基酸的蛋白。原核表达Rspg1基因,表达产物大小约为40 kDa,具明显的多聚半乳糖醛酸酶(Polygalacturonase,PG)活性,活性值为277.78 U/mg。生物信息学分析表明,RsPG1中含有所有生物PG特有的严格保计序列180NTD、202DD、223GHG和255RIK,存在一18个氨基酸的信号肽分子;二级结构以α-螺旋、β-折叠和随机卷曲为其基本结构单元,6个半胱氨酸残基形成3个二硫键,跨膜结构预测以从胞内向胞外分泌为主;三级结构为10个重复的β-折叠环按右手螺旋规则排列形成的螺旋结构,形成一个开放的有活性的裂隙结构。【结论】Rspg1基因编码产物为一40 kDa蛋白,具明显的PG(Polygalacturonase,PG)活性,以胞外分泌为主,且有一个开放的有活性的裂隙结构。
- 陈夕军王友德张家豪左示敏童蕴慧潘学彪徐敬友
- 关键词：生物信息学分析水稻纹枯病菌
- 氯化胆碱诱导黄瓜抗白粉病机理研究被引量：1
- 2013年
- 氯化胆碱是一种新型广效的生长调节剂,以10mmol·L-1氯化胆碱处理黄瓜幼苗可明显提高植株的株高、根长、鲜质量、干质量和叶绿素含量。诱导抗性机理研究表明:氯化胆碱处理后,黄瓜幼苗体内β-1,3-葡聚糖酶、几丁质酶活性及富含羟脯氨酸糖蛋白、丙二醛含量均明显上升。以白粉病菌分生孢子接种经氯化胆碱处理过的黄瓜叶片,结果显示分生孢子萌发率较低,芽管较短,且新产生的分生孢子串数量较少。用氯化胆碱处理黄瓜植株,可延迟和减轻黄瓜白粉病的发生。
- 陈夕军沈世炜陈银凤张青张家豪张孝然黄奔立
- 关键词：氯化胆碱黄瓜白粉病诱导抗性抗性机理
- 不同抗性水平水稻品种对纹枯病菌毒素的防卫反应与生理差异被引量：8
- 2014年
- 毒素是水稻纹枯病菌(立枯丝核菌Rhizoctonia solani AG1-IA)的重要致病因子。研究水稻对毒素的抗性反应、耐受性与对纹枯病菌的抗性间的关系,可为利用毒素快速筛选、鉴定水稻品种的抗病性提供参考依据。研究显示,经乙醚萃取、硅胶柱层析获得的纹枯病菌毒素可显著抑制水稻胚根伸长、诱导典型的纹枯病水渍斑,具有明显生物学活性;以一定浓度的毒素处理水稻植株,可诱导寄主体内过氧化物酶、多酚氧化酶、苯丙氨酸解氨酶和超氧化物歧化酶等防御酶活性升高,且速度或程度与品种抗性水平有关,抗病品种的酶活明显高于感病品种。水稻品种对纹枯病的抗性越强,毒素对其胚根伸长抑制率、细胞膜损伤率和磷素外渗率就越低。毒素活性在长时间光照、高温、强酸、强碱和强氧化性化合物如高锰酸钾中明显下降。
- 左示敏陈夕军陈红旗徐艳张家豪陈羽陈宗祥童蕴慧徐敬友潘学彪
- 关键词：水稻纹枯病菌毒素抗性
