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宋欣
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1
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供职机构:
天津医科大学代谢病医院卫生部激素与发育重点实验室
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国家自然科学基金
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相关领域:
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张岩
天津医科大学代谢病医院卫生部激...
陈樱
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2012
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高糖预处理影响单核细胞对热灭活金黄色葡萄球菌刺激的反应
2012年
目的观察高糖状态下热灭活金黄色葡萄球菌(HKSA)诱导的人单核细胞株THP-1凋亡特点,以及表达诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、白细胞介素(IL)-lBmRNA和IL-1β蛋白分泌规律。方法体外培养THP—1单核细胞,分别以5.5mmol/L葡萄糖(LG)和25.0mmol/L葡萄糖(HG)培养12h-8d。将HG和LG培养6d的单核细胞加入HKSA。分别于HKSA加入前和加入后2~48h提取单核细胞,检测细胞凋亡、IL-1β蛋白、iNOS和IL-1BmRNA表达。细胞凋亡采用AnnexinV与PI双染法,流式细胞技术检测;IL-1β蛋白分泌采用ELISA法检测;提取细胞总RNA,反转录生成cDNA后采用实时定量逆转录聚合酶链反应(real.timequantitativePCR)法,检测iNOS和IL-1βmRNA表达情况。结果(1)高糖刺激THP-1单核细胞12—48h后儿1β蛋白、iNOS和IL-18mRNA表达较刺激前显著增加(P〈0.05),iNOS和IL-1βmRNA表达在24h达最高值,IL-1β蛋白分泌48h达高峰。细胞凋亡在高糖刺激48h-4d较刺激前显著增加(P〈0.05)。(2)两组细胞加入HKSA后6~48h表达iNOS和L-lβ显著高于刺激前(P〈0.01),24h达高峰,48h表达下降;IL-1β蛋白分泌在48h达最高值。两组细胞凋亡率在加入HKSA后12h、24h、48h逐渐增加(P〈0.01)。单核细胞加入HKSA前和加入HKSA后12h,高糖组与低糖组比较,高糖组IL-1β蛋白、iNOS和IL-1BmRNA表达均低于低糖组,凋亡率高于低糖组(P〈0.05)。结论高糖和HKSA对单核细胞分泌IL-1β蛋白、表达iNOS和IL-1BmRNA的影响与刺激时间有关;单核细胞处于持续高糖状态时,高糖可以增加细胞凋亡率,降低IL-1β蛋白分泌、iNOS和IL-1β表达。
陈樱
张岩
宋欣
孙培
常柏
李海东
孟东
李巧芬
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高糖
单核细胞
凋亡
INOS
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