巫生文 作品数:72 被引量:96 H指数:6 供职机构: 中国医科大学公共卫生学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 辽宁省科技厅基金 辽宁省教育厅高等学校科学研究项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 理学 文化科学 更多>>
放线菌素D处理V79细胞后CM诱导旁观者效应的实验研究 暴露于辐射,药物等(作用于DNA等遗传物质)的细胞会发生明显的生物学效应,这种效应在直接暴露的靶细胞或间接暴露的正常细胞中都会产生,后种现象称为旁观者效应(bystander effect,BE),发生这种效应的细胞称为... 靳翠红 巫生文 刘秋芳 马健飞 蔡原关键词:放线菌素D 旁观者效应 文献传递 ACTD对V79旁观者细胞光学和超微结构影响 2012年 目的观察放线菌素D(ACTD)对靶细胞和旁观者细胞的光学和超微结构影响,探讨ACTD能否诱导旁观者效应(BE)。方法用不同剂量ACTD(0、0.25、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0 mg/L)处理V79靶细胞1 h,在4 mg/LACTD作用4、81、2和24 h取靶细胞去细胞培养液(CM),培养正常细胞24 h后,观察BE;形态学观察用倒置光学显微镜,超微结构用透射电子显微镜观察,存活率用克隆形成实验检测。结果随着ACTD剂量增加,靶细胞数量逐渐减少,而变形细胞数量增多;CM处理旁观者细胞数目减少,脱壁增加;超微结构观察CM处理旁观者细胞出现凋亡征象,光学及超微结构改变均以4 h CM组效应最重,随CM时段延后减轻;细胞存活率在4、8、12、24 h CM组分别为(59.5±3.4)%(、69.2±4.5)%(、88.8±5.2)%和(61.3±6.8)%,均低于对照组,高于4 mg/L ACTD组(50.0±6.5)%(P<0.05)。结论 ACTD可以诱导旁观者细胞凋亡,以4 h CM效应最强。 靳翠红 巫生文 逯晓波 刘秋芳 刘洋 蔡原关键词:放线菌素D 条件培养液 旁观者效应 超微结构 ACTD处理对旁观者V79细胞ROS和细胞色素C分布的影响 2012年 目的观察放线菌素D(actinomycin D,ACTD)处理V79靶细胞获得的条件培养液(conditioned medium,CM)对V79旁观者细胞ROS水平和细胞色素C(Cytochorome C,Cyt C)分布的影响,以研究ACTD诱导旁观者效应发生的可能机制。方法 4.0 mg/L ACTD处理V79靶细胞1 h,磷酸盐缓冲液(PBS)洗3次,加入新鲜培养液开始计时,分别在4、8、12和24 h获取靶细胞条件培养液CM。用不同时段CM培养正常V79细胞24 h后,流式细胞仪观察旁观者细胞ROS水平;比色法测定胞浆和线粒体细胞色素C含量。结果 CM处理组旁观者细胞ROS水平均高于对照组,随着时段的延后,ROS水平逐渐降低(P<0.01),24 h又增加(P<0.01)。对照组线粒体内Cyt C含量最高,在各CM处理组旁观者细胞线粒体Cyt C含量均有不同程度下降,4 h CM组含量最低,随着时段延后,线粒体Cyt C含量增加,但没达到对照组水平,24 h又趋下降。胞浆内Cyt C含量变化趋势与之相反,对照组Cyt C含量最低,CM处理组胞浆Cyt C含量增加,4 h最高随后下降,24 h又明显增加。结论 ACTD诱导旁观者效应可能通过靶细胞的CM影响旁观者细胞ROS的产生,并造成细胞色素C从线粒体释放而引起的。 靳翠红 刘秋芳 巫生文 逯晓波 刘洋 蔡原关键词:放线菌素D 条件培养液 ROS 细胞色素C 自噬与神经退行性疾病的研究进展 神经退行性疾病是由中枢神经系统神经元退行性改变而产生的,大多呈慢性、进行性发展的一组疾病的总称,主要表现为痴呆,其发病机制目前仍不清楚.目前,全球范围内神经退行性疾病患病率逐年升高,已累及3700万人,据估算到2050年... 靳翠红 曹阳 钟起详 巫生文 逯晓波 杨敬华 蔡原关键词:自噬 神经退行性疾病 亚慢性铝暴露对大鼠神经行为学,海马细胞SIRT1、TORC1水平及超微结构的影响 【目的】通过研究亚慢性铝暴露对大鼠神经行为学及海马神经元SIRT1、TORC1水平的影响,来探讨铝损伤大鼠学习记忆能力的可能机制。【方法】本研究通过饮水染毒90天建立亚慢性铝暴露大鼠模型(对照组饮蒸馏水,低、中、高剂量组... 靳翠红 闫冬莹 曹阳 王露露 巫生文 逯晓波 杨敬华 刘秋芳 蔡原关键词:SIRT1 文献传递 氯化镧对大鼠大脑皮质内质网应激凋亡途径的影响 目的 研究氯化镧(LaCl3)对大鼠大脑皮质内质网应激凋亡途径的影响,探讨LaCl3对大脑皮质产生毒性作用的机制.方法 40只Wistar雌性成年大鼠随机分成对照和低、中、高剂量LaCl3染毒组,低、中、高剂量LaCl3... 杨敬华 刘秋芳 巫生文 逯晓波 靳翠红 蔡原关键词:氯化镧 大脑皮质 凋亡 内质网应激 线粒体相关DAMPs在神经退行性疾病发生发展中的作用 神经退行性疾病(neurodegenerative diseases,NDDs)是一种慢性进行性神经系统损害性疾病,主要由神经元和其髓鞘随着时间的推移而逐渐丧失或恶化所致,主要包括阿尔兹海默症(Alzheimer′s d... 周星悦 张晴鹏 杨程颖 陆子葳 逯晓波 巫生文 杨敬华 靳翠红关键词:神经退行性疾病 神经炎症 线粒体 DAMPS 染铝对断乳大鼠学习记忆及海马细胞内Ca2+及磷脂酶和N-甲基-D-天冬氨酸受体α表达的影响 被引量:1 2010年 目的 研究亚慢性染铝对断乳大鼠学习记忆和海马细胞内Ca2+及磷脂酶C(phospholipase C,PLC)、N-甲基-D-天冬氨酸受体α(NMDARα)表达的影响,以探讨铝损伤发育中大鼠学习记忆的可能机制.方法 刚断乳Wistar大鼠40只,随机分为4组:对照组、低剂量组(饮用含0.2%AlCl3的蒸馏水溶液)、中剂量组(饮用含0.4%AlCl3的蒸馏水溶液)、高剂量组(饮用含0.6%AlCl3的蒸馏水溶液),每组10只.通过饮水亚慢性连续染毒90 d,跳台试验检测仔鼠学习记忆能力,荧光分光光度计法测定细胞内Ca2+浓度,免疫印迹(Western blot)法测定PLC、NMDARα的表达.结果 随着染铝剂量的增加,大鼠跳台试验的潜伏期明显缩短,低、中、高剂量组分别为(232.20±57.45)、(35.00±9.37)、(16.10±5.57)s,而错误次数明显增加,低、中、高剂量组分别为(1.10±0.74)、(2.20±0.92)、(3.40±1.51)次,与对照组[分别为(300.00±0.00)s、(0.00±0.00)次]比较,差异均有统计学意义(P〈0.05);而海马细胞内[Ca2+]i浓度明显下降,差异亦有统计学意义(P〈0.05);低、中、高剂量铝暴露组PLC、NMDARα的表达水平分别为0.30±0.06、0.18±0.04、0.16±0.03,0.38±0.03、0.32±0.02、0.25±0.02,较对照组(分别为0.47±0.07、0.48±0.04)明显降低,差异均有统计学意义(P〈0.01).结论 亚慢性铝暴露可以引起发育中学习记忆能力的损害,抑制NMDARα及PLC的表达,降低海马细胞内Ca2+水平,推测Ca2+信号系统的紊乱可能是铝损害学习记忆能力的机制之一. 靳翠红 巫生文 周平 刘秋芳 逯晓波 时利德 蔡原关键词:铝 磷脂酶C 镧对大鼠学习记忆及大脑皮质c-fos mRNA和c-Fos蛋白表达的影响 被引量:5 2009年 目的研究镧对学习记忆的影响,并从大脑皮质即刻早期基因表达的角度探讨镧影响学习记忆的机制。方法40只成年雌性Wistar大鼠随机分成对照组和低、中、高剂量染镧组,染镧组仔鼠在出生至断乳后1个月期间染镧,然后进行神经行为学测试(水迷宫和穿梭箱测试),测定大脑皮质中c-fosmRNA和c-Fos蛋白以及尼氏体表达情况。结果神经行为学测试结果显示染镧组仔鼠的学习记忆能力明显低于对照水平,呈现一定的量-效关系。低剂量染镧组仔鼠大脑皮质c-fosmRNA和c-Fos蛋白表达水平明显低于对照水平,中剂量染镧组仔鼠海马c-fosmRNA表达水平明显低于对照水平,c-Fos蛋白表达水平明显低于对照和低剂量染镧组,高剂量染镧组仔鼠大脑皮质c-fosmRNA和c-Fos蛋白表达水平均明显低于对照和低剂量染镧组。另外,低剂量染镧组大脑皮质神经细胞中尼氏体表达水平明显低于对照水平,中、高剂量染镧组大脑皮质神经细胞中尼氏体表达水平进一步减少。结论染镧造成学习记忆能力下降,这可能与染镧引起大脑皮质即刻早期基因的基因和蛋白表达水平下降、神经细胞功能削弱有一定关系。 杨敬华 蔡原 刘秋芳 张立丰 齐鸣 巫生文 鲁帅 程铭关键词:镧 学习记忆 大脑皮质 蛋白表达 环境毒理 放线菌素D所致V79细胞凋亡模型的建立 目的用RNA合成抑制剂——放线菌素D(ActD)作用于V79细胞不同剂量和时间,筛选出最适作用浓度和时间以建立稳定的V79细胞凋亡模型。为后续研究旁观者效应提供实验基础资料。方法不同剂量(0,0.25,0.5,1.0,2... 靳翠红 巫生文 齐鸣 鲁帅 逯晓波 刘秋芳 蔡原关键词:放线菌素D V79细胞 细胞凋亡 文献传递